本文由 上海語燕生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2024-10-08 14:03 1059閱讀次數(shù)

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• 免疫組化試劑盒使用說明書

  上海哈靈生物科技有限公司免疫組化試劑盒使用說明書保存方法：2-8℃保存。有效期：一年。生產(chǎn)日期：見封口。工作原理：辣根過氧化物酶（HRP）的分子量（40000），它不會遮蓋抗原的結(jié)合部位，具有較高活性及特異性，可溶性佳，生成的產(chǎn)物不擴(kuò)散，可作用于多種底物，產(chǎn)生不同顏色且HRP穿透力強(qiáng)，易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。DAB在H2O2存在的情況下，可以作為HRP的電子供體，產(chǎn)生褐色的不溶顆粒，可作為顯色的試劑。試劑盒內(nèi)容：名稱規(guī)格10.01mol/LpH6.0枸櫞酸鹽緩沖液0.5L2PBS緩沖液1L3廣譜二抗1.5mL430%H2O25mL5DAB顯色液I0.3mL6DAB顯色液II0.3mL自備試劑：無水乙醇、蘇木素。操作步驟：1.60℃常規(guī)脫蠟至水后，將石蠟切片先后浸入二甲苯Ⅰ，二甲苯Ⅱ各10min。然后逐級降濃度酒精入水，每次3-5min。①無水酒精3－5min②90%酒精3－5min③85%酒精3－5min④75%酒精3－5min⑤PBS洗滌3次每次5min2.熱修復(fù)抗原：將切片置于0.01mol/LpH6.0枸櫞鈉緩沖液，微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10min后，反復(fù)1-2次，置于室溫自然冷卻。0.01mol/LpH7.0左右的PBS洗滌3次，每次5min3.消除內(nèi)源性過氧化物酶：用3%H2O2室溫孵育5-10min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗滌2-3次，每次5min；4.滴加一抗：滴加適當(dāng)稀釋的一抗到切片上，37℃孵育一定時間或者4℃隔天，pH7.4的PBS洗滌3次，每次5min。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間；背景過高時，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間。）5.加入廣譜二抗，37℃孵育一段時間，取出后PBS洗滌3次，每次5min。6.DAB顯色：取DAB顯色液I及II各50微升加至入1mL的水中，配成DAB工作液，滴加到切片上，室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時間。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。蒸餾水充分洗滌以終止反應(yīng)。7..觀察顯色后自來水沖，蘇木精復(fù)染1-2min，，自來水沖10min，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，干燥，分析拍照[詳細(xì)]

  2024-10-08 14:03

  產(chǎn)品樣冊

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• 免疫組化試劑盒說明書

  免疫組化試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Dazl抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Dazl一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 免疫組化染色試劑盒說明書

  免疫組化染色試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2014-06-23 00:00

  課件

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• 上海恒遠(yuǎn)通用性免疫組化試劑盒使用說明書

  Histostain-PlusKits免疫組化染色試劑盒簡介上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供的美國ZYMED公司SP系列試劑盒，全稱為過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素（Streptavidin/Peroxidase）染色試劑盒。該方法由美國ZYMED公司于1986年首建。由于鏈霉卵白素的分子量是60kDa，有四個亞基可和生物素結(jié)合，等電點為6.5，所以該方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、背景清晰、成本低廉的優(yōu)點，是理想的免疫組化染色方法。試劑盒內(nèi)容試劑（無色液體）：3%HO去離子水3ml、6ml或18ml22試劑A（藍(lán)色液體）：封閉用正常山羊血清工作液3ml、6ml或18ml試劑B（黃色液體）：生物素化二抗工作液（IgG/Bio）3ml、6ml或18mlSP-9000：生物素標(biāo)記山羊抗兔、大鼠、小鼠和豚鼠IgGSP-9001：生物素標(biāo)記山羊抗兔IgGSP-9002：生物素標(biāo)記山羊抗小鼠IgG試劑C（橙色液體）：辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液（S-A/HRP）3ml、6ml或18ml標(biāo)本染色1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃2、3%HO去離子水（無色液體）孵育5~10孵育10~15分鐘。22分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性。8、PBS沖洗，3分鐘×3次。3、蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘（如需采9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。孵育10~15分鐘。4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育10~1510、PBS沖洗，3分鐘×3次。分鐘，傾去，勿洗。11、顯色劑顯色（DAB或AEC）。5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~312、自來水充分沖洗。小時或4℃過夜。13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。6、PBS沖洗，3分鐘×3次。14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄１４娣椒?~8℃暗處保存。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 兔子說明書CD134 免疫組化試劑盒說明書

  兔子說明書CD134 免疫組化試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2016-07-06 00:00

