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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編
2018-11-18 10:00 703閱讀次數(shù)
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主要用途細(xì)胞DNA損傷彗星(Comet)完全熒光檢測試劑是一種旨在采用動(dòng)物細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭",而松散和斷裂的DNA為“尾",以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測,成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細(xì)胞DNA損傷彗星(Comet)完全熒光檢測試劑是一種旨在采用動(dòng)物細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭",而松散和斷裂的DNA為“尾",以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測,成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-12 00:00
選購指南
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-09-15 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-05-04 00:00
課件
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒(中文版說明書)
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途通用型DNA損傷彗星檢測試劑是一種旨在采用組織細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞、組織、血液、等樣品的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭”,而松散和斷裂的DNA為“尾”,以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測,成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測的敏感程度。堿性電泳(alkalineelectrophoresis)為常規(guī)電泳檢測,可以檢測單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無嘌呤核酸位點(diǎn)(apurinicsite)和無嘧啶核酸位點(diǎn)(apyrimidicsite)、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物(alkali-labileDNAadduct)等DNA損傷。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子DNA吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光,確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種動(dòng)物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運(yùn)動(dòng)能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評(píng)價(jià)是精子分析的重要指標(biāo),也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙(Acridineorange;AO)染色技術(shù),是精子染色質(zhì)分析和授精效率評(píng)價(jià)的Z常用的方法?;谡>蛹?xì)胞的染色質(zhì)完整性和DNA雙鏈特性,作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA,即雙鏈DNA嵌合(intercalate)時(shí),呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長530nm);而與變性DNA,即單鏈DNA結(jié)合時(shí),呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm),以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升固著液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;染色液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作血細(xì)胞計(jì)數(shù)器:用于細(xì)胞計(jì)數(shù)載玻片和蓋玻片:用于精子細(xì)胞爬片(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察染色的精子細(xì)胞細(xì)胞流式儀:用于分析染色的精子細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、細(xì)胞流式儀分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時(shí)內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù):1×107精子細(xì)胞/毫升6.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至7一次(不包括實(shí)驗(yàn)步驟5)9.加入xx微升染色液(ReagentB),混勻顆粒群10.室溫下孵育10分鐘,避免光照11.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g12.小心抽去上清液13.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群14.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g15.小心抽去上清液16.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13至15一次17.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群18.即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀雙通道分析:觀察10000個(gè)細(xì)胞以上,200細(xì)胞/秒;激發(fā)波長200mW,散發(fā)波長16mW激發(fā)波長488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素(FITC)藻紅蛋白(phycoerythrin;PE)熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長530630流式儀通道FL1FL3熒光增強(qiáng)正常精子DNA異常精子DNA19.細(xì)胞流式儀檢測正常精子DNA(雙鏈DNA)參考圖像如下(X軸:FL3;Y軸:FL1;R1左下角為細(xì)胞碎屑;R2為正常精子細(xì)胞;R3為異常精子細(xì)胞;R4為未成熟精子細(xì)胞)二、熒光顯微鏡分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時(shí)內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù):1×107精子細(xì)胞/毫升6.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至7一次(不包括實(shí)驗(yàn)步驟5)9.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群10.即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11.用蓋玻片或另一個(gè)載玻片推片12.置于空氣中涼干13.加上xx微升固著液(ReagentB),覆蓋樣品表面14.室溫下孵育2小時(shí)15.小心抽去固著液16.小心加上xx微升染色液(ReagentC),覆蓋樣品表面17.室溫下孵育5分鐘,避免光照18.小心抽去染色液19.小心加上xx微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面20.小心抽去清理液21.蓋上蓋玻片22.即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)(注意:每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)精子)23.分析結(jié)果(參考圖)觀察紅色熒光:濾波器激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm――可見黃色、桔紅色至紅色熒光,表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光:濾波器激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長530nm――可見綠色熒光,表明精子DNA正常注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為50次操作2.操作時(shí)須戴手套3.樣品檢測前,建議在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù)4.精子細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)乘上稀釋倍數(shù)104。標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計(jì)數(shù)器(Hemocytometer)的計(jì)算方法是:1毫米方塊的細(xì)胞計(jì)數(shù)X104(稀釋倍數(shù))=實(shí)際細(xì)胞數(shù)/毫升5.染色完成后,即刻進(jìn)行檢測分析,否則由于其毒性導(dǎo)致精子DNA異常6.如果流式細(xì)胞儀出現(xiàn)干擾,建議使用630nm散發(fā)波長,或進(jìn)行補(bǔ)償處理,建議使用誘導(dǎo)處理樣品:10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7.本產(chǎn)品常用于凍存精子細(xì)胞的檢測分析8.本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析(SpermChromatinStructureAssay;SCSA),分析參數(shù)如下:%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計(jì)算方法紅色熒光:紅色+綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人:小于15%正常人:小于10%閾值:小于30%閾值:小于15%高生育力:0-15%中等生育力:16-27%低或差生育力:27-30%參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9.本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書
