本文由 上海語燕生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2024-09-30 10:02 1039閱讀次數(shù)

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• 植物游離氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  植物游離氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途植物游離氨基酸含量比色法定量檢測試劑是一種旨在通過顯色染料茚三酮與游離氨基酸的氨基發(fā)生反應(yīng)，在熱處理下，產(chǎn)生藍色復(fù)合物，由分光光度儀比色分析，定量檢測樣品中游離氨基酸含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心設(shè)計、成功實驗證明的。適用于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）等裂解懸液樣品的游離氨基酸含量檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測準確。技術(shù)背景氨基酸（aminoacid或α-aminoacid）是一種含有胺和羧基功能基團的分子，為生物體中Z必須的元素。根據(jù)其側(cè)鏈的不同，分成四類（弱酸、弱堿、極性、非極性）和20種各種不同的氨基酸；根據(jù)其光學(xué)異構(gòu)體（opticalisomers），又分成L型和D型。L-氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的主要結(jié)構(gòu)分子。氨基酸是多肽、蛋白質(zhì)和輔酶等的組成單位，具有各種代謝作用和營養(yǎng)價值。基于游離氨基酸的游離氨基與茚三酮（ninhydrin）反應(yīng)，產(chǎn)生中間產(chǎn)物酮酸（ketoacid）和氨分子，進而在熱處理下，進行脫羧基過程（僅發(fā)生于游離氨基酸），同時產(chǎn)生藍色復(fù)合物，在分光光度儀（570nm波長）下，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，來定量分析游離氨基酸的總含量。其反應(yīng)系統(tǒng)如下：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升萃取液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升反應(yīng)液（ReagentD）毫升標準液（ReagentE）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存萃取液（ReagentB）和標準液（ReagentE）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反應(yīng)液（ReagentD）具有揮發(fā)性，嚴格密閉瓶蓋，避免光照；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標準液配制和樣品操作的容器15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器干式恒溫儀：用于反應(yīng)孵育DOUNCE勻漿器：用于裂解組織微型臺式離心機：用于樣品操作比色皿：用于比色分析的容器分光光度儀：用于比色分析實驗步驟一、樣品準備準備好新鮮的植物組織（葉片、谷粒、種子等），并秤重以確定1克組織重量（選擇步驟）放進預(yù)冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入xx毫升清理液（ReagentA）清洗1次即刻用刀片切碎組織放進一個預(yù)冷的15毫升錐形離心管加入預(yù)冷的xx毫升萃取液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放進預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約80下）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管，放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為5000g（或7500RPM，例如eppendorf5415）小心移出上清液（注意：不要觸碰沉淀物）到另一個新的預(yù)冷的1.5毫升離心管（選擇步驟）如果上清液含有肉眼可見的殘渣，重復(fù)離心5分鐘一次，速度為5000g（或7500RPM，例如eppendorf5415）移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）放進－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、標準樣品配制準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至5號管分別加入xx微升緩沖液（ReagentC）到1至5號管移取xx微升標準液（ReagentE）到1號管，混勻小心移取xx微升1號管稀釋的標準液（ReagentE）到2號管，混勻小心移取xx微升2號管稀釋的標準液（ReagentE）到3號管，混勻小心移取xx微升3號管稀釋的標準液（ReagentE）到4號管，混勻?qū)?至5號管放進冰槽里備用；標準管濃度見下表管號緩沖液（ReagentC）標準液（ReagentE）標準氨基酸濃度1xx微升xx微升xx微摩爾/升2xx微升xx微升1號管xx微摩爾/升3xx微升xx微升2號管xx微摩爾/升4xx微升xx微升3號管xx微摩爾/升5xx微升00微摩爾/升標準曲線測定加入xx微升緩沖液（ReagentC）到1.5毫升離心管加入xx微升上述配制的標準液（ReagentE）加入xx微升反應(yīng)液（ReagentD）渦旋震蕩15秒放進90℃干式恒溫儀孵育5分鐘，避免光照放進冰槽里1分鐘轉(zhuǎn)移到比色皿即刻放進分光光度儀檢測（波長570nm）：獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實驗步驟1至8四次構(gòu)建標準曲線：縱座標（Y軸）為吸光讀數(shù)；橫座標（X軸）為標準氨基酸濃度（微摩爾/升）樣品測定加入xx微升緩沖液（ReagentC）到1.5毫升離心管加入500微升待測樣品加入xx微升反應(yīng)液（ReagentD）渦旋震蕩15秒放進90℃干式恒溫儀孵育5分鐘，避免光照放進冰槽里1分鐘轉(zhuǎn)移到比色皿即刻放進分光光度儀檢測（波長570nm）：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標準曲線獲得樣品對應(yīng)氨基酸濃度（微摩爾/升）濃度計算根據(jù)標準曲線獲得樣品對應(yīng)氨基酸濃度（微摩爾/升）X稀釋倍數(shù)=（微摩爾/升）注意事項本產(chǎn)品為25次操作，包括標準樣品避免使用Tris緩沖液、尿素等胺類物質(zhì)處理樣品操作時，須戴手套系統(tǒng)操作時，標準樣品測定只需1次反應(yīng)液（ReagentD）具有揮發(fā)性，嚴格密閉瓶蓋，避免光照孵育時，避免光照本公司提供系列氨基酸檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]

