資料庫
精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書
-
本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-05-27 00:00 298閱讀次數(shù)
文檔僅可預覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書
登錄或新用戶注冊
請用手機微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機電腦聯(lián)動
更多資料
-
精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書
- 精子DNA 吖啶橙(acridine orange)熒光檢測試劑盒說明書[詳細]
-
2015-05-27 00:00
課件
-
精子DNA吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光,確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術背景在男科學(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(acrosomalreaction)功能的評價是精子分析的重要指標,也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙(Acridineorange;AO)染色技術,是精子染色質(zhì)分析和授精效率評價的Z常用的方法?;谡>蛹毎娜旧|(zhì)完整性和DNA雙鏈特性,作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA,即雙鏈DNA嵌合(intercalate)時,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長530nm);而與變性DNA,即單鏈DNA結(jié)合時,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm),以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升固著液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;染色液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺式離心機:用于樣品操作血細胞計數(shù)器:用于細胞計數(shù)載玻片和蓋玻片:用于精子細胞爬片(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察染色的精子細胞細胞流式儀:用于分析染色的精子細胞實驗步驟一、細胞流式儀分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細胞計數(shù)器上進行精子細胞計數(shù):1×107精子細胞/毫升6.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復實驗步驟4至7一次(不包括實驗步驟5)9.加入xx微升染色液(ReagentB),混勻顆粒群10.室溫下孵育10分鐘,避免光照11.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g12.小心抽去上清液13.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群14.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g15.小心抽去上清液16.重復實驗步驟13至15一次17.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群18.即刻進行細胞流式儀雙通道分析:觀察10000個細胞以上,200細胞/秒;激發(fā)波長200mW,散發(fā)波長16mW激發(fā)波長488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素(FITC)藻紅蛋白(phycoerythrin;PE)熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長530630流式儀通道FL1FL3熒光增強正常精子DNA異常精子DNA19.細胞流式儀檢測正常精子DNA(雙鏈DNA)參考圖像如下(X軸:FL3;Y軸:FL1;R1左下角為細胞碎屑;R2為正常精子細胞;R3為異常精子細胞;R4為未成熟精子細胞)二、熒光顯微鏡分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細胞計數(shù)器上進行精子細胞計數(shù):1×107精子細胞/毫升6.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復實驗步驟4至7一次(不包括實驗步驟5)9.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群10.即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11.用蓋玻片或另一個載玻片推片12.置于空氣中涼干13.加上xx微升固著液(ReagentB),覆蓋樣品表面14.室溫下孵育2小時15.小心抽去固著液16.小心加上xx微升染色液(ReagentC),覆蓋樣品表面17.室溫下孵育5分鐘,避免光照18.小心抽去染色液19.小心加上xx微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面20.小心抽去清理液21.蓋上蓋玻片22.即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)(注意:每個視野計數(shù)200個精子)23.分析結(jié)果(參考圖)觀察紅色熒光:濾波器激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm――可見黃色、桔紅色至紅色熒光,表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光:濾波器激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長530nm――可見綠色熒光,表明精子DNA正常注意事項1.