本文由 上海科學(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-11-19 10:00 798閱讀次數(shù)

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• 細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶（protease）又稱為肽酶（peptidase）或蛋白質(zhì)酶（proteinase），是一類蛋白水解的酶，屬于水解酶（hydrolase）家屬中一員，存在于所有生物體內(nèi)。通過(guò)肽鍵的水解，進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解代謝，參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補(bǔ)體系統(tǒng)、凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)和分化等一系列生理活動(dòng)。蛋白酶基本分成6類，包括絲氨酸（serine）、蘇氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金屬（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等；還可以分成內(nèi)切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。細(xì)菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān)；作為外毒素（exotoxin），也是細(xì)菌致病的毒力（virulence）因子；同時(shí)細(xì)菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等?；诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein），在細(xì)菌蛋白酶的催化水解下，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物，通過(guò)其吸收峰值的變化（440nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容裂解液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升終止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升陰性液（ReagentE）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測(cè)細(xì)菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107細(xì)胞/毫升）轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm，并置零實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將反應(yīng)液（ReagentB）置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液（ReagentE）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照樣品活性測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入100微升待測(cè)樣品（蛋白總量100微克）（注意：樣品需澄清）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：沉淀物為橘紅色）加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品讀數(shù)計(jì)算樣品活性注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，背景測(cè)定只需一次樣品須澄清，至關(guān)重要比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底建議待測(cè)樣本的蛋白濃度為100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義：在37℃下，pH7.5的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細(xì)菌生理生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

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• 細(xì)菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解，釋放出巰基基團(tuán)，使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液樣品脂肪酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性酶蛋白分子，催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵（esterbond）的水解。許多細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)胞外酶（exoenzyme），稱為水解酶（hydrolase），在水分子的參與下，催化底物的水解，成為細(xì)菌生理特征之一。其中脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG）、脂肪、油等，產(chǎn)生1個(gè)分子甘油（glycerol）和3個(gè)分子脂肪酸分子（fattyacid），由此用于合成細(xì)菌脂質(zhì)和其它細(xì)胞成分，以及氧化產(chǎn)生能量。食品工業(yè)中，常用于食品發(fā)酵（rancidity），例如人造奶油（margarine）等。甚至用于廚房清潔劑和替代能源的生物催化作用。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等。細(xì)菌脂肪酶在水分子的參與下，催化三丁酸二巰基丙醇（dimercaptopropanoltributyrate；DMPTB或BALB）的水解，產(chǎn)生二巰基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并釋放出巰基基團(tuán)（－SH），與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過(guò)其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）還原后峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循環(huán)（citricacidcycle）或克雷布斯循環(huán)（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物體內(nèi)。細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶：同源雙體，40至45Kd分子量；單體，80至100Kd分子量。在細(xì)菌體內(nèi)，氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子（Mn）的推動(dòng)，脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳（氧化性脫羧基作用），轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同時(shí)生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中，以及有限的葡萄糖條件下，異檸檬酸脫氫酶則失活，從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之間碳的流動(dòng)。基于異檸檬酸脫氫酶的NADP依賴性，和作用后所產(chǎn)生的NADPH，通過(guò)分光光度儀的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、發(fā)酵分析等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細(xì)胞呼吸鏈。細(xì)菌琥珀酸脫氫酶，又稱為SdhCDAB，為膜結(jié)合性蛋白，分為周邊（peripheral）和跨膜（transmembrane）部分，其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成：SdhA亞體含有黃素蛋白（flavoprotein），是琥珀酸的活性部位；SdhB含有鐵硫蛋白（iron-sulfurprotein），進(jìn)行電子傳遞；跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成：SdhC含有亞鐵血紅素-B（Heme-B），SdhD含有泛醌（ubiquinone）結(jié)合部位（Q部位）。其作用在于參與三羧酸循環(huán)（TCAcycle）和呼吸鏈活動(dòng)。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子?；阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長(zhǎng)）的變化，來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  主要用途細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）還原后峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循環(huán)（citricacidcycle）或克雷布斯循環(huán)（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物體內(nèi)。細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶：同源雙體，40至45Kd分子量；單體，80至100Kd分子量。在細(xì)菌體內(nèi)，氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子（Mn）的推動(dòng)，脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳（氧化性脫羧基作用），轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同時(shí)生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中，以及有限的葡萄糖條件下，異檸檬酸脫氫酶則失活，從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之間碳的流動(dòng)?；诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴性，和作用后所產(chǎn)生的NADPH，通過(guò)分光光度儀的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiringAspartateprotease；CASPASE），或稱半胱天冬蛋白酶，是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3（CellDeathGeneNumber3；秀麗隱桿線蟲(chóng)細(xì)胞死亡基因數(shù)3）分支的一種，又稱CPP32（CysteineProteinaseProtein32kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度傳說(shuō)中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd，被切離為17kd和11kd而激活細(xì)胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶YZ劑（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測(cè)用來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織的凋亡狀況。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對(duì)硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放有色對(duì)硝基苯胺，在分光光度儀（405nm波長(zhǎng)）下，測(cè)定吸光峰值的變化，來(lái)定量測(cè)定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)菌丙酮酸激酶（PK）總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  細(xì)菌丙酮酸激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途細(xì)菌丙酮酸激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用光度法來(lái)測(cè)定細(xì)菌裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解萃取懸液樣品丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK；EC2.7.1.40），全稱為ATP-丙酮酸磷酸轉(zhuǎn)移酶（ATP:pyruvatephosphotransferase），是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶，催化細(xì)胞糖酵解的Z后反應(yīng)：將磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸（pyruvate），同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶在糖酵解中活性，而在葡糖生成過(guò)程中活性降低。細(xì)菌丙酮酸激酶為同源四聚體（homotetramer），240Kd分子量，分成兩種類型：一種是誘導(dǎo)型（inducible），由果糖-2,6-二磷酸（Fructose-2,6-bisphosphate；F2,6BP）激活；一種是結(jié)構(gòu)型（constitutive），由AMP激活?；诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后，通過(guò)乳酸脫氫酶系統(tǒng)，測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升反應(yīng)液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升陰性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、反應(yīng)液（ReagentD）和底物液（ReagentE）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器超聲儀：用于細(xì)菌裂解（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作比色皿或96孔板：用于光度分析的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于光度分析[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-04-08 00:00

