本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編

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• 細胞脂質比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  細胞脂質比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

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  細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2024-09-20 13:41

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  2016-03-10 00:00

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  組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-28 00:00

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• 組織半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  組織半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-19 00:00

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• 細胞彈性蛋白含量比色法（TPPS）定量檢測試劑盒產品說明書

  細胞彈性蛋白含量比色法（TPPS）定量檢測試劑盒產品說明書主要用途細胞彈性蛋白含量比色法（TPPS）定量檢測試劑是一種旨在通過酸性加熱萃取并轉化為可溶性彈性蛋白，與四苯基卟吩四磺酸染料結合，在堿性條件下，釋放棕紅色染料，酸性處理后，由分光光度儀比色分析，定量檢測細胞樣品中彈性蛋白含量的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的?？梢杂糜跈z測各種彈性蛋白，包括原彈性蛋白（tropoelastin）、致山黧豆中毒彈性蛋白（lathyrogenic）、α彈性蛋白、k-彈性蛋白等。適用于各種細胞（動物、人體等）或培養(yǎng)上清彈性蛋白水平檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測準確。技術背景彈性蛋白（elastin）是一種不溶性的非極性的堿性蛋白，具有高度抗拉能力（tensilestrength），存在于大動脈、氣管、支氣管、韌帶等結締組織細胞間。彈性蛋白由多肽二價交聯隨機扭絞（randomlykinked）組成，通過鎖鏈素（desmosine）和異鎖鏈素（isodesmosine）相連。動物細胞上的原彈性蛋白（tropoelastin）為單體，可溶性，分子量為62至72Kd。與微纖絲（microfibril）糖蛋白結合，形成彈性基質（matrix）或彈性組織筏（raft），構成細胞膜表面。通過酸性加熱萃取彈性蛋白，并轉化為可溶性衍生物，α彈性蛋白、k-彈性蛋白等，進而使用四苯基卟吩四磺酸（5,10,15,20-tetraphenylporphin-21H,23H-tetra-sulfonate；TPPS）染料與彈性蛋白發(fā)生溫克爾曼反應（Winkelmanreaction）結合，然后在堿性條件下釋放出棕紅色染料，酸性處理后，呈現綠色，通過分光光度儀（445nm波長）測定，分析彈性蛋白的含量。產品內容萃取液（ReagentA）毫升沉淀液（ReagentB）毫升清理液（ReagentC）毫升染色液（ReagentD）毫升濃縮液（ReagentE）毫升解離液（ReagentF）毫升強化液（ReagentG）毫升標準液（ReagentH）毫升稀釋液（ReagentI）毫升產品說明書1份保存方式保存標準液（ReagentH）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；染色液（ReagentD）避免光照；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標準液配制和樣品制備的容器15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器細胞刮脫棒：用于細胞脫離平式搖蕩儀：用于樣品操作干式恒溫儀：用于樣品孵育微型臺式離心機：用于樣品操作200微升1厘米光徑比色皿或96孔板：用于比色分析的容器分光光度儀或酶標儀：用于比色分析實驗步驟一、樣品預處理1）細胞上清處理移取300微升細胞培養(yǎng)上清到1.5毫升離心管加入xx微升萃取液（ReagentA）渦旋振蕩15秒放進100℃干式恒溫儀孵育60分鐘置于室溫下15分鐘冷卻放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心移取400微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升4℃預冷的沉淀液（ReagentB）在冰槽里孵育30分鐘，期間每隔10分