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通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑盒(中文版說明書)
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本文由 上海銘博生物科技有限公司 整理匯編
2018-11-08 10:00 892閱讀次數(shù)
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通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑是一種旨在采用組織細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場(chǎng)環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞、組織、血液、等樣品的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡(jiǎn)便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測(cè)技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場(chǎng)的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭”,而松散和斷裂的DNA為“尾”,以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測(cè),成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測(cè)的敏感程度。堿性電泳(alkalineelectrophoresis)為常規(guī)電泳檢測(cè),可以檢測(cè)單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無嘌呤核酸位點(diǎn)(apurinicsite)和無嘧啶核酸位點(diǎn)(apyrimidicsite)、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物(alkali-labileDNAadduct)等DNA損傷。
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通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑盒(中文版說明書)
- 通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑是一種旨在采用組織細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場(chǎng)環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞、組織、血液、等樣品的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡(jiǎn)便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測(cè)技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場(chǎng)的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭”,而松散和斷裂的DNA為“尾”,以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測(cè),成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測(cè)的敏感程度。堿性電泳(alkalineelectrophoresis)為常規(guī)電泳檢測(cè),可以檢測(cè)單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無嘌呤核酸位點(diǎn)(apurinicsite)和無嘧啶核酸位點(diǎn)(apyrimidicsite)、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物(alkali-labileDNAadduct)等DNA損傷。[詳細(xì)]
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活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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大鼠(Rat)腎損傷分子(KIM-1) ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書
- 大鼠(Rat)腎損傷分子(KIM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗(yàn)原理:KIM-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知KIM-1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將KIM-1和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中KIM-1的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗KIM-1抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:800pg/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的KIM-1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的KIM-1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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Z新DNA損傷檢測(cè)法——應(yīng)用ImageXpress Nano成像分析系統(tǒng)
- 本文詳細(xì)介紹了自動(dòng)細(xì)胞成像檢測(cè)DNA損傷的實(shí)驗(yàn)方法,細(xì)胞樣品由小分子化合物處理,經(jīng)過磷酸化組蛋白H2AX免疫熒光染色后成像。另外,實(shí)驗(yàn)中選用了三種細(xì)胞系,CHO、Hela和PC-12,分別加入絲裂霉素和依托泊苷進(jìn)行處理來檢測(cè)化合物對(duì)其的影響。[詳細(xì)]
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2024-09-12 16:05
應(yīng)用文章
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植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過鈣離子特異性熒光探針Fluo-4,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4,一種與鈣離子結(jié)合,其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針,可以敏感測(cè)定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)485nm,散發(fā)波長(zhǎng)520nm,來定量測(cè)定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升反應(yīng)液(ReagentC)6毫升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentC)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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COMPAC-50_彗星試驗(yàn)箱
- COMPAC-50_彗星試驗(yàn)箱[詳細(xì)]
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2014-11-17 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書
- 病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書[詳細(xì)]
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2016-05-25 00:00
操作手冊(cè)
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