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• 免疫組化染色試劑盒說明書

  免疫組化染色試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2014-06-23 00:00

  課件

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• 即用型IL-1β免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型小鼠IL-1β免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號：QD82108試劑的保存：短期于4℃保存，長期于-20℃保存。工作原理IL-1β，白介素1β。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)過程中起ZX作用。類風(fēng)濕、結(jié)腸炎等病癥也和IL-1β的產(chǎn)生過多有關(guān)。IL-1α和IL-1β有25%的同源性。合成IL-1β的細(xì)胞很廣泛，包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形細(xì)胞、NK細(xì)胞、角化細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。兩者合成時(shí)都是31KDa的前體，經(jīng)剪切后成為17.5KDa的成熟蛋白質(zhì)。IL-1β前體在細(xì)胞內(nèi)合成，并無生物學(xué)活性。被IL-1β轉(zhuǎn)化酶（ICE）剪切為成熟形態(tài)后排出到細(xì)胞外。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。根據(jù)研究，SP（StreptAvidin-BiotinComplex）大約可形成上百個(gè)左右的過氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價(jià)1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗兔IgG。SP：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用SP稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗，37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）加生物素化二抗,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SP,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時(shí)間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng)：如果染色背景過高，在SP反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 即用型SABC免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型SABC免疫組化染色試劑盒大鼠IgG使用說明書產(chǎn)品編號：QD82102試劑的保存：短期4℃可保存，長期-20℃。工作原理S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究，SABC大約可形成上百個(gè)左右的過氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價(jià)1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗大鼠IgG。SABC：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。30%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗（大鼠IgG），37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）加生物素化抗大鼠IgG,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時(shí)間一般在3-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng)：如果染色背景過高，在SABC反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 即用型大鼠SP-A免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型SP-A免疫組化染色試劑盒大鼠IgG使用說明書產(chǎn)品編號：QD82105試劑的保存：短期于4℃保存，長期于-20℃保存。工作原理肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(pulmonarysurfactant-associatedproteinA,SP-A)是肺表面活性物質(zhì)(pulmonarysur-factant,PS)中含量Z豐富的蛋白成分,主要分布于支氣管表面和肺泡氣液界面上,屬C-型膠凝素家族的重要成員,在維持PS的正常生物學(xué)功能和調(diào)節(jié)局部免疫及炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮重要作用。S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究，SABC大約可形成上百個(gè)左右的過氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價(jià)1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗大鼠IgG。SABC：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗（大鼠IgG），37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）加生物素化抗大鼠IgG,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時(shí)間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng)：如果染色背景過高，在SABC反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 免疫組化試劑盒說明書

  免疫組化試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Dazl抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Dazl一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 即用型大鼠VEGF SP免疫組化染色試劑盒

  www.biokanu.com即用型大鼠VEGFSP免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號：QD82178試劑的保存：短期于4℃保存，長期于-20℃保存。工作原理血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是相對分子質(zhì)量為(34～45)×103的同源二聚體糖蛋白。人體內(nèi)可形成多種異構(gòu)體可以特異性地促進(jìn)血管內(nèi)皮有絲分裂的因子。VEGF是一種選擇性促內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原,它能增加血管通透能力,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖,對腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移有重要影響。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。根據(jù)研究，SP（StreptAvidin-BiotinComplex）大約可形成上百個(gè)左右的過氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容1.山羊血清封閉液：1ml(效價(jià)1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。2.二抗：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗兔IgG。3.SP：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用SP稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：1.粘片劑APES或Poly-L-Lysine。2.0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。3.DAB顯色試劑盒。4.免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:1.載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。2.切片常規(guī)脫蠟至水。3.30%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。4.酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。5.滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。6.適當(dāng)稀釋的一抗，37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）7.加生物素化二抗,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。8.滴加試劑SP,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。9.DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時(shí)間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。10.蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng)：1.如果染色背景過高，在SP反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。2.熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。3.脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。4.如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。5.在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

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• 免疫組化試劑盒使用說明書

  上海哈靈生物科技有限公司免疫組化試劑盒使用說明書保存方法：2-8℃保存。有效期：一年。生產(chǎn)日期：見封口。工作原理：辣根過氧化物酶（HRP）的分子量（40000），它不會遮蓋抗原的結(jié)合部位，具有較高活性及特異性，可溶性佳，生成的產(chǎn)物不擴(kuò)散，可作用于多種底物，產(chǎn)生不同顏色且HRP穿透力強(qiáng)，易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。DAB在H2O2存在的情況下，可以作為HRP的電子供體，產(chǎn)生褐色的不溶顆粒，可作為顯色的試劑。試劑盒內(nèi)容：名稱規(guī)格10.01mol/LpH6.0枸櫞酸鹽緩沖液0.5L2PBS緩沖液1L3廣譜二抗1.5mL430%H2O25mL5DAB顯色液I0.3mL6DAB顯色液II0.3mL自備試劑：無水乙醇、蘇木素。操作步驟：1.60℃常規(guī)脫蠟至水后，將石蠟切片先后浸入二甲苯Ⅰ，二甲苯Ⅱ各10min。然后逐級降濃度酒精入水，每次3-5min。①無水酒精3－5min②90%酒精3－5min③85%酒精3－5min④75%酒精3－5min⑤PBS洗滌3次每次5min2.熱修復(fù)抗原：將切片置于0.01mol/LpH6.0枸櫞鈉緩沖液，微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10min后，反復(fù)1-2次，置于室溫自然冷卻。0.01mol/LpH7.0左右的PBS洗滌3次，每次5min3.消除內(nèi)源性過氧化物酶：用3%H2O2室溫孵育5-10min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗滌2-3次，每次5min；4.滴加一抗：滴加適當(dāng)稀釋的一抗到切片上，37℃孵育一定時(shí)間或者4℃隔天，pH7.4的PBS洗滌3次，每次5min。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）5.加入廣譜二抗，37℃孵育一段時(shí)間，取出后PBS洗滌3次，每次5min。6.DAB顯色：取DAB顯色液I及II各50微升加至入1mL的水中，配成DAB工作液，滴加到切片上，室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。蒸餾水充分洗滌以終止反應(yīng)。7..觀察顯色后自來水沖，蘇木精復(fù)染1-2min，，自來水沖10min，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，干燥，分析拍照[詳細(xì)]