  2024-09-30 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 組織黑色素含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  組織黑色素含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2024-09-11 18:03

  課件

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• 植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量檢測試劑盒

  主要用途植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸與受到α-淀粉酶中性環(huán)境下水解產(chǎn)生的還原基團分子反應(yīng)，生成強烈吸光的3-氨基-5-硝基水楊酸，即采用比色法測定其還原后峰值的升高變化，以此測定樣品中α-淀粉酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等裂解萃取液樣品α-淀粉酶的活性檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景淀粉酶（AMYLASE）屬于糖苷水解酶類（glycosidehydrolase）。淀粉酶通過水解方式，分解淀粉的α－1，4鏈接，釋放出葡萄糖、麥芽糖（maltose）、麥芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等簡單糖分子。淀粉酶分成三類：α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶（EC3.2.1.1），又稱為α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶（α-1,4-glucan4-glucanohydrolase）或糖原酶（glycogenase），是鈣離子依賴性鈣金屬蛋白酶（calciummetalloenzyme），分解淀粉為葡萄糖、麥芽糖（maltose）、麥芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等，為主要的消化酶，尤其在人體中，例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶（EC3.2.1.2），又稱為α-1,4-葡聚糖麥芽糖水解酶（1,4-α-D-glucanmaltohydrolase）或糖基淀粉酶（saccharogenamylase），分解淀粉為葡萄糖等。植物、真菌、細菌等均能產(chǎn)生，而人體組織不含有。γ-淀粉酶（EC3.2.1.2），又稱為α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶（Glucan1,4-α-glucosidase）或溶酶體α-葡萄糖苷酶（lysosomalα-glucosidase），在酸性環(huán)境下分解淀粉為葡萄糖。淀粉是一種復(fù)雜分子，由多聚糖直鏈淀粉（amylose）和支鏈淀粉（amylopectin）構(gòu)成。植物和細菌產(chǎn)生大多數(shù)淀粉。在淀粉酶的催化作用下，分解產(chǎn)生簡單糖分子，作為能源儲存，植物用于光合作用。植物和細菌性淀粉酶常用于工業(yè)，包括烘培食物和乳制品的制造，以及酒精和紙材的生產(chǎn)?；诘矸郏谥行原h(huán)境下，通過α-淀粉酶的水解，釋放出麥芽糖等含有游離的還原性基團（例如酮基等），進一步使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸（3,5-Dinitrosalicylicacid；DNS）與之反應(yīng)，產(chǎn)生紅棕色的3-氨基-5-硝基水楊酸（3-amino-5-nitrosalicylicacid），在分光光度儀（540nm波長）下測定，以定量分析α-淀粉酶的活性。其反應(yīng)方式為：[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 組織半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  組織半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-19 00:00