  期刊論文

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• 細(xì)菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) （中文版）

  細(xì)菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) （中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-05 00:00

  期刊論文

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• Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無(wú)損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 05:34

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無(wú)損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 11:52

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸與受到α-淀粉酶中性環(huán)境下水解產(chǎn)生的還原基團(tuán)分子反應(yīng)，生成強(qiáng)烈吸光的3-氨基-5-硝基水楊酸，即采用比色法測(cè)定其還原后峰值的升高變化，以此測(cè)定樣品中α-淀粉酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等裂解萃取液樣品α-淀粉酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景淀粉酶（AMYLASE）屬于糖苷水解酶類（glycosidehydrolase）。淀粉酶通過(guò)水解方式，分解淀粉的α－1，4鏈接，釋放出葡萄糖、麥芽糖（maltose）、麥芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等簡(jiǎn)單糖分子。淀粉酶分成三類：α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶（EC3.2.1.1），又稱為α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶（α-1,4-glucan4-glucanohydrolase）或糖原酶（glycogenase），是鈣離子依賴性鈣金屬蛋白酶（calciummetalloenzyme），分解淀粉為葡萄糖、麥芽糖（maltose）、麥芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等，為主要的消化酶，尤其在人體中，例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶（EC3.2.1.2），又稱為α-1,4-葡聚糖麥芽糖水解酶（1,4-α-D-glucanmaltohydrolase）或糖基淀粉酶（saccharogenamylase），分解淀粉為葡萄糖等。植物、真菌、細(xì)菌等均能產(chǎn)生，而人體組織不含有。γ-淀粉酶（EC3.2.1.2），又稱為α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶（Glucan1,4-α-glucosidase）或溶酶體α-葡萄糖苷酶（lysosomalα-glucosidase），在酸性環(huán)境下分解淀粉為葡萄糖。淀粉是一種復(fù)雜分子，由多聚糖直鏈淀粉（amylose）和支鏈淀粉（amylopectin）構(gòu)成。植物和細(xì)菌產(chǎn)生大多數(shù)淀粉。在淀粉酶的催化作用下，分解產(chǎn)生簡(jiǎn)單糖分子，作為能源儲(chǔ)存，植物用于光合作用。植物和細(xì)菌性淀粉酶常用于工業(yè)，包括烘培食物和乳制品的制造，以及酒精和紙材的生產(chǎn)?；诘矸郏谥行原h(huán)境下，通過(guò)α-淀粉酶的水解，釋放出麥芽糖等含有游離的還原性基團(tuán)（例如酮基等），進(jìn)一步使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸（3,5-Dinitrosalicylicacid；DNS）與之反應(yīng)，產(chǎn)生紅棕色的3-氨基-5-硝基水楊酸（3-amino-5-nitrosalicylicacid），在分光光度儀（540nm波長(zhǎng)）下測(cè)定，以定量分析α-淀粉酶的活性。其反應(yīng)方式為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-28 00:00

  期刊論文

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• 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)...

