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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-05-04 00:00 283閱讀次數(shù)
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-09-15 00:00
產(chǎn)品樣冊
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-05-04 00:00
課件
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通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒(中文版說明書)
- 通用型DNA損傷彗星檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途通用型DNA損傷彗星檢測試劑是一種旨在采用組織細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動尾巴,來進行體外評價和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于新鮮動物細(xì)胞、組織、血液、等樣品的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭”,而松散和斷裂的DNA為“尾”,以此評價DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進行體外檢測,成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。其中電泳條件將決定檢測的敏感程度。堿性電泳(alkalineelectrophoresis)為常規(guī)電泳檢測,可以檢測單鏈DNA斷裂、雙鏈DNA斷裂、大部分無嘌呤核酸位點(apurinicsite)和無嘧啶核酸位點(apyrimidicsite)、堿不穩(wěn)定DNA結(jié)合物(alkali-labileDNAadduct)等DNA損傷。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細(xì)胞DNA損傷彗星(Comet)完全熒光檢測試劑是一種旨在采用動物細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動尾巴,來進行體外評價和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于新鮮動物細(xì)胞的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭",而松散和斷裂的DNA為“尾",以此評價DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進行體外檢測,成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-12 00:00
選購指南
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損傷分子說明書試劑盒檢測說明
- 損傷分子說明書試劑盒檢測說明本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T2ng/L-80ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腎損傷分子-1(Kim-1)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人腎損傷分子-1(Kim-1)水平。用純化的人腎損傷分子-1(Kim-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腎損傷分子-1(Kim-1),再與HRP標(biāo)記的腎損傷分子-1(Kim-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎損傷分子-1(Kim-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人腎損傷分子-1(Kim-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:03
產(chǎn)品樣冊
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高通量RNA干擾技術(shù)篩選DNA損傷
- 本文我們列舉了如何通過對磷酸化的組蛋白H2AX和DNA進行免疫熒光雙色分析方法來檢測DNA損傷。組蛋白H2AX在絲氨酸139位點的磷酸化被認(rèn)為是藥物或輻射造成的DNA損傷的敏感標(biāo)記。文中也闡明了我們利用RNAi對雙色標(biāo)定DNA損傷分析是一個敏感和快速的自動化過程,而且這種方法被證明可以有效發(fā)現(xiàn)新的目標(biāo)。[詳細(xì)]
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2021-02-19 13:46
應(yīng)用文章
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通用型LAMP試劑盒使用說明書
- 通用型LAMP試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2015-04-21 00:00
報價單
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精子DNA吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光,確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運動能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評價是精子分析的重要指標(biāo),也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙(Acridineorange;AO)染色技術(shù),是精子染色質(zhì)分析和授精效率評價的Z常用的方法。基于正常精子細(xì)胞的染色質(zhì)完整性和DNA雙鏈特性,作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA,即雙鏈DNA嵌合(intercalate)時,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長530nm);而與變性DNA,即單鏈DNA結(jié)合時,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm),以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升固著液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;染色液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺式離心機:用于樣品操作血細(xì)胞計數(shù)器:用于細(xì)胞計數(shù)載玻片和蓋玻片:用于精子細(xì)胞爬片(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察染色的精子細(xì)胞細(xì)胞流式儀:用于分析染色的精子細(xì)胞實驗步驟一、細(xì)胞流式儀分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細(xì)胞計數(shù)器上進行精子細(xì)胞計數(shù):1×107精子細(xì)胞/毫升6.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實驗步驟4至7一次(不包括實驗步驟5)9.加入xx微升染色液(ReagentB),混勻顆粒群10.室溫下孵育10分鐘,避免光照11.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g12.小心抽去上清液13.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群14.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g15.小心抽去上清液16.重復(fù)實驗步驟13至15一次17.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群18.即刻進行細(xì)胞流式儀雙通道分析:觀察10000個細(xì)胞以上,200細(xì)胞/秒;激發(fā)波長200mW,散發(fā)波長16mW激發(fā)波長488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素(FITC)藻紅蛋白(phycoerythrin;PE)熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長530630流式儀通道FL1FL3熒光增強正常精子DNA異常精子DNA19.細(xì)胞流式儀檢測正常精子DNA(雙鏈DNA)參考圖像如下(X軸:FL3;Y軸:FL1;R1左下角為細(xì)胞碎屑;R2為正常精子細(xì)胞;R3為異常精子細(xì)胞;R4為未成熟精子細(xì)胞)二、熒光顯微鏡分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細(xì)胞計數(shù)器上進行精子細(xì)胞計數(shù):1×107精子細(xì)胞/毫升6.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實驗步驟4至7一次(不包括實驗步驟5)9.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群10.即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11.用蓋玻片或另一個載玻片推片12.置于空氣中涼干13.加上xx微升固著液(ReagentB),覆蓋樣品表面14.室溫下孵育2小時15.小心抽去固著液16.小心加上xx微升染色液(ReagentC),覆蓋樣品表面17.室溫下孵育5分鐘,避免光照18.小心抽去染色液19.小心加上xx微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面20.小心抽去清理液21.蓋上蓋玻片22.即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下觀察并計數(shù)(注意:每個視野計數(shù)200個精子)23.分析結(jié)果(參考圖)觀察紅色熒光:濾波器激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長630nm――可見黃色、桔紅色至紅色熒光,表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光:濾波器激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長530nm――可見綠色熒光,表明精子DNA正常注意事項1.本產(chǎn)品為50次操作2.操作時須戴手套3.