  期刊論文

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• 植物堿性焦磷酸酶活性比色法法定量檢測試劑盒

  主要用途植物堿性焦磷酸酶（AlkalinePyrophosphatase）活性比色法法定量檢測試劑是一種旨在使用無機焦磷酸，在堿性焦磷酸酶去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍顯色反應(yīng)后峰值的變化，采用比色法測定其峰值的變化，以此進行測算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種植物組織，包括種子、球莖（bulb）、塊莖（tuber）、根（root）、種葉（coleoptile）和葉片裂解懸液樣品或純化以及粗提的酶蛋白的堿性焦磷酸酶活性及其YZ劑的檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景焦磷酸酶（Pyrophosphatase；PPase；；EC3.6.1.1），又稱為無機焦磷酸酶（inorganicpyrophosphatase），屬于磷酸酶家族，包括磷酸單酯酶（phosphomonoesterase）、磷酸二酯酶（phosphodiesterase）等。通過釋放磷酸根，參與DNA合成、RNA合成、輔酶合成、鈣吸收、骨形成、氨基酸合成和脂肪酸代謝的激活等代謝活動。焦磷酸酶分為堿性和酸性，前者作用于合成代謝，而后者作用于分解反應(yīng)。焦磷酸酶催化無機焦磷酸水解產(chǎn)生2個磷酸根離子的反應(yīng)，為能量釋放反應(yīng)（exergonicreaction）。在植物中，尤其碳4或碳3植物的葉片中，活性Z高。在固碳還原和光合作用起著重要作用成為碳4植物通路的指標。基于底物無機焦磷酸，在堿性條件下，受到堿性焦磷酸酶的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長）產(chǎn)生峰值的變化，由此測定堿性焦磷酸酶的活性。[詳細]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• UHPLC-QuadrupoleMS檢測十字花科植物中的游離氨基酸

  中文摘要:采用超GX液相色譜-四極桿/靜電場軌道阱高分辨質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(UHPLC-Quadrupole/OrbitrapMS)結(jié)合柱前衍生法建立了可同時測定28種游離氨基酸的分析方法，并對十字花科植物中的游離氨基酸進行檢測和分析。樣品用超純水提取后，經(jīng)6-氨基喹啉基-N-羥基琥珀酰亞胺基甲酸酯(AQC)衍生，采用WatersBEHC18柱作為色譜柱，以pH5.0乙酸銨緩沖溶液和80%乙腈水溶液作為流動相進行梯度洗脫。質(zhì)譜檢測器采用電噴霧離子源，在正離子模式下進行檢測。實驗結(jié)果表明，十字花科植物中含有25種以上游離氨基酸，其中包括人體必需的8種氨基酸。25種氨基酸在線性范圍內(nèi)相關(guān)性良好，平均加標回收率為80.5%~104.4%，相對標準偏差為0.6%~4.4%。不同氨基酸檢測靈敏度不同，定量下限為0.01~1.45μmol/L。該方法雜質(zhì)干擾小，分析速度快，靈敏度高，適用于植物樣品中游離氨基酸的同步檢測。中文關(guān)鍵詞:超GX液相色譜高分辨質(zhì)譜游離氨基酸十字花科植物[詳細]

  2018-09-10 11:11

  產(chǎn)品樣冊

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• MTS比色法細胞繁殖定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  MTS比色法細胞繁殖定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2016-03-10 00:00

  報價單

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• Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細胞等，本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機，方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標準品（reagentE）6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機：用于樣品制備比色皿或酶標板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標儀：用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進行下列操作。樣品準備選擇一：血漿樣品1．準備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進行蛋白定量測定選擇二：血清樣品1．準備好不含抗凝劑的儲存管2．抽取2毫升血液，置于儲存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進行蛋白定量測定選擇三：組織樣本準確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測。二、測定準備1.準備好上述待測樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長440nm三、樣本測定1．在96孔酶標板上做好相應(yīng)標記：背景對照，標準品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標準品孔(加入50微升標準品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動96孔酶標板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進酶標儀，置零8．取出酶標板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動酶標板10．即刻放進酶標儀檢測，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計算樣本活性=樣本OD值/標準OD值*標品濃度[詳細]