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，確保無液體殘留；沉淀顆粒透明且肉眼難以看見置于冰槽里備用2）細胞處理準備好25cm2細胞培養(yǎng)瓶或60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞（1至5X106細胞）小心抽去培養(yǎng)液小心加入xx毫升清理液（ReagentC），覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞（注意：可以使用胰酶消化）加入xx毫升清理液（ReagentC），混勻細胞移入到預冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細胞從這一步驟開始）放進臺式離心機離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液，但保留300微升，混勻細胞顆粒群轉移到1.5毫升離心管加入xx微升萃取液（ReagentA）渦旋振蕩15秒放進100℃干式恒溫儀孵育60分鐘置于室溫下15分鐘冷卻放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心移取400微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：上清液可能會呈現黃色）加入xx微升4℃預冷的沉淀液（ReagentB）在冰槽里孵育30分鐘，期間每隔10分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保無液體殘留；沉淀顆粒透明且肉眼難以看見）置于冰槽里備用二、標準樣品配制準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至4號管分別加入xx微升稀釋液（ReagentI）到1至4號管移取xx微升標準液（ReagentH）到1號管，混勻小心移取xx微升1號管稀釋的標準液（ReagentH）到2號管，混勻小心移取xx微升2號管稀釋的標準液（ReagentH）到3號管，混勻小心抽去xx微升3號管稀釋的標準液（ReagentH）將1至4號管放進冰槽里備用；標準管濃度見下表管號稀釋液（ReagentI）標準液（ReagentH）標準彈性蛋白含量1xx微升xx微升xx微克2xx微升xx微升1號管xx微克3xx微升xx微升2號管xx微克4xx微升背景讀數0分別加入xx微升4℃預冷的沉淀液（ReagentB）到上述標準管里在冰槽里孵育30分鐘，期間每隔10分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保無液體殘留；沉淀顆粒透明且肉眼難以看見）置于冰槽里備用標準曲線測定分別加入xx微升染色液（ReagentD）到上述配制的標準液（ReagentH）里（注意：用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解）分別加入xx微升濃縮液（ReagentE）渦旋振蕩混勻室溫下，孵育60分鐘，期間每隔15分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保沒有液體殘留）加入xx微升解離液（ReagentF）用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解，并輔以渦旋震蕩（注意：確保充分溶解）加入xx微升強化液（ReagentG），混勻（注意：呈現綠色）轉移到新的200微升1厘米光徑的比色皿或96孔板即刻放進分光光度儀或酶標儀檢測（波長445nm）：獲得標準樣品吸光讀數重復實驗步驟1至11四次構建標準曲線：縱座標（Y軸）為吸光讀數；橫座標（X軸）為標準彈性蛋白含量（微克）（注意：標準樣品吸光讀數背景讀數）樣品測定加入xx微升染色液（ReagentD）到上述配制的待測樣品管里（注意：用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解）分別加入xx微升濃縮液（ReagentE）渦旋振蕩混勻室溫下，孵育60分鐘，期間每隔15分鐘渦旋振蕩15秒放進微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液（注意：確保沒有液體殘留）加入xx微升解離液（ReagentF）用槍頭抽打使沉淀顆粒溶解，并輔以渦旋震蕩（注意：確保充分溶解）加入xx微升強化液（ReagentG），混勻（注意：呈現綠色）轉移到新的200微升1厘米光徑的比色皿或96孔板即刻放進分光光度儀或酶標儀檢測（波長445nm）：獲得樣品吸光讀數根據上述標準曲線獲得樣品對應彈性蛋白含量（微克）（注意：待測樣品吸光讀數背景讀數）濃度計算注意事項本產品為25次操作，包括標準樣品本產品檢測范圍為5至100微克彈性蛋白操作時，須戴手套系統(tǒng)操作時，標準樣品測定只需1次彈性蛋白沉淀顆粒微小透明，肉眼難以看見操作需要非常細致，包括避免液體殘留、顆粒溶解等，否則會產生誤差試劑具有腐蝕性，嚴格注意操作安全孵育時，避免光照如果樣品彈性蛋白含量過低，可以濃縮樣品或增加樣品量樣品濃度可以表述為：微克彈性蛋白/細胞量；微克彈性蛋白/細胞總蛋白等通常1X105細胞含有40微克彈性蛋白本公司提供系列彈性蛋白檢測試劑產品質量標準本產品經鑒定性能穩(wěn)定本產品經鑒定檢測敏感[詳細]