  安裝說明

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• 小鼠IL-10 免疫組化試劑盒說明書

  小鼠IL-10免疫組化試劑盒說明書該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性IL-10抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的IL-10一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠IL-10免疫組化試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型IL-10一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：小鼠IL-10免疫組化試劑盒石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調(diào)整。三、小鼠IL-10免疫組化試劑盒直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-04 10:00

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• 人PR免疫組化試劑盒實驗說明書

  人PR免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性PR抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的PR一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型PR一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

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• CD90免疫組化試劑盒

  CD90免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD90抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD90一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型CD90一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-10-31 10:00

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• 小鼠 Thy1 免疫組化試劑盒

  小鼠ELISA試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Thy1抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Thy1一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型Thy1一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實驗步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。小鼠ELISA試劑盒注意事項：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附11：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計時4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

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• 人IL-29 免疫組化試劑盒

  該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性IL-29抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的IL-29一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。注：本產(chǎn)品僅供實驗室科學(xué)研究。本步驟是根據(jù)我們長期實驗得出的有效步驟，不一定是Zyou方法，請客戶根據(jù)具體科研實驗情況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化，并歡迎客戶和我們探討。[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:00

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• α-SMA免疫組化ELISA試劑盒說明

  α-SMA免疫組化ELISA試劑盒說明[詳細(xì)]

  2024-09-29 06:59

  選購指南

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• 免疫組化問題解答

  免疫組化問題解答[詳細(xì)]

  2013-12-21 00:00

  安裝說明

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• 免疫組化基礎(chǔ)知識

  免疫組織化學(xué)的概念：免疫組化是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)。免疫組化實驗所用的抗體有哪些？免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體，應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。免疫組化實驗所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本有哪些？實驗所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本Z常用、Z基本的方法，對于組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧性研究；石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響，但可進(jìn)行抗原修復(fù)，是免疫組化中的組織標(biāo)本制作方法。石蠟切片為什么要做抗原修復(fù)？有哪些方法？石蠟切片標(biāo)本均用甲醛固定，使得細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇，同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進(jìn)行IHC染色時，需要先進(jìn)行抗原修復(fù)或暴露，即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞，而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。常用的抗原修法有微波修復(fù)法，高壓加熱法，酶消化法，水煮加熱法等，常用的修復(fù)液是pH6.0的0.01mol/L的檸檬酸鹽緩沖液。免疫組化常用的染色方法有哪些？根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標(biāo)法，親和組織化學(xué)法，后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高，有利于微量抗原（抗體）在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位，其中生物素抗生物素染色法Z常用?？贵w交叉反應(yīng)的原因：指抗體除與其相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性反應(yīng)外還與其它抗原發(fā)生反應(yīng)。產(chǎn)生的原因有以下幾個方面：1.抗原特異性指用于免疫動物的抗原性物質(zhì)中含有多種抗原分子，它引起動物產(chǎn)生針對多種抗原分子特異性的相應(yīng)抗體。任何其它物質(zhì)只要含有一種或多種與上述物質(zhì)相同的抗原分子，必將與上述多特異性的抗血清發(fā)生交叉反應(yīng)。2.共同決定簇即兩種抗原分子中都含有相同的抗原決定簇。3.決定簇相似，兩種不同的抗原決定簇，如果結(jié)構(gòu)大致相同，由于空間構(gòu)象關(guān)系，某一決定簇的相應(yīng)抗體可以與大致相同的決定簇發(fā)生交叉反應(yīng)。當(dāng)然抗原一抗體之間構(gòu)象相似時的結(jié)合力小于吻合時的結(jié)合力。多抗和單抗特性比較：1.均一性。一種單抗中，每個抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同，只有一種Ig亞類。即單抗是一種純度很高的均一抗體。而從不同動物，不同時期所得到的多抗，各有不同的化學(xué)組成。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。2.穩(wěn)定性。單抗的穩(wěn)定較差，對PH變化敏感，對熱不穩(wěn)定，提純過程中易變性，而多抗的穩(wěn)定性則較好。3.特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇，所以用它進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)時，特異性強(qiáng)，敏感性高，一般不發(fā)生交叉反應(yīng)。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合，所以特異性較差，較易引起交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性。單抗的重復(fù)性好，而多抗每批都不一樣。5.沉淀反應(yīng)。多抗由于與抗原多價結(jié)合容易形成網(wǎng)絡(luò)樣沉淀，而單抗只與抗原結(jié)合產(chǎn)生二聚體，不能直接形成抗原抗體沉淀物?？贵w的保存：抗體儲存容器應(yīng)由不吸附蛋白質(zhì)的材料制成，常用的有聚丙烯，聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如儲存的抗體中蛋白濃度很低（10-100mg/L），就應(yīng)另加隔離蛋白以減少容器對抗體蛋白的吸附，隔離蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。絕大多數(shù)已稀釋的抗體應(yīng)存在4℃-8℃條件下，以免凍融對抗體蛋白產(chǎn)生有害效應(yīng)。抗體原液和已分離的免疫球蛋白組分應(yīng)保存于-20℃條件下，并避免反復(fù)凍融。冷凍的抗體溶液應(yīng)置于室溫中緩慢地解凍，應(yīng)避免用高溫快速解凍。被細(xì)菌污染的抗體常會出現(xiàn)假陽性結(jié)果，應(yīng)將污染的抗體溶液及其他試劑棄之。為防止細(xì)菌污染，可于抗體溶液中加入0.01%疊氮鈉?？贵w經(jīng)真空冷凍干燥后置-20℃以下可保存3-5年。保存稀釋后的單抗應(yīng)加入0.1%疊氮鈉濃度。大多數(shù)稀釋抗體可進(jìn)行冷凍保存，少數(shù)抗體可能會丟失抗原活性。大多數(shù)單抗，只要蛋白濃度適當(dāng)，可在4℃下保存數(shù)月。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人PR免疫組化試劑盒實驗方法