  2024-09-29 05:34

  產(chǎn)品樣冊

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• 細胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-12 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細胞彈性蛋白含量比色法（TPPS）定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細胞彈性蛋白含量比色法（TPPS）定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞彈性蛋白含量比色法（TPPS）定量檢測試劑是一種旨在通過酸性加熱萃取并轉(zhuǎn)化為可溶性彈性蛋白，與四苯基卟吩四磺酸染料結(jié)合，在堿性條件下，釋放棕紅色染料，酸性處理后，由分光光度儀比色分析，定量檢測細胞樣品中彈性蛋白含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的?？梢杂糜跈z測各種彈性蛋白，包括原彈性蛋白（tropoelastin）、致山黧豆中毒彈性蛋白（lathyrogenic）、α彈性蛋白、k-彈性蛋白等。適用于各種細胞（動物、人體等）或培養(yǎng)上清彈性蛋白水平檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測準確。技術(shù)背景彈性蛋白（elastin）是一種不溶性的非極性的堿性蛋白，具有高度抗拉能力（tensilestrength），存在于大動脈、氣管、支氣管、韌帶等結(jié)締組織細胞間。彈性蛋白由多肽二價交聯(lián)隨機扭絞（randomlykinked）組成，通過鎖鏈素（desmosine）和異鎖鏈素（isodesmosine）相連。動物細胞上的原彈性蛋白（tropoelastin）為單體，可溶性，分子量為62至72Kd。與微纖絲（microfibril）糖蛋白結(jié)合，形成彈性基質(zhì)（matrix）或彈性組織筏（raft），構(gòu)成細胞膜表面。通過酸性加熱萃取彈性蛋白，并轉(zhuǎn)化為可溶性衍生物，α彈性蛋白、k-彈性蛋白等，進而使用四苯基卟吩四磺酸（5,10,15,20-tetraphenylporphin-21H,23H-tetra-sulfonate；TPPS）染料與彈性蛋白發(fā)生溫克爾曼反應(yīng)（Winkelmanreaction）結(jié)合，然后在堿性條件下釋放出棕紅色染料，酸性處理后，呈現(xiàn)綠色，通過分光光度儀（445nm波長）測定，分析彈性蛋白的含量。產(chǎn)品內(nèi)容萃取液（ReagentA）毫升沉淀液（ReagentB）毫升清理液（ReagentC）毫升染色液（ReagentD）毫升濃縮液（ReagentE）毫升解離液（ReagentF）毫升強化液（ReagentG）毫升標準液（ReagentH）毫升稀釋液（ReagentI）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存標準液（ReagentH）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（ReagentD）避免光照；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標準液配制和樣品制備的容器15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器細胞刮脫棒：用于細胞脫離平式搖蕩儀：用于樣品操作干式恒溫儀：用于樣品孵育微型臺式離心機：用于樣品操作200微升1厘米光徑比色皿或96孔板：用于比色分析的容器分光光度儀或酶標儀：用于比色分析實驗步驟一、樣品預(yù)處理1）細胞上清處理移取300微升細胞培養(yǎng)上清到1.5毫升離心管加入xx微升萃取液（ReagentA）渦旋振蕩15秒放進100℃干式恒溫儀孵育60分鐘置于室溫下15分鐘冷卻放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心移取400微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升4℃預(yù)冷的沉淀液（ReagentB）在冰槽里孵育30分鐘，期間每隔10分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，確保無液體殘留；沉淀顆粒透明且肉眼難以看見置于冰槽里備用2）細胞處理準備好25cm2細胞培養(yǎng)瓶或60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞（1至5X106細胞）小心抽去培養(yǎng)液小心加入xx毫升清理液（ReagentC），覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞（注意：可以使用胰酶消化）加入xx毫升清理液（ReagentC），