樣品檢測前,建議在血細(xì)胞計數(shù)器上進行精子細(xì)胞計數(shù)4.精子細(xì)胞計數(shù)時乘上稀釋倍數(shù)104。標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計數(shù)器(Hemocytometer)的計算方法是:1毫米方塊的細(xì)胞計數(shù)X104(稀釋倍數(shù))=實際細(xì)胞數(shù)/毫升5.染色完成后,即刻進行檢測分析,否則由于其毒性導(dǎo)致精子DNA異常6.如果流式細(xì)胞儀出現(xiàn)干擾,建議使用630nm散發(fā)波長,或進行補償處理,建議使用誘導(dǎo)處理樣品:10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7.本產(chǎn)品常用于凍存精子細(xì)胞的檢測分析8.本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析(SpermChromatinStructureAssay;SCSA),分析參數(shù)如下:%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計算方法紅色熒光:紅色+綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人:小于15%正常人:小于10%閾值:小于30%閾值:小于15%高生育力:0-15%中等生育力:16-27%低或差生育力:27-30%參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9.本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書
- 糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途糞便DNA高質(zhì)純化試劑是一種旨在經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)分離法以后,由糞便(人體、動物等)中分離獲得的DNA,進行二度親和純化,Zda限度地去除復(fù)雜又難以去除的蛋白、金屬成分、雜質(zhì)等非核酸類物質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其應(yīng)用于即時PCR、RLPF分析、測序、雜交、遺傳鑒定、突變分析、性別鑒定、司法鑒定等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡單,純度出色,重復(fù)性好,堪稱國際上同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景糞便中含有許多污染成分,降解DNA和YZPCR反應(yīng)。針對標(biāo)準(zhǔn)處理無法有效地去除頑固干擾因子的情況下,運用特殊親和技術(shù),達到高度純化的效果。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)2毫升親和液(ReagentJ)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于DNA純化操作的容器微型臺式離心機(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反應(yīng)物恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟1.準(zhǔn)備好從1克糞便樣品分離的DNA產(chǎn)物(100微克DNA總量)2.移入到1.5毫升離心管3.加入適量的緩沖液(ReagentA)到總?cè)萘繛?00微升4.加入100微升親和液(ReagentB)(注意:使用前,先搖勻沉淀的親和液(ReagentB))5.用手充分混勻6.放進56℃恒溫水槽孵育30分鐘,期間用手混勻一次7.放進微型臺式離心機離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升離心管9.移出適量DNA溶液進行后續(xù)PCR反應(yīng)或保存在-20℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為20次(1克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作或50次(200毫克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作2.操作時,須戴手套3.根據(jù)用戶樣品量大小,相應(yīng)調(diào)整試劑用量4.親和液(ReagentB)使用前,須搖勻5.建議使用糞便DNA分離試劑盒(HL20011.1)作為標(biāo)準(zhǔn)分離法操作6.本公司提供系列糞便核酸純化試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純度優(yōu)異[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書
- 植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:05
期刊論文
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大鼠(Rat)腎損傷分子(KIM-1) ELISA 檢測試劑盒說明書
- 大鼠(Rat)腎損傷分子(KIM-1)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗原理:KIM-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知KIM-1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將KIM-1和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中KIM-1的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗KIM-1抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800pg/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的KIM-1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的KIM-1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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2024-09-28 00:08
期刊論文
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Z新DNA損傷檢測法——應(yīng)用ImageXpress Nano成像分析系統(tǒng)
- 本文詳細(xì)介紹了自動細(xì)胞成像檢測DNA損傷的實驗方法,細(xì)胞樣品由小分子化合物處理,經(jīng)過磷酸化組蛋白H2AX免疫熒光染色后成像。另外,實驗中選用了三種細(xì)胞系,CHO、Hela和PC-12,分別加入絲裂霉素和依托泊苷進行處理來檢測化合物對其的影響。[詳細(xì)]
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2024-09-12 16:05
應(yīng)用文章
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2024-09-28 21:32
選購指南
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2014-11-17 00:00
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病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書
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2016-05-25 00:00
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人抗雙鏈DNA /天然DNA (dsDNA)試劑盒說明書
- 檢測范圍:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)水平。用純化的人抗雙鏈DNA/天然DNA(dsDNA)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA),再與HRP標(biāo)記的人抗雙鏈DNA/天然DNA(dsDNA)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠腎損傷分子1(Kim-1)檢測試劑盒
- 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 13:51
期刊論文
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人腎損傷分子(Kim-1)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人腎損傷分子(Kim-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Kim-1單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Kim-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Kim-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,Kim-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Kim-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):50ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋20倍)。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。尿液不做稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成100ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入100ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品10000、5000、2500、1250、625、312、156、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Kim-1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Kim-1檢測濃度小于80pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Kim-1。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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