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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2016-03-15 00:00 816閱讀次數(shù)
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2016-03-15 00:00
選購指南
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:46
安裝說明
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,Rhod-2-AM,進(jìn)入細(xì)胞受到酯酶解離,同時(shí)其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm,來定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)10毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板,標(biāo)記為:細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔(不含細(xì)胞)、Zda對(duì)照孔(含細(xì)胞)小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板,混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對(duì)照孔R(shí)FU)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-12-26 00:00
期刊論文
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組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定組織線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織(動(dòng)物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,同時(shí)其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm,來定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm準(zhǔn)備好純化的線粒體樣品,置于冰槽里融化測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板,標(biāo)記為:線粒體樣品孔、空白對(duì)照孔(不含線粒體)、Zda對(duì)照孔(不含線粒體)移取100微升純化線粒體樣品(100微克)到線粒體樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板,混勻室溫下(22℃),孵育30分鐘,避免光照放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對(duì)照孔R(shí)FU)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))=納摩爾/100微克線粒體注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
操作手冊(cè)
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組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo--AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織(動(dòng)物、人體等)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號(hào)通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo--AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料,特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲,可以檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長525nm,來定量測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過鈣離子特異性熒光探針Fluo-4,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4,一種與鈣離子結(jié)合,其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針,可以敏感測(cè)定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長485nm,散發(fā)波長520nm,來定量測(cè)定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升反應(yīng)液(ReagentC)6毫升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentC)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號(hào)通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo-AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料,特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲,可以檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長525nm,來定量測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說明書(中文版)
- 組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-29 00:00
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Fura-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下測(cè)量不同激發(fā)波長下相對(duì)熒光峰值的比值,來測(cè)定細(xì)胞漿總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)或冰凍切片組織細(xì)胞漿鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中細(xì)胞漿鈣離子在調(diào)節(jié)鈣離子通道,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。細(xì)胞漿鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體、細(xì)胞漿分離。Fura-2AM(acetoxy-methylester),一種具有細(xì)胞膜通透性,與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光的染料,通過其不同激發(fā)波長340nm/380nm產(chǎn)生的熒光信號(hào)比(散發(fā)波長510nm)來極ng確測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子水平。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育96孔培養(yǎng)板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析(共聚焦)熒光顯微鏡:用于熒光染色觀察實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長340nm和380nm,散發(fā)波長510nm測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,標(biāo)記為:細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔(不含細(xì)胞)、Zda對(duì)照孔(含細(xì)胞)小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板,混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)包括樣品RFU340nm、樣品RFU380nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm計(jì)算樣品細(xì)胞漿鈣離子濃度【(樣品RFU340nm/樣品RFU380nm)-(空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm/空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm-樣品RFU340nm/樣品RFU380nm)】X(空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm)X140(納摩爾;解離常數(shù))三、(共聚焦)或熒光顯微鏡檢測(cè)1.準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的細(xì)胞爬片樣品小心加上500微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面小心移去樣品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液,混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到樣品上,覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心移去樣品上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液(ReagentA)蓋上蓋玻片即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察:激發(fā)波長340至400nm,散發(fā)波長510nm(細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光)四、冰凍切片檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的冰凍切片小心加上500微升清理液(ReagentA),覆蓋切片樣品表面小心移去樣品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液,混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片樣品上,覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液(ReagentA)蓋上蓋玻片即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察:激發(fā)波長340至400nm,散發(fā)波長510nm(組織細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次(顯微鏡)或60次(酶標(biāo)板)操作操作時(shí),須戴手套可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)如果細(xì)胞內(nèi)酯酶缺失,則建議使用微注射(microinjection)技術(shù)避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-05-12 00:00
選購指南
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純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2024-09-28 00:04
課件
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活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在線粒體,并呈現(xiàn)紅色,用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種線粒體(動(dòng)物、人體、昆蟲等)的形態(tài)觀察、活性探測(cè)和定位標(biāo)記。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器,其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細(xì)胞中,如動(dòng)物的心肌,肝,腎等器官和組織的細(xì)胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取,或從組織培養(yǎng)細(xì)胞中提取。在光學(xué)顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細(xì)線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED,是一種含有硫醇(Thiol)氯甲基基團(tuán)的熒光染料,自由通過細(xì)胞膜,選擇性地聚集在線粒體。它可以對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行直接染色,在580nm波長可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位,以檢測(cè)線粒體活性。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測(cè)定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對(duì)細(xì)胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,活體檢測(cè),性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂(Cardiolipin)是線粒體膜上的主要成分之一。它對(duì)細(xì)胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解,致使心磷脂顯著減少,Z終造成線粒體的嚴(yán)重?fù)p害。Nonyl-AcrydineOrange(NAO)是一種可自由通過細(xì)胞膜的染色劑,特異性地染色線粒體上的心磷脂,并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化,其熒光顯著減弱。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-02-06 00:00
期刊論文
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真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-01-29 00:00
期刊論文
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全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-06-11 00:00
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動(dòng)物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-01-14 00:00
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