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細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-05-12 00:00 405閱讀次數(shù)
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細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-12 00:00
選購指南
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細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細胞DNA損傷彗星(Comet)完全熒光檢測試劑是一種旨在采用動物細胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動尾巴,來進行體外評價和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于新鮮動物細胞的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細胞染色體為“頭",而松散和斷裂的DNA為“尾",以此評價DNA損傷程度。這是分析單一細胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細胞固定包埋在凝膠里;第二,細胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進行體外檢測,成為細胞DNA損傷研究的基本手段。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒(中文版說明書)
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途通用型DNA損傷彗星檢測試劑是一種旨在采用組織細胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動尾巴,來進行體外評價和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于新鮮動物細胞、組織、血液、等樣品的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細胞染色體為“頭”,而松散和斷裂的DNA為“尾”,以此評價DNA損傷程度。這是分析單一細胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細胞固定包埋在凝膠里;第二,細胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進行體外檢測,成為細胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測的敏感程度。堿性電泳(alkalineelectrophoresis)為常規(guī)電泳檢測,可以檢測單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無嘌呤核酸位點(apurinicsite)和無嘧啶核酸位點(apyrimidicsite)、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物(alkali-labileDNAadduct)等DNA損傷。[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2015-09-15 00:00
產(chǎn)品樣冊
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2015-05-04 00:00
課件
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細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2016-03-15 00:00
選購指南
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精子DNA吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光,確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙(Acridineorange;AO)染色技術(shù),是精子染色質(zhì)分析和授精效率評價的Z常用的方法?;谡>蛹毎娜旧|(zhì)完整性和DNA雙鏈特性,作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA,即雙鏈DNA嵌合(intercalate)時,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長530nm);而與變性DNA,即單鏈DNA結(jié)合時,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm),以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升固著液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;染色液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺式離心機:用于樣品操作血細胞計數(shù)器:用于細胞計數(shù)載玻片和蓋玻片:用于精子細胞爬片(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察染色的精子細胞細胞流式儀:用于分析染色的精子細胞實驗步驟一、細胞流式儀分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細胞計數(shù)器上進行精子細胞計數(shù):1×107精子細胞/毫升6.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實驗步驟4至7一次(不包括實驗步驟5)9.加入xx微升染色液(ReagentB),混勻顆粒群10.室溫下孵育10分鐘,避免光照11.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g12.小心抽去上清液13.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群14.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g15.小心抽去上清液16.重復(fù)實驗步驟13至15一次17.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群18.即刻進行細胞流式儀雙通道分析:觀察10000個細胞以上,200細胞/秒;激發(fā)波長200mW,散發(fā)波長16mW激發(fā)波長488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素(FITC)藻紅蛋白(phycoerythrin;PE)熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長530630流式儀通道FL1FL3熒光增強正常精子DNA異常精子DNA19.細胞流式儀檢測正常精子DNA(雙鏈DNA)參考圖像如下(X軸:FL3;Y軸:FL1;R1左下角為細胞碎屑;R2為正常精子細胞;R3為異常精子細胞;R4為未成熟精子細胞)二、熒光顯微鏡分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細胞計數(shù)器上進行精子細胞計數(shù):1×107精子細胞/毫升6.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實驗步驟4至7一次(不包括實驗步驟5)9.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群10.即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11.用蓋玻片或另一個載玻片推片12.置于空氣中涼干13.加上xx微升固著液(ReagentB),覆蓋樣品表面14.室溫下孵育2小時15.小心抽去固著液16.小心加上xx微升染色液(ReagentC),覆蓋樣品表面17.室溫下孵育5分鐘,避免光照18.小心抽去染色液19.小心加上xx微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面20.小心抽去清理液21.蓋上蓋玻片22.即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)(注意:每個視野計數(shù)200個精子)23.分析結(jié)果(參考圖)觀察紅色熒光:濾波器激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm――可見黃色、桔紅色至紅色熒光,表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光:濾波器激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長530nm――可見綠色熒光,表明精子DNA正常注意事項1.本產(chǎn)品為50次操作2.操作時須戴手套3.樣品檢測前,建議在血細胞計數(shù)器上進行精子細胞計數(shù)4.精子細胞計數(shù)時乘上稀釋倍數(shù)104。標準血細胞計數(shù)器(Hemocytometer)的計算方法是:1毫米方塊的細胞計數(shù)X104(稀釋倍數(shù))=實際細胞數(shù)/毫升5.染色完成后,即刻進行檢測分析,否則由于其毒性導(dǎo)致精子DNA異常6.如果流式細胞儀出現(xiàn)干擾,建議使用630nm散發(fā)波長,或進行補償處理,建議使用誘導(dǎo)處理樣品:10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7.本產(chǎn)品常用于凍存精子細胞的檢測分析8.本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析(SpermChromatinStructureAssay;SCSA),分析參數(shù)如下:%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計算方法紅色熒光:紅色+綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人:小于15%正常人:小于10%閾值:小于30%閾值:小于15%高生育力:0-15%中等生育力:16-27%低或差生育力:27-30%參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9.本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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活體細胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途活體細胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對細胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂(Cardiolipin)是線粒體膜上的主要成分之一。它對細胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解,致使心磷脂顯著減少,Z終造成線粒體的嚴重損害。Nonyl-AcrydineOrange(NAO)是一種可自由通過細胞膜的染色劑,特異性地染色線粒體上的心磷脂,并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化,其熒光顯著減弱。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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真菌/酵母細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 真菌/酵母細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-02-06 00:00
期刊論文
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真菌/酵母細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 真菌/酵母細胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-29 00:00
期刊論文
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精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書
- 精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書[詳細]
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2015-05-27 00:00
課件
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2016-03-10 00:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
操作手冊
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組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo--AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強度顯著增強,在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織(動物、人體等)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細胞內(nèi),鈣離子主要儲存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲存在控制細胞活化、調(diào)控信號通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾,維持細胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo--AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標記染料,特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲,可以檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長525nm,來定量測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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-3′末端DNA 生物素標記試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- -3′末端DNA 生物素標記試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-06-18 00:00
操作手冊
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全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-06-11 00:00
選購指南
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細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2024-09-28 00:46
安裝說明
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細胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途細胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑是一種旨在使用化學(xué)方法快速充分裂解細胞,并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下,通過超速離心,收集所有細胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞(動物、人體)等樣品。可直接用于核酸蛋白結(jié)合凝膠遷移電泳分析(EMSA)、DNA足跡法檢測、特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,收集效果好。技術(shù)背景通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑可以防止裂解后細胞內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞,充分保留細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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通用型細胞凍存試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 通用型細胞凍存試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2024-09-28 00:08
期刊論文
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細胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-12 00:00
產(chǎn)品樣冊
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