混勻細胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細胞從這一步驟開始）放進臺式離心機離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液，但保留300微升，混勻細胞顆粒群轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管加入xx微升萃取液（ReagentA）渦旋振蕩15秒放進100℃干式恒溫儀孵育60分鐘置于室溫下15分鐘冷卻放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心移取400微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：上清液可能會呈現(xiàn)黃色）加入xx微升4℃預(yù)冷的沉淀液（ReagentB）在冰槽里孵育30分鐘，期間每隔10分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保無液體殘留；沉淀顆粒透明且肉眼難以看見）置于冰槽里備用二、標準樣品配制準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至4號管分別加入xx微升稀釋液（ReagentI）到1至4號管移取xx微升標準液（ReagentH）到1號管，混勻小心移取xx微升1號管稀釋的標準液（ReagentH）到2號管，混勻小心移取xx微升2號管稀釋的標準液（ReagentH）到3號管，混勻小心抽去xx微升3號管稀釋的標準液（ReagentH）將1至4號管放進冰槽里備用；標準管濃度見下表管號稀釋液（ReagentI）標準液（ReagentH）標準彈性蛋白含量1xx微升xx微升xx微克2xx微升xx微升1號管xx微克3xx微升xx微升2號管xx微克4xx微升背景讀數(shù)0分別加入xx微升4℃預(yù)冷的沉淀液（ReagentB）到上述標準管里在冰槽里孵育30分鐘，期間每隔10分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保無液體殘留；沉淀顆粒透明且肉眼難以看見）置于冰槽里備用標準曲線測定分別加入xx微升染色液（ReagentD）到上述配制的標準液（ReagentH）里（注意：用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解）分別加入xx微升濃縮液（ReagentE）渦旋振蕩混勻室溫下，孵育60分鐘，期間每隔15分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保沒有液體殘留）加入xx微升解離液（ReagentF）用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解，并輔以渦旋震蕩（注意：確保充分溶解）加入xx微升強化液（ReagentG），混勻（注意：呈現(xiàn)綠色）轉(zhuǎn)移到新的200微升1厘米光徑的比色皿或96孔板即刻放進分光光度儀或酶標儀檢測（波長445nm）：獲得標準樣品吸光讀數(shù)重復(fù)實驗步驟1至11四次構(gòu)建標準曲線：縱座標（Y軸）為吸光讀數(shù)；橫座標（X軸）為標準彈性蛋白含量（微克）（注意：標準樣品吸光讀數(shù)背景讀數(shù)）樣品測定加入xx微升染色液（ReagentD）到上述配制的待測樣品管里（注意：用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解）分別加入xx微升濃縮液（ReagentE）渦旋振蕩混勻室溫下，孵育60分鐘，期間每隔15分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保沒有液體殘留）加入xx微升解離液（ReagentF）用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解，并輔以渦旋震蕩（注意：確保充分溶解）加入xx微升強化液（ReagentG），混勻（注意：呈現(xiàn)綠色）轉(zhuǎn)移到新的200微升1厘米光徑的比色皿或96孔板即刻放進分光光度儀或酶標儀檢測（波長445nm）：獲得樣品吸光讀數(shù)根據(jù)上述標準曲線獲得樣品對應(yīng)彈性蛋白含量（微克）（注意：待測樣品吸光讀數(shù)背景讀數(shù)）濃度計算注意事項本產(chǎn)品為25次操作，包括標準樣品本產(chǎn)品檢測范圍為5至100微克彈性蛋白操作時，須戴手套系統(tǒng)操作時，標準樣品測定只需1次彈性蛋白沉淀顆粒微小透明，肉眼難以看見操作需要非常細致，包括避免液體殘留、顆粒溶解等，否則會產(chǎn)生誤差試劑具有腐蝕性，嚴格注意操作安全孵育時，避免光照如果樣品彈性蛋白含量過低，可以濃縮樣品或增加樣品量樣品濃度可以表述為：微克彈性蛋白/細胞量；微克彈性蛋白/細胞總蛋白等通常1X105細胞含有40微克彈性蛋白本公司提供系列彈性蛋白檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]