  2018-11-19 10:00

  產品樣冊

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• 細胞沉默調節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑盒（中文版）

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  2015-04-08 00:00

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  細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-04-08 00:00

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  血液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-03-30 00:00

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• 體液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  體液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-03-30 00:00

  安裝說明

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• 細菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書 （中文版）

  細菌琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書 （中文版）[詳細]

  2015-01-05 00:00

  期刊論文

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• 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過反應系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經病變等研究。產品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應優(yōu)化，檢測敏感。技術背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關的重要元素，位于線粒體內膜，參與細胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個單體組成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反應，產生延胡索酸（furmarate），通過黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子?；阽晁崦摎涿傅姆磻恚褂萌斯る娮邮荏w染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長）的變化，來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應方式為：產品內容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升緩沖液（ReagentC）XX毫升反應液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升陰性液（ReagentF）XX微升產品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復凍融；反應液（ReagentD）含有毒性物質，避免直接用手接觸；底物液（ReagentE），避免光照；有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器4℃（微型）臺式離心機：用于樣品處理DOUNCE勻漿器：用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應物孵育比色皿：用于比色測定的容器分光光度儀：用于比色分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后進行下列操作。一、樣品準備手術取出動物組織，并秤重以確定200毫克組織重量（選擇步驟）放進預冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（選擇步驟）抽去清洗液移入到一個液氮凍存管即刻放進液氮罐過夜次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）放進一個15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約20至40下）（注意：參見注意事項8）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預冷的1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混勻顆粒群移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質濃度定量試劑盒－GMS30030.1）放進－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準備準備好待測樣品，置于冰槽里設定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長600nm，間隔60秒，讀數6次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentC）在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反應液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放進25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細]

  2018-11-08 10:00

  產品樣冊

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• 細胞糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒產品說明書

  細胞糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒產品說明書[詳細]

  2015-04-14 00:00

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• 細胞基質金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書

  主要用途細胞基質金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進而使用Ellman試劑，產生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產物吸光峰值的變化，即采用比色法來測定細胞裂解樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品（動物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測，以及YZ劑和激活劑的篩選。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術背景基質金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結構高度同源的分泌型或膜相關性鋅內肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細胞外基質成分。迄今為止發(fā)現的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質（extracellularmatrix）成分，同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關節(jié)炎、癌細胞浸入轉移等。根據降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內絕大多數細胞并不儲備MMPs，當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應。基質金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經（蛋白）聚糖（neurocan）?；|金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉移、血管形成、動脈粥樣硬化等疾病有關?；诤蚨嚯模╰hiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應后，產生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長），來定量測定細胞基質金屬蛋白酶2的特異活性?；|金屬蛋白酶2反應系統(tǒng)為：[詳細]

  2018-11-08 10:00

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• 細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒產品說明書

  細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒產品說明書主要用途細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應后，采用比色法測定其峰值的變化，以此進行測算單位酶活性的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測。廣泛應用于細胞凋亡、蛋白組學、病理生理學、神經病變等研究。產品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應優(yōu)化，檢測敏感。技術背景細胞張力蛋白同源在10號染色體缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又稱為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一個腫瘤YZ基因，位于染色體10q23.3，轉錄產物515kb，蛋白產物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白（tenasin）、輔助蛋白（auxilin）同源的區(qū)域，是一種雙重特異性磷酸酶，能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有調節(jié)細胞周期、防止細胞過度生長和分開裂解、參與細胞凋亡、粘附、遷移、浸潤，控制細胞內磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，調控Akt/PKB信號通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉移，以及多發(fā)性錯構瘤綜合征（Cowdensyndrome）等?；诘孜锪字＜〈?3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解產生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同時釋放出游離磷酸根，進而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應產生其峰值的變化（660nm波長），以此測算PTEN的活性。產品內容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升緩沖液（ReagentC）1毫升陰性液（ReagentD）1毫升反應液（ReagentE）200微升終止液（ReagentF）1毫升顯色液（ReagentG）4毫升標準液（ReagentH）500微升產品說明書1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、緩沖液（ReagentC）、反應液（ReagentE）和顯色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反復凍融；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸；顯色液（ReagentG）避免光照，有效保證6月用戶自備15毫升離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品處理和保存的容器細胞刮脫棒：用于貼壁細胞脫離（微型）臺式離心機：用于樣品收集培養(yǎng)箱：用于孵育反應物比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進冰槽里融化。然后進行下列操作。樣品準備準備好25cm2細胞培養(yǎng)瓶或60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞（5X106細胞）小心加入3毫升預冷的清理液（ReagentA），覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞加入3毫升清理液（ReagentA），混勻細胞移入到預冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細胞從這一步驟開始）放進4℃臺式離心機離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混勻轉移到預冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預冷的1.5毫升離心管移取2微升進行蛋白定量測定（注意：建議使用Bradford蛋白質濃度定量試劑盒－HL30030.1）即刻放進－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測定準備準備好待測樣品（例如細胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：樣品須澄清）設定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長為660nm，并置零準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至5號管按下表分別加入陰性液（ReagentD）和標準液（ReagentH）到每個離心管，混勻將1至5號管放進冰槽里備用，避免光照；標準管濃度見下表管號陰性液（ReagentD）標準液（ReagentH）測定體系標準磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標準曲線測定移取20微升陰性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的標準液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進分光光度儀檢測：獲得吸光讀數重復實驗步驟1至7四次構建標準曲線：縱座標（Y軸）為吸光單位（A）；橫座標（X軸）為標準磷濃度（微摩爾/升）樣品背景測定移取20微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測樣品（總量100微克細胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進分光光度儀檢測：獲得吸光讀數根據標準曲線獲得樣品背景對應磷濃度樣品活性測定移取10微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測樣品（總量100微克細胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應液（ReagentE）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進分光光度儀檢測：獲得吸光讀數根據標準曲線獲得樣品活性對應磷濃度計算樣品活性{[根據標準曲線獲得樣品活性對應磷濃度（微摩爾/升）根據標準曲線獲得樣品背景對應磷濃度（微摩爾/升）]X5（體系倍數）X樣品稀釋倍數}÷10（反應時間；分鐘）＝納摩爾磷/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項本產品為25次操作，包括5次標準測定操作時，避免污染母液操作時，須戴手套終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測定后，比色皿須清洗徹底如果用戶沒有660nm波長，可以使用600至660nm的任一波長替代顯示綠色表明具有較強酶活性空白對照讀數應小于0.2建議待測樣本蛋白濃度為100微克/5微升；如果樣本酶活性過低或過高，則可以增加或降低樣本量；（本公司提供Bradford蛋白質濃度定量試劑盒－HL30030.1）鈣調神經磷酸酶活性單位濃度定義：在37℃溫度下，pH8.0的情況下，每單位酶在單位時間內（每分鐘）釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測試劑產品質量標準本產品經鑒定性能穩(wěn)定本產品經鑒定檢測準確[詳細]