本產(chǎn)品為50次操作2.操作時須戴手套3.樣品檢測前,建議在血細胞計數(shù)器上進行精子細胞計數(shù)4.精子細胞計數(shù)時乘上稀釋倍數(shù)104。標準血細胞計數(shù)器(Hemocytometer)的計算方法是:1毫米方塊的細胞計數(shù)X104(稀釋倍數(shù))=實際細胞數(shù)/毫升5.染色完成后,即刻進行檢測分析,否則由于其毒性導致精子DNA異常6.如果流式細胞儀出現(xiàn)干擾,建議使用630nm散發(fā)波長,或進行補償處理,建議使用誘導處理樣品:10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7.本產(chǎn)品常用于凍存精子細胞的檢測分析8.本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析(SpermChromatinStructureAssay;SCSA),分析參數(shù)如下:%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計算方法紅色熒光:紅色+綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人:小于15%正常人:小于10%閾值:小于30%閾值:小于15%高生育力:0-15%中等生育力:16-27%低或差生育力:27-30%參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9.本公司提供系列發(fā)育生物學相關檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CAS:10127-02-3,丫啶橙,吖啶橙,堿性橙14,3,6-雙(二甲基氨基)吖啶氯化鋅鹽,Acridine orange
- CAS:10127-02-3,丫啶橙,吖啶橙,堿性橙14,3,6-雙(二甲基氨基)吖啶氯化鋅鹽,Acridineorange英文名稱:Acridineorange;Basicorange3RN;Rhodulineorange;Euchrysine3RXA;C.I.46005其他名稱:吖啶橙;堿性橙14;3,6-雙(二甲基氨基)吖啶氯化鋅鹽CAS號:10127-02-3C17H20ClN30.5ZnCl2HCl=369.96級別:ElectrophoresisGrade分光有效含量:≥90.0%Em(490nm,water):>36500CAS:10127-02-3,丫啶橙,吖啶橙,堿性橙14,3,6-雙(二甲基氨基)吖啶氯化鋅鹽,Acridineorange3-氯殺螨醇/三氯殺螨醇/2,2,2-三氯-1,1-雙(4-)乙醇/開樂散/1,1-二(對)-2,2,2-三氯乙醇/4,4`-二氯-α(三氯甲基)二苯基甲醇/1,1-雙(4-)-2,2,2-三氯乙醇/Dicofol分析標準品100毫克115-32-22~8℃,避光標準溶液,10ug/ml,u=6%1毫升3-氨基-1,2,4-三唑/3-氨基-1,2,4-三氮茂/3-氨基-1H-1,2,4-三唑/3-氨基-1H-1,2,4-三氮唑/3-氨基-1,2,4-三氮唑/氨基三唑/1,2,4-三唑基-3-胺/殺草強/3-氨基-1,2,4-三氮雜茂/3-ATBR,98%25克61-82-5RT100克500克阿特拉津/莠去津/蓋薩林/2-氯-4-乙氨基-6-異丙氨基-1,3,5-三嗪/6-氯-N-乙基-N'-(1-甲基乙基)-1,3,5-三嗪-2,3-二胺/2-氯-4-乙基胺-6-異丙胺-s-三嗪/2-氯-4-乙胺基-6-異丙胺基-均三氮苯/6-氯-N2-乙基-N4-異丙基-1,3,5-三嗪-2,4-二胺/AtrazineBR,97%5克1912-24-9RT分析標準品250毫克除草劑/Basta高純100毫升RT萎銹靈/5,6-二氫-2-甲基-N-苯基-1,4-氧硫雜環(huán)己烯-3-甲酰胺/5,6-二氫-2-甲基-1,4-氧硫雜芑-3-甲酰苯胺/2,3-二氫-5-(N-甲酰苯胺)-6-甲基-1,4-氧硫雜芑/5,6-二氫-3-甲基-1,4-氧硫雜芑-2-甲酰替苯胺/CarboxinBR,97%100克5234-68-4RT氯磺隆/3-(4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三嗪-2-基)-1-(2-)磺酰脲/綠黃隆/1-(2-磺酰)3-(4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三嗪-2-基)脲/2-氯-N-(4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-均三嗪-2-基氨基羰基)苯磺酸胺/Carboxin分析標準品,92%100毫克64902-72-3RT利波腺苷/異戊烯基腺嘌呤核苷/6-(γ,γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤核苷/2iPRibosideBR,98%100毫克7724-76-7保存:-20℃氟啶酮/1-甲基-3-苯基-5-(3-三氟甲基苯基)-4(1H)-吡啶酮/氟定酮/氟啶草酮/氟草酮/Fluridone分析標準品250毫克59756-60-4RT呋嘧醇/2-甲基-1-嘧啶-5-基-1-(4-三氟甲氧基苯基)丙-1-醇/氟嘧醇/Flurprimidol分析標準品,99%100毫克56425-91-3RTCAS:10127-02-3,丫啶橙,吖啶橙,堿性橙14,3,6-雙(二甲基氨基)吖啶氯化鋅鹽,Acridineorange[詳細]
-
2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
-
活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
-
2015-04-23 00:00
產(chǎn)品樣冊
-
