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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-05-28 00:00 378閱讀次數(shù)
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
期刊論文
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組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-23 00:00
選購(gòu)指南
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組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)...
- 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱(chēng)為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類(lèi)NAD(P)依賴(lài)性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類(lèi)底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類(lèi)、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過(guò)程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個(gè)氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進(jìn)入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線(xiàn)粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?;趤?lái)自于乙醇代謝產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升陰性液(ReagentF)毫升專(zhuān)性液(ReagentG)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存緩沖液(ReagentC)、反應(yīng)液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和專(zhuān)性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途組織基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下,受到MMP2的水解,釋放出巰基,進(jìn)而使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè),以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱(chēng),因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)成分,同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissueresorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類(lèi):(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱(chēng)明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs,當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成,合成的MMPs以無(wú)活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細(xì)胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)?;|(zhì)金屬蛋白酶-2,又稱(chēng)明膠酶A(gelatinase-A)或IV型膠原酶(typeIVcollagenase),其前體分子量為72kDa,激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白(collagens)、纖維連接蛋白(fibronectin)、彈性纖維蛋白(elastin)、層粘連蛋白-5(laminin-5)、前體腫瘤壞死因子-α(pro-TNF-α)和神經(jīng)(蛋白)聚糖(neurocan)?;|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)。基于含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下,受到MMP2的水解,釋放出巰基(sulfhydrylgroup),進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化(412nm波長(zhǎng)),來(lái)定量測(cè)定組織基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?;|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
期刊論文
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組織乙酰輔酶A羧化酶活性光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后,進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測(cè)定產(chǎn)生ADP過(guò)程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測(cè)定其氧化后峰值的變化,以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或完全純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測(cè),以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。技術(shù)背景乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又稱(chēng)為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依賴(lài)性含生物素酶,參與脂肪酸生物合成。哺乳動(dòng)物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225-250Kd,含有許多磷酸化位點(diǎn),以及1個(gè)生物素輔基位點(diǎn)、2個(gè)催化位點(diǎn)和1個(gè)異構(gòu)(allosteric)位點(diǎn)。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基(prostheticgroup)的羧基化反應(yīng),然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上,產(chǎn)生丙二酰輔酶A(malonylCoA),成為長(zhǎng)鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)調(diào)節(jié)該酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ該酶的活性?;诘孜镆阴]o酶A(acetylCoA)和碳酸氫鹽,在A(yíng)TP的存在下,受到乙酰輔酶A羧化酶的催化,獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP,進(jìn)而通過(guò)丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的變化(340nm),來(lái)定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)20毫升酶促液(ReagentD)2毫升反應(yīng)液(ReagentE)2毫升底物液(ReagentF)2毫升陰性液(ReagentG)500微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器DOUNCE勻漿器:用于裂解組織(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品預(yù)處理1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析操作的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于樣品光度分析[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物組織,尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè),以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱(chēng)為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞(melanocyte)或色素細(xì)胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過(guò)催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線(xiàn)可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時(shí),會(huì)引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過(guò)其吸光值的變化(475nm波長(zhǎng)),來(lái)定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-04-08 00:00
期刊論文
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血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
安裝說(shuō)明
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細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) (中文版)
- 細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) (中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-05 00:00
期刊論文