  2018-11-19 10:00

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• 細菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒說明書

  細菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化，即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種細菌細胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶（protease）又稱為肽酶（peptidase）或蛋白質(zhì)酶（proteinase），是一類蛋白水解的酶，屬于水解酶（hydrolase）家屬中一員，存在于所有生物體內(nèi)。通過肽鍵的水解，進行蛋白質(zhì)的分解代謝，參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補體系統(tǒng)、凋亡、細胞生長和分化等一系列生理活動。蛋白酶基本分成6類，包括絲氨酸（serine）、蘇氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金屬（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等；還可以分成內(nèi)切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。細菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān)；作為外毒素（exotoxin），也是細菌致病的毒力（virulence）因子；同時細菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時據(jù)此用以識別革藍氏陰性細菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等。基于底物偶氮酪蛋白（azocasein或sulfanilamideazocasein），在細菌蛋白酶的催化水解下，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物，通過其吸收峰值的變化（440nm波長），來定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容裂解液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升終止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升陰性液（ReagentE）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺式離心機：用于樣品制備恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實驗步驟樣品準備準備好500微升待測細菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107細胞/毫升）轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）即刻放進－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測定準備準備好待測樣品（例如細菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長440nm，并置零實驗開始前，將反應(yīng)液（ReagentB）置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液（ReagentE）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進分光光度儀檢測，此為背景空對照樣品活性測定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入100微升待測樣品（蛋白總量100微克）（注意：樣品需澄清）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：沉淀物為橘紅色）加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進分光光度儀檢測，此為樣品讀數(shù)計算樣品活性注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時，須戴手套終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全系統(tǒng)檢測時，背景測定只需一次樣品須澄清，至關(guān)重要比色測定后，比色皿須清洗徹底建議待測樣本的蛋白濃度為100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義：在37℃下，pH7.5的情況下，每單位酶在單位時間內(nèi)（每分鐘）產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細菌生理生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]

  2018-11-19 10:00

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• 組織氧化應(yīng)激活性氧羥自由基比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  組織氧化應(yīng)激活性氧羥自由基比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2015-09-16 00:00

  專利

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• 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-28 00:00

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• 細胞糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細胞糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2015-04-14 00:00

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• 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書...

  組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑，通過檢測反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）還原后峰值的，即采用比色法來測定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品（動物、人體等）乙醛脫氫酶2的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶（aldehydedehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又稱為乙醛NAD氧化還原酶（aldehydeNAD-oxidoreductase）是一類NAD（P）依賴性酶，催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenicamine）、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個氫原子脫掉，使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸，生成的乙酸進入脂肪酸氧化途徑，Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶：ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于線粒體中，ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少，使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳，而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi)，使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?；趤碜杂谝掖即x產(chǎn)生的乙醛（acetaldehyde），在7-羥基-3-（4-羥苯基）-異黃酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在與否的情況下，由乙醛脫氫酶2的催化作用，轉(zhuǎn)化為乙酸（aceticacid）產(chǎn)物后，通過測定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）的變化（340nm波長），來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升反應(yīng)液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升陰性液（ReagentF）毫升專性液（ReagentG）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentD）、底物液（ReagentE）和專性液（ReagentG）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反應(yīng)液（ReagentD）和底物液（ReagentE）避免光照；有效保證6月[詳細]

  2018-11-08 10:00

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• 組織基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途組織基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細胞并不儲備MMPs，當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）?；|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動脈粥樣硬化等疾病有關(guān)。基于含硫多肽（thiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進而與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長），來定量測定組織基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性。基質(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細]

  2018-11-08 10:00

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• 細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測定細胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品（動物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細胞并不儲備MMPs，當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)?；|(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）?；|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動脈粥樣硬化等疾病有關(guān)。基于含硫多肽（thiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長），來定量測定細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性。基質(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細]