細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細胞DNA損傷彗星(Comet)完全熒光檢測試劑是一種旨在采用動物細胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動尾巴,來進行體外評價和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于新鮮動物細胞的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復等,應用于環(huán)境和藥物毒理學、放射學、氧化應急反應等研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復一致。技術背景彗星檢測技術(Cometassay),又稱為單細胞凝膠電泳檢測技術(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細胞染色體為“頭",而松散和斷裂的DNA為“尾",以此評價DNA損傷程度。這是分析單一細胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術方法的基本步驟是:**,細胞固定包埋在凝膠里;第二,細胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進行體外檢測,成為細胞DNA損傷研究的基本手段。[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)-完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒
- 活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑是一種旨在通過吖啶橙吸收和細胞內(nèi)再分布檢測技術,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,即存在于或由溶酶體釋放到細胞漿的熒光染料的不同熒光強度變化,來分析和觀察溶酶體膜通透性的權(quán)威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞溶酶體(動物、人體、昆蟲等)膜通透性的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術背景溶酶體(lysosome)是一種動態(tài)性的、多態(tài)性的、含有水解酶的細胞器,具有接受和降解來自于分泌性、內(nèi)吞性(endocytic)、自噬性(autophagic)、吞噬性(phagocytic)膜運轉(zhuǎn)通路中的大分子。其功能是膜依賴性,具有和防御作用。溶酶體膜是溶酶體內(nèi)基質(zhì)和胞漿之間的生理屏障,為整合性糖蛋白,防止細胞自我降解。一旦溶酶體膜去穩(wěn)定(destabilization),例如堿性化或內(nèi)容物移位(translocation),將導致質(zhì)子和水解酶外漏,而造成細胞器功能異常,進而產(chǎn)生細胞壞死、凋亡,以及病理癥狀,例如朊病毒腦病(prionencephalopathies)、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰質(zhì)炎病毒感染、補體激活型肺損傷(complementactivation-producedlunginjury)、急性組織損傷等疾病。其中膜通透性增加,是溶酶體膜去穩(wěn)定性或去完整性的標志之一,溶酶體內(nèi)容物大量釋放到胞漿中,直接影響細胞的存活。吖啶橙(acridineorange;AO)是一種親溶酶體(lysomotropic)異染性(metachromatic)的熒光染料,在完整的溶酶體內(nèi),為質(zhì)子化(protonated)寡聚體(oligomeric)形式,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm),而在胞漿內(nèi),為單體去質(zhì)子化形式,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm)。吖啶橙進入溶酶體后重新分布,即吸收和細胞內(nèi)再分布(uptakeandredistribution),用于分析溶酶體膜通透性狀況。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升染色液(ReagentB)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備24孔細胞培養(yǎng)板:用于貼壁細胞染色的容器1.5毫升離心管:用于細胞染色的容器微型臺式離心機:用于沉淀細胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于細胞熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標儀:用于細胞熒光定量分析細胞流式儀:用于細胞熒光分析實驗步驟貼壁細胞染色準備1個細胞培養(yǎng)24孔板的待測細胞(注意:可以使用載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm培養(yǎng)皿,和其它培養(yǎng)孔板,見注意事項8)小心抽去細胞培養(yǎng)液小心沿著孔壁加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA)到1個細胞培養(yǎng)孔,覆蓋培養(yǎng)孔表面小心抽去清理液小心沿著孔壁加入xx微升染色液(ReagentB)到1個細胞培養(yǎng)孔,覆蓋培養(yǎng)孔表面放進37℃細胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照小心抽去染色液(ReagentB)小心沿著孔壁加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA)到細胞培養(yǎng)孔小心抽去清理液重復實驗步驟8和9一次小心沿著孔壁加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA)到細胞培養(yǎng)孔選擇下列方式之一進行操作:(A)使用倒置熒光顯微鏡觀察(定性檢測):激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――綠色熒光增強,表明膜通透性(LMP)增強激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――紅色熒光減弱,表明膜通透