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2018-11-18 10:00 699閱讀次數(shù)

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• 植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途植物α-淀粉酶（α-AMYLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸與受到α-淀粉酶中性環(huán)境下水解產(chǎn)生的還原基團(tuán)分子反應(yīng)，生成強(qiáng)烈吸光的3-氨基-5-硝基水楊酸，即采用比色法測(cè)定其還原后峰值的升高變化，以此測(cè)定樣品中α-淀粉酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）等裂解萃取液樣品α-淀粉酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景淀粉酶（AMYLASE）屬于糖苷水解酶類（glycosidehydrolase）。淀粉酶通過水解方式，分解淀粉的α－1，4鏈接，釋放出葡萄糖、麥芽糖（maltose）、麥芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等簡(jiǎn)單糖分子。淀粉酶分成三類：α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶（EC3.2.1.1），又稱為α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶（α-1,4-glucan4-glucanohydrolase）或糖原酶（glycogenase），是鈣離子依賴性鈣金屬蛋白酶（calciummetalloenzyme），分解淀粉為葡萄糖、麥芽糖（maltose）、麥芽三糖（maltotriose）、糊精（dextrin）等，為主要的消化酶，尤其在人體中，例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶（EC3.2.1.2），又稱為α-1,4-葡聚糖麥芽糖水解酶（1,4-α-D-glucanmaltohydrolase）或糖基淀粉酶（saccharogenamylase），分解淀粉為葡萄糖等。植物、真菌、細(xì)菌等均能產(chǎn)生，而人體組織不含有。γ-淀粉酶（EC3.2.1.2），又稱為α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶（Glucan1,4-α-glucosidase）或溶酶體α-葡萄糖苷酶（lysosomalα-glucosidase），在酸性環(huán)境下分解淀粉為葡萄糖。淀粉是一種復(fù)雜分子，由多聚糖直鏈淀粉（amylose）和支鏈淀粉（amylopectin）構(gòu)成。植物和細(xì)菌產(chǎn)生大多數(shù)淀粉。在淀粉酶的催化作用下，分解產(chǎn)生簡(jiǎn)單糖分子，作為能源儲(chǔ)存，植物用于光合作用。植物和細(xì)菌性淀粉酶常用于工業(yè)，包括烘培食物和乳制品的制造，以及酒精和紙材的生產(chǎn)?；诘矸?，在中性環(huán)境下，通過α-淀粉酶的水解，釋放出麥芽糖等含有游離的還原性基團(tuán)（例如酮基等），進(jìn)一步使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸（3,5-Dinitrosalicylicacid；DNS）與之反應(yīng)，產(chǎn)生紅棕色的3-氨基-5-硝基水楊酸（3-amino-5-nitrosalicylicacid），在分光光度儀（540nm波長(zhǎng)）下測(cè)定，以定量分析α-淀粉酶的活性。其反應(yīng)方式為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 植物堿性焦磷酸酶活性比色法法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途植物堿性焦磷酸酶（AlkalinePyrophosphatase）活性比色法法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用無機(jī)焦磷酸，在堿性焦磷酸酶去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍(lán)顯色反應(yīng)后峰值的變化，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種植物組織，包括種子、球莖（bulb）、塊莖（tuber）、根（root）、種葉（coleoptile）和葉片裂解懸液樣品或純化以及粗提的酶蛋白的堿性焦磷酸酶活性及其YZ劑的檢測(cè)。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景焦磷酸酶（Pyrophosphatase；PPase；；EC3.6.1.1），又稱為無機(jī)焦磷酸酶（inorganicpyrophosphatase），屬于磷酸酶家族，包括磷酸單酯酶（phosphomonoesterase）、磷酸二酯酶（phosphodiesterase）等。通過釋放磷酸根，參與DNA合成、RNA合成、輔酶合成、鈣吸收、骨形成、氨基酸合成和脂肪酸代謝的激活等代謝活動(dòng)。焦磷酸酶分為堿性和酸性，前者作用于合成代謝，而后者作用于分解反應(yīng)。焦磷酸酶催化無機(jī)焦磷酸水解產(chǎn)生2個(gè)磷酸根離子的反應(yīng)，為能量釋放反應(yīng)（exergonicreaction）。在植物中，尤其碳4或碳3植物的葉片中，活性Z高。在固碳還原和光合作用起著重要作用成為碳4植物通路的指標(biāo)。基于底物無機(jī)焦磷酸，在堿性條件下，受到堿性焦磷酸酶的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍(lán)顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長(zhǎng)）產(chǎn)生峰值的變化，由此測(cè)定堿性焦磷酸酶的活性。[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 小鼠淀粉酶（Amylase）ELISA試劑盒