  2018-11-19 10:00

  產品樣冊

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• 乳酸脫氫酶（LDH）總活性終點比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  乳酸脫氫酶（LDH）總活性終點比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-22 00:00

  安裝說明

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• 線粒體呼吸鏈復合物I活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復合物I活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-19 00:00

  課件

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• 組織硫代酸反應物（TBARS）比色法定量檢測試劑盒 產品說明書（中文版）

  組織硫代酸反應物（TBARS）比色法定量檢測試劑盒 產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-01-04 00:00

  期刊論文

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• 線粒體呼吸鏈復合物II活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復合物II活性比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚，通過反應系統(tǒng)測定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化，即采用比色法測定樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動物、人體、酵母）以及細胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測?？捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經病變等研究。產品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應優(yōu)化，檢測敏感。技術背景線粒體呼吸鏈復合物II，通常稱為琥珀酸－輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶（Succinate-CoenzymeQReductase；SuccinateDehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體：含有四個亞單位，包括共價結合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸（flavinadeninedinucleotide；FAD）和三個鐵硫ZX（Fe-Sclusters），以及細胞色素b亞單位，其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸－輔酶Q還原酶。復合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化為富馬酸（fumarate），線粒體內電子由供體FAD傳遞到內膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉移反應，進行呼吸鏈傳遞。該酶異常會導致嗜鉻細胞瘤（paraganglioma）、腎上腺嗜鉻細胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh綜合征?；阽晁岬孜铮ㄟ^琥珀酸－輔酶Q還原酶的催化，氧化為富馬酸，同時氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）轉化為還原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度儀下產生吸光峰值的變化（600nm波長），由此定量測定琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應系統(tǒng)是：ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產品內容緩沖液（ReagentA）20毫升反應液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升產品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復凍融；反應液（ReagentB）和底物液（ReagentD），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應物實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；緩沖液（ReagentA）室溫預熱；反應液（ReagentB）和底物液（ReagentD）注意避光。然后進行下列操作。測定準備準備好待測樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長為600nm，間隔60秒，讀數6次（共5分鐘），并置零背景對照測定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數次，混勻放進30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數次，混勻（限定在3秒之內）即刻放入分光光度儀檢測，此為背景空對照：600波長讀數0分鐘－600波長讀數1分鐘或5分鐘樣品活性測定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數次，混勻放進30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數次，混勻（限定在3秒之內）即刻放入分光光度儀檢測，此為樣品活性讀數：600波長讀數0分鐘－600波長讀數1分鐘或5分鐘計算樣品活性【（樣品讀數－背景讀數）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數】÷【0.1（樣品容量；毫升）X21.8（毫摩爾吸光系數X1或5（反應時間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細]

  2018-11-08 10:00

  產品樣冊

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• 細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

  細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）[詳細]

  2015-01-15 00:00

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