性(LMP)增強使用熒光分光光度儀或熒光酶標儀檢測(定量檢測):激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――RFU升高,表明膜通透性(LMP)增強激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――RFU降低,表明膜通透性(LMP)增強懸浮細胞或脫離細胞染色將懸浮細胞或脫離細胞(1X106細胞)移入到1.5毫升離心管放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA),混勻細胞顆粒群放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA),混勻細胞顆粒群加入xx微升含有染色液(ReagentB),充分混勻放進37℃細胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA),混勻細胞顆粒群放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液重復實驗步驟12至14一次加入xx微升37℃預熱的清理液(ReagentA),混勻細胞顆粒群選擇下列方式之一進行操作:進行細胞流式儀分析:FL1(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長528nm),或FL3(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm)觀察10000個細胞以上――FL1:波峰右移,表明膜通透性(LMP)增強FL3:波峰左移,表明膜通透性(LMP)增強或使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):1)移取10微升上述細胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――綠色熒光增強,表明膜通透性(LMP)增強激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――紅色熒光減弱,表明膜通透性(LMP)增強或使用熒光分光光度儀檢測(定量檢測):1)移取500微升上述細胞懸液到1毫升比色杯2)加入xx微升清理液(ReagentA)3)上下傾倒混勻數(shù)次4)放進熒光分光光度儀:激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――RFU升高,表明膜通透性(LMP)增強激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――RFU降低,表明膜通透性(LMP)增強注意事項本產(chǎn)品為20次(0.5毫升體系/次)操作操作時,須戴手套操作時,避免污染母液建議細胞染色完成后,即刻進行熒光檢測分析孵育時,必須避免光照本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細胞:載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm培養(yǎng)皿,和各種培養(yǎng)孔板,須相應調(diào)整處理液:操作容器建議操作體系載玻片100微升載玻片培養(yǎng)皿1毫升35mm培養(yǎng)皿1毫升96孔培養(yǎng)板100微升48孔培養(yǎng)板200微升24孔培養(yǎng)板500微升12孔培養(yǎng)板1毫升6孔培養(yǎng)板2毫升25cm2細胞培養(yǎng)瓶3毫升可以使用綠色熒光中激發(fā)波長490nm±20,散發(fā)波長528±38;紅色熒光中激發(fā)波長555±28,散發(fā)波長617±50用戶可以持續(xù)讀數(shù)5分鐘,觀察熒光讀數(shù)的增強或減低,以表明熒光染料的移位變化本公司提供系列溶酶體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒
- 主要用途活體細胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑是一種旨在通過吖啶橙吸收和細胞內(nèi)再分布檢測技術,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,即存在于或由溶酶體釋放到細胞漿的熒光染料的不同熒光強度變化,來分析和觀察溶酶體膜通透性的權(quán)威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞溶酶體(動物、人體、昆蟲等)膜通透性的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術背景溶酶體(lysosome)是一種動態(tài)性的、多態(tài)性的、含有水解酶的細胞器,具有接受和降解來自于分泌性、內(nèi)吞性(endocytic)、自噬性(autophagic)、吞噬性(phagocytic)膜運轉(zhuǎn)通路中的大分子。其功能是膜依賴性,具有和防御作用。溶酶體膜是溶酶體內(nèi)基質(zhì)和胞漿之間的生理屏障,為整合性糖蛋白,防止細胞自我降解。一旦溶酶體膜去穩(wěn)定(destabilization),例如堿性化或內(nèi)容物移位(translocation),將導致質(zhì)子和水解酶外漏,而造成細胞器功能異常,進而產(chǎn)生細胞壞死、凋亡,以及病理癥狀,例如朊病毒腦?。╬rionencephalopathies)、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰質(zhì)炎病毒感染、補體激活型肺損傷(complementactivation-producedlunginjury)、急性組織損傷等疾病。其中膜通透性增加,是溶酶體膜去穩(wěn)定性或去完整性的標志之一,溶酶體內(nèi)容物大量釋放到胞漿中,直接影響細胞的存活。吖啶橙(acridineorange;AO)是一種親溶酶體(lysomotropic)異染性(metachromatic)的熒光染料,在完整的溶酶體內(nèi),為質(zhì)子化(protonated)寡聚體(oligomeric)形式,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm),而在胞漿內(nèi),為單體去質(zhì)子化形式,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm)。吖啶橙進入溶酶體后重新分布,即吸收和細胞內(nèi)再分布(uptakeandredistribution),用于分析溶酶體膜通透性狀況。[詳細]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