  小鼠淀粉酶（Amylase）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠Amylase單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Amylase與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗小鼠Amylase，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，Amylase濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Amylase濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1000mU/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：5稀釋（取20ul，加標(biāo)本稀釋液80ul,稀釋5倍）。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成2000mU/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000mU/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0mU/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Amylase含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的Amylase檢測(cè)濃度小于1.5mU/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠Amylase。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.6％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 細(xì)菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)菌脂肪酶（LIPASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解，釋放出巰基基團(tuán)，使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液樣品脂肪酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性酶蛋白分子，催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵（esterbond）的水解。許多細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)胞外酶（exoenzyme），稱為水解酶（hydrolase），在水分子的參與下，催化底物的水解，成為細(xì)菌生理特征之一。其中脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG）、脂肪、油等，產(chǎn)生1個(gè)分子甘油（glycerol）和3個(gè)分子脂肪酸分子（fattyacid），由此用于合成細(xì)菌脂質(zhì)和其它細(xì)胞成分，以及氧化產(chǎn)生能量。食品工業(yè)中，常用于食品發(fā)酵（rancidity），例如人造奶油（margarine）等。甚至用于廚房清潔劑和替代能源的生物催化作用。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等。細(xì)菌脂肪酶在水分子的參與下，催化三丁酸二巰基丙醇（dimercaptopropanoltributyrate；DMPTB或BALB）的水解，產(chǎn)生二巰基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并釋放出巰基基團(tuán)（－SH），與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 大鼠淀粉酶（Amylase）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com大鼠淀粉酶（Amylase）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Amylase單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Amylase與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠Amylase，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，Amylase濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Amylase濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：2000mU/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：2稀釋（取50ul，加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍）。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成2000mU/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000mU/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0mU/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Amylase含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的Amylase檢測(cè)濃度小于1.5mU/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠Amylase。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.6％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人β淀粉酶（β-amylase）ELISA試劑盒說明書

  人β淀粉酶（β-amylase）試劑盒（ELISA）使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人β淀粉酶（β-amylase）的含量。l有效期：6個(gè)月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人β淀粉酶（β-amylase）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人β淀粉酶（β-amylase）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本處理1.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出。7.建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個(gè)1個(gè)無備注：1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：200、100、50、25、12.5、0U/L2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn)，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí)，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測(cè)范圍：6.25U/L200U/L。2.靈敏度：Zdi檢測(cè)濃度小于1.0U/L。3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別，如：檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到**的檢測(cè)結(jié)果。問題解答若實(shí)驗(yàn)效果不好，請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時(shí)您也可以參考以下資料：?jiǎn)栴}可能原因解決方案標(biāo)準(zhǔn)曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器，極ng確加入試劑溫育時(shí)間不正確保證充足的溫育時(shí)間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度酶標(biāo)記物或底物失效通過混合酶標(biāo)記物和底物，顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)在說明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲(chǔ)存方式正確儲(chǔ)存樣本，使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測(cè)物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本，重復(fù)實(shí)驗(yàn)[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:01