  2018-11-08 10:00

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• 細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細菌異檸檬酸脫氫酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）還原后峰值的變化，即采用比色法來測定細菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌細胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循環(huán)（citricacidcycle）或克雷布斯循環(huán)（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物體內(nèi)。細菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶：同源雙體，40至45Kd分子量；單體，80至100Kd分子量。在細菌體內(nèi)，氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子（Mn）的推動，脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳（氧化性脫羧基作用），轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同時生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中，以及有限的葡萄糖條件下，異檸檬酸脫氫酶則失活，從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之間碳的流動。基于異檸檬酸脫氫酶的NADP依賴性，和作用后所產(chǎn)生的NADPH，通過分光光度儀的峰值變化（340nm波長），來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測定其峰值的變化，以此進行測算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測。廣泛應(yīng)用于細胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景細胞張力蛋白同源在10號染色體缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又稱為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一個腫瘤YZ基因，位于染色體10q23.3，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物515kb，蛋白產(chǎn)物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白（tenasin）、輔助蛋白（auxilin）同源的區(qū)域，是一種雙重特異性磷酸酶，能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有調(diào)節(jié)細胞周期、防止細胞過度生長和分開裂解、參與細胞凋亡、粘附、遷移、浸潤，控制細胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，調(diào)控Akt/PKB信號通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，以及多發(fā)性錯構(gòu)瘤綜合征（Cowdensyndrome）等?；诘孜锪字＜〈?3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解產(chǎn)生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同時釋放出游離磷酸根，進而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)產(chǎn)生其峰值的變化（660nm波長），以此測算PTEN的活性。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升緩沖液（ReagentC）1毫升陰性液（ReagentD）1毫升反應(yīng)液（ReagentE）200微升終止液（ReagentF）1毫升顯色液（ReagentG）4毫升標準液（ReagentH）500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentE）和顯色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸；顯色液（ReagentG）避免光照，有效保證6月用戶自備15毫升離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品處理和保存的容器細胞刮脫棒：用于貼壁細胞脫離（微型）臺式離心機：用于樣品收集培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進冰槽里融化。然后進行下列操作。樣品準備準備好25cm2細胞培養(yǎng)瓶或60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞（5X106細胞）小心加入3毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞加入3毫升清理液（ReagentA），混勻細胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細胞從這一步驟開始）放進4℃臺式離心機離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取2微升進行蛋白定量測定（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）即刻放進－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測定準備準備好待測樣品（例如細胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：樣品須澄清）設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長為660nm，并置零準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至5號管按下表分別加入陰性液（ReagentD）和標準液（ReagentH）到每個離心管，混勻?qū)?至5號管放進冰槽里備用，避免光照；標準管濃度見下表管號陰性液（ReagentD）標準液（ReagentH）測定體系標準磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標準曲線測定移取20微升陰性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的標準液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進分光光度儀檢測：獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實驗步驟1至7四次構(gòu)建標準曲線：縱座標（Y軸）為吸光單位（A）；橫座標（X軸）為標準磷濃度（微摩爾/升）樣品背景測定移取20微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測樣品（總量100微克細胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進分光光度儀檢測：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標準曲線獲得樣品背景對應(yīng)磷濃度樣品活性測定移取10微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測樣品（總量100微克細胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應(yīng)液（ReagentE）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進分光光度儀檢測：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標準曲線獲得樣品活性對應(yīng)磷濃度計算樣品活性{[根據(jù)標準曲線獲得樣品活性對應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）根據(jù)標準曲線獲得樣品背景對應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）]X5（體系倍數(shù)）X樣品稀釋倍數(shù)}÷10（反應(yīng)時間；分鐘）＝納摩爾磷/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項本產(chǎn)品為25次操作，包括5次標準測定操作時，避免污染母液操作時，須戴手套終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測定后，比色皿須清洗徹底如果用戶沒有660nm波長，可以使用600至660nm的任一波長替代顯示綠色表明具有較強酶活性空白對照讀數(shù)應(yīng)小于0.2建議待測樣本蛋白濃度為100微克/5微升；如果樣本酶活性過低或過高，則可以增加或降低樣本量；（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性單位濃度定義：在37℃溫度下，pH8.0的情況下，每單位酶在單位時間內(nèi)（每分鐘）釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測準確[詳細]

  2018-11-19 10:00

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• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒說明書

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒說明書主要用途ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細胞等，本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機，方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標準品（reagentE）6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機：用于樣品制備比色皿或酶標板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標儀：用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進行下列操作。樣品準備選擇一：血漿樣品1．準備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進行蛋白定量測定選擇二：血清樣品1．準備好不含抗凝劑的儲存管2．抽取2毫升血液，置于儲存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進行蛋白定量測定選擇三：組織樣本準確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測。二、測定準備1.準備好上述待測樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長440nm三、樣本測定1．在96孔酶標板上做好相應(yīng)標記：背景對照，標準品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標準品孔(加入50微升標準品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動96孔酶標板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進酶標儀，置零8．取出酶標板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動酶標板10．即刻放進酶標儀檢測，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計算樣本活性=樣本OD值/標準OD值*標品濃度[詳細]

  2024-09-29 11:52

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