-
2015-05-12 00:00
選購指南
-
精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒說明書
- 精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒操作注意事項1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。精子蛋白17(Sp17)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlT4兔子甲狀腺素規(guī)格:48T/96TTIMP-1兔子基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1規(guī)格:48T/96TMMP-9兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9規(guī)格:48T/96TMMP-5兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5規(guī)格:48T/96TMMP-4兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4規(guī)格:48T/96TMMP-3兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3規(guī)格:48T/96TCr兔子骨膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96TT兔子睪酮規(guī)格:48T/96THGF兔子肝細胞生長因子規(guī)格:48T/96TTE兔子端粒酶規(guī)格:48T/96TCETP兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格:48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF兔子單核細胞趨化蛋白1規(guī)格:48T/96TPRL兔子催乳素規(guī)格:48T/96T[詳細]
-
2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
DigiSEP Orange樣本
- DigiSEP Orange樣本[詳細]
-
2024-09-29 18:59
選購指南
-
熒光指示劑 吖啶橙|價格
- 10127-02-3吖啶橙促銷產(chǎn)品簡介AcridineOrange吖啶橙產(chǎn)品編號規(guī)格價格A8120-11g50.00A8120-55g240.00A8120-2525g700.00說明:腫瘤細胞和細菌的染色;熒光指示劑,用于檢測瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠中的核酸。別名:3,6-Bis(dimethylamino)acridinehydrochloridezincchloridedoublesalt;3,6-Bis(dimethylamino)acridiniumchloridehemi(zincchloridesalt);BasicOrange14分子式:C17H20ClN3HCl1/2ZnCl2分子量:369.96CAS#:10127-02-3外觀:橙紅色粉末特性:組成:染料含量,~80%溶解性:溶于水,參考濃度1mg/ml。儲存條件:室溫干燥保存FromSigmaA601410127-02-3吖啶橙促銷特價促銷5g240元熱線電話【021-54100800】其他產(chǎn)品附錄:CAS號貨號solarbio品名產(chǎn)地規(guī)格S0083槲皮素標準品solarbio20mg146-68-9I8150碘硝基氯化四氮唑藍(INT)進分250mg79-14-1G8840羥基乙酸glycolicacid進分100g134-03-2S9440Sodiumascorbate抗壞血酸鈉solarbio25g13573-16-5R8160Reineckesalt雷氏鹽(利英納克鹽)solarbio25g120-72-9I8190Indole吲哚solarbio10G1465-25-4N8320N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽solarbio5G6409-77-4C8850Nuclearfastred核固紅進分5G60-92-4C8860cAMP環(huán)磷酸腺苷solarbio1G259962L8100水解乳蛋白BactoTMTCLactalbuminHydrolysateBD500g259962L8100水解乳蛋白BactoTMTCLactalbuminHydrolysateBD100G620-45-1D87102.6-Dichorophenoindophenol,Na2.6二氯酚靛酚鈉alfa1G148-24-3H82608-Hydroxyquinoline8-羥基喹啉Solarbio25g68157-60-8F8080-1Forchiorfennron氯吡苯脲(KT-30cppu)國產(chǎn)1G51-21-80597F83005-Fluoro-2'-Deoxyuridine5-氟尿嘧啶amresco1G12771-68-9431Ancymidol環(huán)丙嘧啶醇Sigma原裝25MG153-18-4R8170Rutinhydrate蕓香葉苷(蘆丁)國產(chǎn)25G6151-25-3Q8010Meletin或Sophretin.槲皮素國產(chǎn)10G7761-88-8S8480Silvernitrate硝酸銀國產(chǎn)10G102129-65-7A8760ADPG腺苷二磷酸葡萄糖sigma10MG21931-53-3U81005-UDP(尿苷-5-二磷酸)solarbio100MG28053-08-9U4625U8080UDPG尿苷5-二磷酸葡萄糖二鈉sigma100MG100684-32-0M0630M8090Myoglobin肌球蛋白(肌紅蛋白)sigma100mg9007-83-4G5009G8410V-Globulinsfrombovinebloodv-球蛋白sigma1g9010-66-6Z3625Z8010Zein玉米蛋白sigma25gXAD7AmberliteXAD7HP吸附樹脂(20-60目)sigma100g優(yōu)質(zhì)試劑質(zhì)量放心價格Zdi為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD[詳細]