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• 組織酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途組織酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物組織，尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化病（oculocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?；诘孜锢野彼幔诶野彼崦傅拇呋?，產(chǎn)生多巴色素，通過其吸光值的變化（475nm波長(zhǎng)），來定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物細(xì)胞，尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?；诘孜锢野彼幔诶野彼崦傅拇呋?，產(chǎn)生多巴色素，通過其吸光值的變化（475nm波長(zhǎng)），來定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）還原后峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循環(huán)（citricacidcycle）或克雷布斯循環(huán)（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物體內(nèi)。細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶：同源雙體，40至45Kd分子量；單體，80至100Kd分子量。在細(xì)菌體內(nèi)，氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子（Mn）的推動(dòng)，脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳（氧化性脫羧基作用），轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同時(shí)生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中，以及有限的葡萄糖條件下，異檸檬酸脫氫酶則失活，從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之間碳的流動(dòng)?；诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴性，和作用后所產(chǎn)生的NADPH，通過分光光度儀的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、發(fā)酵分析等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細(xì)胞呼吸鏈。細(xì)菌琥珀酸脫氫酶，又稱為SdhCDAB，為膜結(jié)合性蛋白，分為周邊（peripheral）和跨膜（transmembrane）部分，其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成：SdhA亞體含有黃素蛋白（flavoprotein），是琥珀酸的活性部位；SdhB含有鐵硫蛋白（iron-sulfurprotein），進(jìn)行電子傳遞；跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成：SdhC含有亞鐵血紅素-B（Heme-B），SdhD含有泛醌（ubiquinone）結(jié)合部位（Q部位）。其作用在于參與三羧酸循環(huán)（TCAcycle）和呼吸鏈活動(dòng)。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子。基于琥珀酸脫氫酶的反應(yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長(zhǎng)）的變化，來測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取懸液樣品（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等）丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK）是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶，催化細(xì)胞糖酵解的Z后反應(yīng)：將磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸（pyruvate），同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶由4個(gè)相同的亞單位構(gòu)成，在肝組織、肌肉組織和紅細(xì)胞中有不同類型的異構(gòu)體。果糖-2，6-二磷酸（Fructose-2，6-bisphosphate；F2，6BP）是該酶的激活劑，而ATP、蛋氨酸（alanine）、乙酰輔酶A（Acetyl-CoA）是該酶的YZ劑。丙酮酸激酶的活性檢測(cè)用來評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織，包括紅細(xì)胞的損害狀況?；诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后，通過乳酸脫氫酶系統(tǒng)，測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 體液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途體液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解，釋放出巰基基團(tuán)，使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物和人體各種體液包括尿液、腦脊液、唾液、精液等樣品脂肪酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性糖蛋白分子，催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵（esterbond）的水解。在人體中，其來源于產(chǎn)生。在消化系統(tǒng)中，脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG），產(chǎn)生1個(gè)分子甘油（glycerol）和3個(gè)分子游離脂肪酸分子（fattyacid）。脂肪酶異常與炎、管阻塞、癌、腎病、唾液腺炎癥、腸道阻塞等相關(guān)；異常降低則與中脂肪酶產(chǎn)生細(xì)胞的性損傷有關(guān)。脂肪酶的活性檢測(cè)是臨床診斷的指標(biāo)之一?；谥久冈谒肿拥膮⑴c下，催化三丁酸二巰基丙醇（dimercaptopropanoltributyrate；DMPTB或BALB）的水解，產(chǎn)生二巰基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并釋放出巰基基團(tuán)（－SH），進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說明書

  細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶（protease）又稱為肽酶（peptidase）或蛋白質(zhì)酶（proteinase），是一類蛋白水解的酶，屬于水解酶（hydrolase）家屬中一員，存在于所有生物體內(nèi)。通過肽鍵的水解，進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解代謝，參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補(bǔ)體系統(tǒng)、凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)和分化等一系列生理活動(dòng)。蛋白酶基本分成6類，包括絲氨酸（serine）、蘇氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金屬（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等；還可以分成內(nèi)切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。細(xì)菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān)；作為外毒素（exotoxin），也是細(xì)菌致病的毒力（virulence）因子；同時(shí)細(xì)菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等?；诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein），在細(xì)菌蛋白酶的催化水解下，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物，通過其吸收峰值的變化（440nm波長(zhǎng)），來定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容裂解液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升終止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升陰性液（ReagentE）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測(cè)細(xì)菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107細(xì)胞/毫升）轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm，并置零實(shí)驗(yàn)開始前，將反應(yīng)液（ReagentB）置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液（ReagentE）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照樣品活性測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入100微升待測(cè)樣品（蛋白總量100微克）（注意：樣品需澄清）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：沉淀物為橘紅色）加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品讀數(shù)計(jì)算樣品活性注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，背景測(cè)定只需一次樣品須澄清，至關(guān)重要比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底建議待測(cè)樣本的蛋白濃度為100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）如果待測(cè)樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義：在37℃下，pH7.5的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細(xì)菌生理生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 05:34