  人PR免疫組化試劑盒實驗方法[詳細(xì)]

  2015-06-15 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 即用型IL-1β免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型小鼠IL-1β免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號：QD82108試劑的保存：短期于4℃保存，長期于-20℃保存。工作原理IL-1β，白介素1β。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)過程中起ZX作用。類風(fēng)濕、結(jié)腸炎等病癥也和IL-1β的產(chǎn)生過多有關(guān)。IL-1α和IL-1β有25%的同源性。合成IL-1β的細(xì)胞很廣泛，包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形細(xì)胞、NK細(xì)胞、角化細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。兩者合成時都是31KDa的前體，經(jīng)剪切后成為17.5KDa的成熟蛋白質(zhì)。IL-1β前體在細(xì)胞內(nèi)合成，并無生物學(xué)活性。被IL-1β轉(zhuǎn)化酶（ICE）剪切為成熟形態(tài)后排出到細(xì)胞外。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。根據(jù)研究，SP（StreptAvidin-BiotinComplex）大約可形成上百個左右的過氧化物酶和數(shù)十個左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗兔IgG。SP：1ml（效價1：10，臨用前用SP稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗，37℃2小時左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間；背景過高時，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間。）加生物素化二抗,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SP,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項：如果染色背景過高，在SP反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 即用型SABC免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型SABC免疫組化染色試劑盒大鼠IgG使用說明書產(chǎn)品編號：QD82102試劑的保存：短期4℃可保存，長期-20℃。工作原理S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究，SABC大約可形成上百個左右的過氧化物酶和數(shù)十個左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗大鼠IgG。SABC：1ml（效價1：10，臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。30%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗（大鼠IgG），37℃2小時左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間；背景過高時，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間。）加生物素化抗大鼠IgG,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時間一般在3-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項：如果染色背景過高，在SABC反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 用于免疫組化的封閉血清如何使用

  免疫組化如何選擇使用封閉血清[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

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• 即用型大鼠SP-A免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型SP-A免疫組化染色試劑盒大鼠IgG使用說明書產(chǎn)品編號：QD82105試劑的保存：短期于4℃保存，長期于-20℃保存。工作原理肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(pulmonarysurfactant-associatedproteinA,SP-A)是肺表面活性物質(zhì)(pulmonarysur-factant,PS)中含量Z豐富的蛋白成分,主要分布于支氣管表面和肺泡氣液界面上,屬C-型膠凝素家族的重要成員,在維持PS的正常生物學(xué)功能和調(diào)節(jié)局部免疫及炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮重要作用。S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究，SABC大約可形成上百個左右的過氧化物酶和數(shù)十個左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗大鼠IgG。SABC：1ml（效價1：10，臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗（大鼠IgG），37℃2小時左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間；背景過高時，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間。）加生物素化抗大鼠IgG,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項：如果染色背景過高，在SABC反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 試劑盒使用說明書

  試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2015-01-23 00:00

  操作手冊

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• 免疫組化技術(shù)總結(jié)

  資料轉(zhuǎn)自丁香園：文檔為免疫組化全園資料整理、經(jīng)驗和教訓(xùn)總結(jié)、親身案例講述、難題集錦等等，多是原創(chuàng)經(jīng)驗和心得體會，難得的免疫組化技術(shù)文檔。[詳細(xì)]

  2018-10-20 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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