  組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑，通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）還原后峰值的，即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品（動(dòng)物、人體等）乙醛脫氫酶2的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶（aldehydedehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又稱為乙醛NAD氧化還原酶（aldehydeNAD-oxidoreductase）是一類NAD（P）依賴性酶，催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenicamine）、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過(guò)程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個(gè)氫原子脫掉，使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸，生成的乙酸進(jìn)入脂肪酸氧化途徑，Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶：ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于線粒體中，ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少，使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳，而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi)，使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?；趤?lái)自于乙醇代謝產(chǎn)生的乙醛（acetaldehyde），在7-羥基-3-（4-羥苯基）-異黃酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在與否的情況下，由乙醛脫氫酶2的催化作用，轉(zhuǎn)化為乙酸（aceticacid）產(chǎn)物后，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）的變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升反應(yīng)液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升陰性液（ReagentF）毫升專性液（ReagentG）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentD）、底物液（ReagentE）和專性液（ReagentG）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反應(yīng)液（ReagentD）和底物液（ReagentE）避免光照；有效保證6月[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  主要用途組織基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進(jìn)而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs，當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成，合成的MMPs以無(wú)活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細(xì)胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）?；|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?；诤蚨嚯模╰hiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進(jìn)而與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過(guò)其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來(lái)定量測(cè)定組織基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?；|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  主要用途細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進(jìn)而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs，當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成，合成的MMPs以無(wú)活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細(xì)胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）?；|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?；诤蚨嚯模╰hiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過(guò)其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?；|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景細(xì)胞張力蛋白同源在10號(hào)染色體缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又稱為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一個(gè)腫瘤YZ基因，位于染色體10q23.3，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物515kb，蛋白產(chǎn)物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個(gè)氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白（tenasin）、輔助蛋白（auxilin）同源的區(qū)域，是一種雙重特異性磷酸酶，能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、防止細(xì)胞過(guò)度生長(zhǎng)和分開(kāi)裂解、參與細(xì)胞凋亡、粘附、遷移、浸潤(rùn)，控制細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，調(diào)控Akt/PKB信號(hào)通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，以及多發(fā)性錯(cuò)構(gòu)瘤綜合征（Cowdensyndrome）等?；诘孜锪字＜〈?3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解產(chǎn)生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同時(shí)釋放出游離磷酸根，進(jìn)而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)產(chǎn)生其峰值的變化（660nm波長(zhǎng)），以此測(cè)算PTEN的活性。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升緩沖液（ReagentC）1毫升陰性液（ReagentD）1毫升反應(yīng)液（ReagentE）200微升終止液（ReagentF）1毫升顯色液（ReagentG）4毫升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）500微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentE）和顯色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸；顯色液（ReagentG）避免光照，有效保證6月用戶自備15毫升離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品處理和保存的容器細(xì)胞刮脫棒：用于貼壁細(xì)胞脫離（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品收集培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進(jìn)冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞（5X106細(xì)胞）小心加入3毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），覆蓋生長(zhǎng)表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞加入3毫升清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細(xì)胞從這一步驟開(kāi)始）放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取2微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：樣品須澄清）設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為660nm，并置零準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管按下表分別加入陰性液（ReagentD）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）到每個(gè)離心管，混勻?qū)?至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表管號(hào)陰性液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）測(cè)定體系標(biāo)準(zhǔn)磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定移取20微升陰性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光單位（A）；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度（微摩爾/升）樣品背景測(cè)定移取20微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度樣品活性測(cè)定移取10微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應(yīng)液（ReagentE）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度計(jì)算樣品活性{[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）]X5（體系倍數(shù)）X樣品稀釋倍數(shù)}÷10（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）＝納摩爾磷/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為25次操作，包括5次標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定操作時(shí)，避免污染母液操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底如果用戶沒(méi)有660nm波長(zhǎng)，可以使用600至660nm的任一波長(zhǎng)替代顯示綠色表明具有較強(qiáng)酶活性空白對(duì)照讀數(shù)應(yīng)小于0.2建議待測(cè)樣本蛋白濃度為100微克/5微升；如果樣本酶活性過(guò)低或過(guò)高，則可以增加或降低樣本量；（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性單位濃度定義：在37℃溫度下，pH8.0的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)準(zhǔn)確[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途組織酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物組織，尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過(guò)催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，產(chǎn)生多巴色素，通過(guò)其吸光值的變化（475nm波長(zhǎng)），來(lái)定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物細(xì)胞，尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過(guò)催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?；诘孜锢野彼?，在酪氨酸酶的催化下，產(chǎn)生多巴色素，通過(guò)其吸光值的變化（475nm波長(zhǎng)），來(lái)定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取懸液樣品（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲(chóng)等）丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK）是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶，催化細(xì)胞糖酵解的Z后反應(yīng)：將磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸（pyruvate），同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶由4個(gè)相同的亞單位構(gòu)成，在肝組織、肌肉組織和紅細(xì)胞中有不同類型的異構(gòu)體。果糖-2，6-二磷酸（Fructose-2，6-bisphosphate；F2，6BP）是該酶的激活劑，而ATP、蛋氨酸（alanine）、乙酰輔酶A（Acetyl-CoA）是該酶的YZ劑。丙酮酸激酶的活性檢測(cè)用來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織，包括紅細(xì)胞的損害狀況?；诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后，通過(guò)乳酸脫氫酶系統(tǒng)，測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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