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)菌丙酮酸激酶（PK）總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  細(xì)菌丙酮酸激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途細(xì)菌丙酮酸激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用光度法來測(cè)定細(xì)菌裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解萃取懸液樣品丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK；EC2.7.1.40），全稱為ATP-丙酮酸磷酸轉(zhuǎn)移酶（ATP:pyruvatephosphotransferase），是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶，催化細(xì)胞糖酵解的Z后反應(yīng)：將磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸（pyruvate），同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶在糖酵解中活性，而在葡糖生成過程中活性降低。細(xì)菌丙酮酸激酶為同源四聚體（homotetramer），240Kd分子量，分成兩種類型：一種是誘導(dǎo)型（inducible），由果糖-2,6-二磷酸（Fructose-2,6-bisphosphate；F2,6BP）激活；一種是結(jié)構(gòu)型（constitutive），由AMP激活?；诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后，通過乳酸脫氫酶系統(tǒng)，測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升反應(yīng)液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升陰性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、反應(yīng)液（ReagentD）和底物液（ReagentE）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器超聲儀：用于細(xì)菌裂解（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作比色皿或96孔板：用于光度分析的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于光度分析[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?；痯53多肽底物，經(jīng)過SIRT1脫乙酰基后，被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來測(cè)定組織裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?；福╤istonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類共20多個(gè)蛋白：種類I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴氨酸脫乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化賴氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡。基于人工合成的乙?；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來標(biāo)記乙酰化p53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙酰化，Z后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長(zhǎng)405nm），由此來定量測(cè)定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。用戶自備磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：用于清洗組織樣品15毫升錐形離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品操作和保存的容器（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于組織細(xì)胞預(yù)處理培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育96孔板或100微升1厘米光徑比色皿：用于反應(yīng)和比色的容器酶標(biāo)儀或分光光度儀：用于比色分析注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為20次操作，包括背景對(duì)照2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過程中，背景測(cè)定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要5．樣品處理時(shí)，避免使用蛋白酶YZ劑、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行比色測(cè)定7．濾波器可以使用波長(zhǎng)400nm替代405nm8．測(cè)定值由低到高變化；酶動(dòng)法測(cè)定可以持續(xù)60分鐘9．測(cè)定值吸光讀數(shù)越高，表明酶活性越高10．比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底11．待測(cè)樣本為核蛋白樣品，其蛋白濃度為50微克/20微升；待測(cè)樣本為組織裂解懸液，其蛋白濃度為200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）12．如果待測(cè)樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度13．沉默調(diào)節(jié)蛋白1單位活性定義為：在30℃，pH8.0條件下，每分鐘內(nèi)能夠釋放1微摩爾對(duì)硝基苯酚所需的酶量作為一個(gè)活性單位14．本公司提供系列組蛋白脫乙?；笝z測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 乳酸脫氫酶（LDH）總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途乳酸脫氫酶（LDH）總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過乳酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)中反應(yīng)完成后還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用終點(diǎn)比色法來測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞和組織裂解萃取樣品（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等）乳酸脫氫酶（LDH）的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乳酸脫氫酶是一種氧化還原酶，催化丙酮酸和乳酸的互相轉(zhuǎn)化反應(yīng)。乳酸脫氫酶由4個(gè)亞單位構(gòu)成，有兩種類型：肌肉型和心肌型。根據(jù)其亞單位成分，分為5種同功酶。乳酸脫氫酶的活性檢測(cè)用來評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織的損害狀況?；诒幔╬yruvate）底物在乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase；LDH）的催化下，轉(zhuǎn)化成乳酸（lactate），同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），完全反應(yīng)后，在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化（340nm波長(zhǎng)）由此定量測(cè)定乳酸脫氫酶的活性。乳酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：lactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑，通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I，通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分：含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH－輔酶Q還原酶（NADH:QReductase）。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步。基于輔酶Q底物，在魚藤酮存在與否的情況下，通過NADH－輔酶Q還原酶的催化，轉(zhuǎn)化成還原型泛醌（CoQH2），同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化（340nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定NADH－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說明書

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 11:52

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• 細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體、昆蟲等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiringAspartateprotease；CASPASE），或稱半胱天冬蛋白酶，是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3（CellDeathGeneNumber3；秀麗隱桿線蟲細(xì)胞死亡基因數(shù)3）分支的一種，又稱CPP32（CysteineProteinaseProtein32kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度傳說中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd，被切離為17kd和11kd而激活細(xì)胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶YZ劑（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測(cè)用來評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織的凋亡狀況。基于人工合成的四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對(duì)硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放有色對(duì)硝基苯胺，在分光光度儀（405nm波長(zhǎng)）下，測(cè)定吸光峰值的變化，來定量測(cè)定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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