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• 人表皮生長因子(EGF)說明書

  人表皮生長因子(EGF)說明書[詳細]

  2024-09-15 18:08

  實驗操作

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• 人表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒說明書

  人表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人EGF單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的EGF與單抗結合，加入生物素化的抗人EGF，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，EGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中EGF濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預實驗,以確定稀釋倍數。尿液至少20倍稀釋（取10ul，加標本稀釋液190ul,稀釋20倍）。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應EGF含量，再乘上稀釋倍數即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EGF檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人EGF。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產品樣冊

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• 人表皮生長因子（EGF）試劑盒（ELISA）說明書

  人表皮生長因子（EGF）試劑盒（ELISA）使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人表皮生長因子（EGF）的含量。l有效期：6個月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人表皮生長因子（EGF）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人表皮生長因子（EGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。3.組織勻漿：用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。注：標本溶血會影響Z后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。2.實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態(tài)、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注：1.標準品濃度依次為：480、240、120、60、30、0pg/mL2.經過大量正常標本檢驗，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時，可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。注意事項嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。不能使用過期產品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍：15pg/mL480pg/mL。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于1.0pg/mL。3.特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性：板內變異系數小于10%，板間變異系數小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產品可能存在一定的質量技術風險。2.Z終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關，請務必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據試劑盒內說明書進行實驗操作，網站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結果。問題解答若實驗效果不好，請及時對顯色結果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后聯(lián)系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料：問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器，極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物，顏色應迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數時間讀數在說明書推薦的讀數時間內讀數樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本，使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本，重復實驗[詳細]

  2018-11-16 10:02

  產品樣冊

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• 人表皮生長因子(EGF)elisa試劑盒說明書

  人表皮生長因子(EGF)elisa試劑盒說明書[詳細]

  2024-10-08 05:27

  專利

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• 大鼠表皮生長因子（EGF）說明書

  www.biokanu.com大鼠表皮生長因子（EGF）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關液體樣本中表皮生長因子（EGF）的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠表皮生長因子（EGF）水平。用純化的大鼠表皮生長因子（EGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子（EGF）,再與HRP標記的EGF抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子（EGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠表皮生長因子（EGF）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：5400ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為3600ng/L，2400ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L）。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15%檢測范圍：200ng/L-4000ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-22 10:00

  產品樣冊

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• 人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒

  人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2014-08-21 00:00

  報價單

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• 人表皮生長因子（EGF）試劑盒使用方法

  檢測范圍：96T25pg/ml-480pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本表皮生長因子(EGF)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人表皮生長因子(EGF)水平。用純化的人表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子(EGF)，再與HRP標記的表皮生長因子(EGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子(EGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人表皮生長因子(EGF)濃度。[詳細]

  2018-10-01 10:00

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• 人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒

  人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-28 12:33

  期刊論文

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• 人表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒

  人表皮生長因子（EGF）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中人表皮生長因子（EGF）含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人表皮生長因子（EGF）水平。用純化的人表皮生長因子（EGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子（EGF），再與HRP標記的表皮生長因子（EGF）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子（EGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人表皮生長因子（EGF）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟：1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-29 03:17

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• 人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒

  人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-29 12:13

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• 人表皮生長因子受體（EGF R）ELISA試劑盒說明書

  人表皮生長因子受體（EGFR）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人EGFR單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的EGFR與單抗結合，加入生物素化的抗人EGFR，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，EGFR濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中EGFR濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：200ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預實驗,以確定稀釋倍數。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成200ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入200ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應EGFR含量，再乘上稀釋倍數即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EGFR檢測濃度小于0.16ng/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人EGFR。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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• 人表皮生長因子（EGF）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  人表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中表皮生長因子(EGF)表達。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人表皮生長因子(EGF)表達。用純化的人表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中表皮生長因子(EGF)相結合，經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的表皮生長因子(EGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中人表皮生長因子(EGF)的存在與否。人表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。人表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結：計算和結果判定：試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值（CUTOFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUTOFF）者為表皮生長因子(EGF)陰性陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUTOFF）者為表皮生長因子(EGF)陽性。注意事項1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物請避光保存。6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。人表皮生長因子(EGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• 小鼠表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒說明書

  小鼠表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠EGF單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的EGF與單抗結合，加入生物素化的抗小鼠EGF，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，EGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中EGF濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應EGF含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EGF檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的小鼠EGF。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• 大鼠表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網址：http://www.westang.com大鼠表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠EGF單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的EGF與單抗結合，加入生物素化的抗大鼠EGF，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，EGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中EGF濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預實驗,以確定稀釋倍數。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應EGF含量，再乘上稀釋倍數即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EGF檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的大鼠EGF。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• 兔表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒說明書

  兔表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定兔血清，血漿及相關液體樣本中兔表皮生長因子(EGF)的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔表皮生長因子(EGF)水平。用純化的兔表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子(EGF)再與HRP標記的表皮生長因子(EGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子(EGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中兔表皮生長因子(EGF)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：450ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為300ng/L,200ng/L,100ng/L,50ng/L,25ng/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：15ng/L-350ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

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• 豬表皮生長因子（EGF）試劑盒使用說明書

  　　　　豬表皮生長因子（EGF）試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：48T20pg/ml-480pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本表皮生長因子（EGF）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬表皮生長因子（EGF）水平。用純化的豬表皮生長因子（EGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子（EGF），再與HRP標記的表皮生長因子（EGF）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子（EGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中豬表皮生長因子（EGF）濃度。試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標試劑3ml×1瓶8標準品（960pg/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×4條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。豬表皮生長因子（EGF）試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。480pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液240pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液120pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液60pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液30pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。豬表皮生長因子（EGF）試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-16 10:02

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• 兔表皮生長因子（EGF）ELISA試劑盒使用說明書

  我司ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應，質量保證，價格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定兔血清，血漿及相關液體樣本中兔表皮生長因子(EGF)的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔表皮生長因子(EGF)水平。用純化的兔表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子(EGF)再與HRP標記的表皮生長因子(EGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子(EGF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中兔表皮生長因子(EGF)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：450ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為300ng/L,200ng/L,100ng/L,50ng/L,25ng/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：15ng/L-350ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

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• 大鼠表皮生長因子（EGF）ELISA檢測試劑盒說明書

  大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒試驗原理：EGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知EGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將EGF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中EGF的濃度呈比例關系。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒內容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：800pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗EGF抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：800pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的EGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的EGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2019-01-02 10:00

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  雞表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-13 00:00

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  豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒[詳細]

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