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純化線(xiàn)粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 純化線(xiàn)粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途純化線(xiàn)粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線(xiàn)粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線(xiàn)粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線(xiàn)粒體內(nèi)膜,參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長(zhǎng))的變化,來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升緩沖液(ReagentC)XX毫升反應(yīng)液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升陰性液(ReagentF)XX微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentD)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸;底物液(ReagentE),避免光照;有效保證3月用戶(hù)自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器4℃(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品處理DOUNCE勻漿器:用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)物孵育比色皿:用于比色測(cè)定的容器分光光度儀:用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定200毫克組織重量(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管(選擇步驟)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(選擇步驟)抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融)放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)渦旋震蕩5秒,充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約20至40下)(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)8)將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1)放進(jìn)-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品,置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長(zhǎng)600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentC)在室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取XX微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2024-09-20 13:41
應(yīng)用文章
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組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-21 00:00
選購(gòu)指南
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-30 00:00
安裝說(shuō)明
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乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-22 00:00
安裝說(shuō)明
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線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
課件
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線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類(lèi)似物二氯酚靛酚,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線(xiàn)粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)??捎糜谒ダ稀⒛芰看x、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱(chēng)為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-CoenzymeQReductase;SuccinateDehydrogenase),是線(xiàn)粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個(gè)亞單位,包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide;FAD)和三個(gè)鐵硫ZX(Fe-Sclusters),以及細(xì)胞色素b亞單位,其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線(xiàn)粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征?;阽晁岬孜铮ㄟ^(guò)琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時(shí)氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm波長(zhǎng)),由此定量測(cè)定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無(wú)色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD),避免光照,有效保證6月用戶(hù)自備比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;緩沖液(ReagentA)室溫預(yù)熱;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如純化線(xiàn)粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長(zhǎng)為600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測(cè),此為背景空對(duì)照:600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測(cè)定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測(cè)樣品(注意:10微克總線(xiàn)粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測(cè),此為樣品活性讀數(shù):600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X21.8(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?;痯53多肽底物,經(jīng)過(guò)SIRT1脫乙?;?,被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解,釋放黃色對(duì)硝基苯胺,即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測(cè),以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?;福╤istonedeacetylase;HDAC)家屬分成三類(lèi)共20多個(gè)蛋白:種類(lèi)I(classI)與酵母Rpd3蛋白同源,包括HDAC1、2、3、8,存在于細(xì)胞核中;種類(lèi)II(classII)與酵母Hda1蛋白同源,包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR,存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里;上述兩大種類(lèi)的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅,且曲古菌素A(trichostatinA;TSA)敏感。種類(lèi)III(classIII)為NAD+輔助因子必需,又稱(chēng)為sirtuins,與酵母Sir2(SilentInformationRegulator2)同源,包括SIRT1至7等,為曲古菌素A(trichostatinA;TSA)不敏感型賴(lài)氨酸脫乙酰基酶(lysyl-deacetylase)。催化賴(lài)氨酸脫乙酰基反應(yīng),以及由NAD+和乙酰(acetyl)基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺(nicotinamide)和O-乙酰ADP核糖(O-acetyl-ADP-ribose)。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi),與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53(379至382氨基酸位點(diǎn))多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys(Ac)具有抗氨基肽酶切離的功能,首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺(p-Nitroaniline;p-NA)來(lái)標(biāo)記乙?;痯53多肽底物,其次進(jìn)行脫乙?;?,Z后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解,釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺(波長(zhǎng)405nm),由此來(lái)定量測(cè)定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。用戶(hù)自備磷酸鹽緩沖溶液(PBS):用于清洗組織樣品15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器1.5毫升離心管:用于樣品操作和保存的容器(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于組織細(xì)胞預(yù)處理培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)物孵育96孔板或100微升1厘米光徑比色皿:用于反應(yīng)和比色的容器酶標(biāo)儀或分光光度儀:用于比色分析注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對(duì)照2.操作時(shí),須戴手套3.系統(tǒng)操作過(guò)程中,背景測(cè)定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要5.樣品處理時(shí),避免使用蛋白酶YZ劑、PMSF、烷基胺(alkylamine)等6.孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行比色測(cè)定7.濾波器可以使用波長(zhǎng)400nm替代405nm8.測(cè)定值由低到高變化;酶動(dòng)法測(cè)定可以持續(xù)60分鐘9.測(cè)定值吸光讀數(shù)越高,表明酶活性越高10.比色測(cè)定后,比色皿須清洗徹底11.待測(cè)樣本為核蛋白樣品,其蛋白濃度為50微克/20微升;待測(cè)樣本為組織裂解懸液,其蛋白濃度為200微克/20微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)12.如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低,可以調(diào)整樣品濃度13.沉默調(diào)節(jié)蛋白1單位活性定義為:在30℃,pH8.0條件下,每分鐘內(nèi)能夠釋放1微摩爾對(duì)硝基苯酚所需的酶量作為一個(gè)活性單位14.本公司提供系列組蛋白脫乙?;笝z測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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