-
2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書
- 病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書[詳細]
-
2016-05-25 00:00
操作手冊
-
人抗雙鏈DNA /天然DNA (dsDNA)試劑盒說明書
- 檢測范圍:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)水平。用純化的人抗雙鏈DNA/天然DNA(dsDNA)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA),再與HRP標記的人抗雙鏈DNA/天然DNA(dsDNA)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細]
-
2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
人抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒
- 人抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-06 00:00
其它
-
大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒
- 大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒[詳細]
-
2015-04-13 00:00
安裝說明
-
大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒
- 大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-30 09:02
期刊論文
-
病毒基因組提取試劑盒(DNA/RNA)說明書
- 病毒基因組提取試劑盒(DNA/RNA)說明書[詳細]
-
2016-05-25 00:00
產(chǎn)品樣冊
-
糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書
- 糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途糞便DNA高質(zhì)純化試劑是一種旨在經(jīng)過標準分離法以后,由糞便(人體、動物等)中分離獲得的DNA,進行二度親和純化,Zda限度地去除復雜又難以去除的蛋白、金屬成分、雜質(zhì)等非核酸類物質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其應用于即時PCR、RLPF分析、測序、雜交、遺傳鑒定、突變分析、性別鑒定、司法鑒定等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡單,純度出色,重復性好,堪稱國際上同類產(chǎn)品**。技術背景糞便中含有許多污染成分,降解DNA和YZPCR反應。針對標準處理無法有效地去除頑固干擾因子的情況下,運用特殊親和技術,達到高度純化的效果。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)2毫升親和液(ReagentJ)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于DNA純化操作的容器微型臺式離心機(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反應物恒溫水槽:用于孵育反應物實驗步驟1.準備好從1克糞便樣品分離的DNA產(chǎn)物(100微克DNA總量)2.移入到1.5毫升離心管3.加入適量的緩沖液(ReagentA)到總?cè)萘繛?00微升4.加入100微升親和液(ReagentB)(注意:使用前,先搖勻沉淀的親和液(ReagentB))5.用手充分混勻6.放進56℃恒溫水槽孵育30分鐘,期間用手混勻一次7.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升離心管9.移出適量DNA溶液進行后續(xù)PCR反應或保存在-20℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為20次(1克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作或50次(200毫克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作2.操作時,須戴手套3.根據(jù)用戶樣品量大小,相應調(diào)整試劑用量4.親和液(ReagentB)使用前,須搖勻5.建議使用糞便DNA分離試劑盒(HL20011.1)作為標準分離法操作6.本公司提供系列糞便核酸純化試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純度優(yōu)異[詳細]
-
2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書
- 植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
-
2024-09-28 00:05
期刊論文
-
胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
-
2014-12-26 00:00
期刊論文
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進行復制
參與評論
登錄后參與評論