- 精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2015-05-27 00:00
課件
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:46
安裝說明
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2016-03-15 00:00
選購指南
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活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對(duì)細(xì)胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂(Cardiolipin)是線粒體膜上的主要成分之一。它對(duì)細(xì)胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解,致使心磷脂顯著減少,Z終造成線粒體的嚴(yán)重?fù)p害。Nonyl-AcrydineOrange(NAO)是一種可自由通過細(xì)胞膜的染色劑,特異性地染色線粒體上的心磷脂,并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化,其熒光顯著減弱。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書
- 真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-09-15 00:00
報(bào)價(jià)單
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活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-04-23 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-02-06 00:00
期刊論文
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真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化(NAO)熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-29 00:00
期刊論文
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高通量RNA干擾技術(shù)篩選DNA損傷
- 本文我們列舉了如何通過對(duì)磷酸化的組蛋白H2AX和DNA進(jìn)行免疫熒光雙色分析方法來檢測DNA損傷。組蛋白H2AX在絲氨酸139位點(diǎn)的磷酸化被認(rèn)為是藥物或輻射造成的DNA損傷的敏感標(biāo)記。文中也闡明了我們利用RNAi對(duì)雙色標(biāo)定DNA損傷分析是一個(gè)敏感和快速的自動(dòng)化過程,而且這種方法被證明可以有效發(fā)現(xiàn)新的目標(biāo)。[詳細(xì)]
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2021-02-19 13:46
應(yīng)用文章
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活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑盒
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對(duì)細(xì)胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂(Cardiolipin)是線粒體膜上的主要成分之一。它對(duì)細(xì)胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解,致使心磷脂顯著減少,Z終造成線粒體的嚴(yán)重?fù)p害。Nonyl-AcrydineOrange(NAO)是一種可自由通過細(xì)胞膜的染色劑,特異性地染色線粒體上的心磷脂,并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化,其熒光顯著減弱。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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損傷分子說明書試劑盒檢測說明
- 損傷分子說明書試劑盒檢測說明本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T2ng/L-80ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腎損傷分子-1(Kim-1)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人腎損傷分子-1(Kim-1)水平。用純化的人腎損傷分子-1(Kim-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腎損傷分子-1(Kim-1),再與HRP標(biāo)記的腎損傷分子-1(Kim-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎損傷分子-1(Kim-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人腎損傷分子-1(Kim-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書
- 糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途糞便DNA高質(zhì)純化試劑是一種旨在經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)分離法以后,由糞便(人體、動(dòng)物等)中分離獲得的DNA,進(jìn)行二度親和純化,Zda限度地去除復(fù)雜又難以去除的蛋白、金屬成分、雜質(zhì)等非核酸類物質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其應(yīng)用于即時(shí)PCR、RLPF分析、測序、雜交、遺傳鑒定、突變分析、性別鑒定、司法鑒定等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡單,純度出色,重復(fù)性好,堪稱國際上同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景糞便中含有許多污染成分,降解DNA和YZPCR反應(yīng)。針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)處理無法有效地去除頑固干擾因子的情況下,運(yùn)用特殊親和技術(shù),達(dá)到高度純化的效果。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)2毫升親和液(ReagentJ)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于DNA純化操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反應(yīng)物恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟1.準(zhǔn)備好從1克糞便樣品分離的DNA產(chǎn)物(100微克DNA總量)2.移入到1.5毫升離心管3.加入適量的緩沖液(ReagentA)到總?cè)萘繛?00微升4.加入100微升親和液(ReagentB)(注意:使用前,先搖勻沉淀的親和液(ReagentB))5.用手充分混勻6.放進(jìn)56℃恒溫水槽孵育30分鐘,期間用手混勻一次7.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升離心管9.移出適量DNA溶液進(jìn)行后續(xù)PCR反應(yīng)或保存在-20℃冰箱里注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為20次(1克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作或50次(200毫克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作2.操作時(shí),須戴手套3.根據(jù)用戶樣品量大小,相應(yīng)調(diào)整試劑用量4.親和液(ReagentB)使用前,須搖勻5.建議使用糞便DNA分離試劑盒(HL20011.1)作為標(biāo)準(zhǔn)分離法操作6.本公司提供系列糞便核酸純化試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純度優(yōu)異[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書
- 植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:05
期刊論文
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-12-26 00:00
期刊論文
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