  2024-10-08 14:03

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• 即用型（兔IgG）SABC免疫組化染色試劑盒 （2）

  www.biokanu.com即用型SABC免疫組化染色試劑盒兔IgG使用說明書產(chǎn)品編號：QD82102試劑的保存：短期4℃可保存，長期-20℃。工作原理S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，分子量47000。同親和素一樣，對生物素分子有極高的親和力，是一般抗原抗體親和力的一百萬倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（IP=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，IP=6.0~6.5，對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究，SABC大約可形成上百個(gè)左右的過氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性，低背景和操作簡便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測抗原的分布，本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片，培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液：1ml(效價(jià)1：10，臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體，標(biāo)記長臂生物素，生物素標(biāo)記抗兔IgG。SABC：1ml（效價(jià)1：10，臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍）。鏈酶親和素-過氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑：粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS，0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇：用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序，多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10分鐘后，反復(fù)1-2次。冷卻后PBS（pH7.2-7.6）洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗（兔IgG），37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）加生物素化抗兔IgG,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS（pH7.2-7.6）洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng)，時(shí)間一般在3-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)（陽性較強(qiáng)，背景較低），即可終止反應(yīng)（用蒸餾水洗滌切片）。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng)：如果染色背景過高，在SABC反應(yīng)之后，DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS（pH7.2-7.6）洗滌切片4次，單純PBS洗2次，然后DAB顯色。警告：DAB為可疑致癌物，請采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）；也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底，容易出現(xiàn)非特異性背景染色，建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片，需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低，因此不得使用過期的試劑盒，不同批號間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]

  2018-09-22 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 兔子說明書CD134 免疫組化試劑盒說明書

  兔子說明書CD134 免疫組化試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2016-07-06 00:00

  安裝說明

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• 小鼠IL-10 免疫組化試劑盒說明書

  小鼠IL-10免疫組化試劑盒說明書該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性IL-10抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的IL-10一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠IL-10免疫組化試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型IL-10一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：小鼠IL-10免疫組化試劑盒石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、小鼠IL-10免疫組化試劑盒直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-04 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細(xì)胞爬片的免疫組化染色的操作步驟

  細(xì)胞爬片的免疫組化染色的操作步驟[詳細(xì)]

  2013-11-11 00:00

  操作手冊

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• 冰凍切片的免疫組化染色操作步驟

  冰凍切片的免疫組化染色操作步驟1.新鮮組織立即在恒冷冰凍切片機(jī)內(nèi)切片（也可-80℃保存），厚度為5～6μm。2.載玻片可不打底，裱片后，立即用電吹風(fēng)吹干。3.如不馬上染色，可密封后-20℃保存。4.染色前用冷丙酮在4℃固定10-20分鐘。5.PBS洗2次，每次5分鐘，（必要時(shí)應(yīng)用0.1%檸檬酸鈉+0.1%triton打孔）6.3%H2O2滅活內(nèi)源性過氧化物酶，20分鐘，避光;7.用PBS洗2次，每次5分鐘;8.正常血清封閉：從染片缸中取出切片，擦凈切片背面水分及切片正面組織周圍的水分（保持組織呈濕潤狀態(tài),）滴加正常山羊或兔血清（與第二抗體同源動物血清）處理，37℃，15分鐘。附：正常血清配制（或按試劑盒規(guī)定的濃度配制）：按1:20比例，用PBS配制，每張切片需要量按50μ+5μl（10%拋灑量）計(jì)算。9.滴加**抗體：用濾紙吸去血清，不洗，直接滴加**抗體，37℃2小時(shí)（也可置于4℃冰箱過夜）。10.PBS：5分鐘，2次（置于搖床）。11.滴加生物素化的二抗，37℃，40分鐘。12.PBS：5分鐘，2次（置于搖床）。13.滴加三抗（SAB復(fù)合物），37℃，40分鐘。14.PBS：5分鐘，2次（置于搖床）。15.DAB顯色，鏡下觀察，適時(shí)終止（自來水沖終止）。附：DAB的配制①儲備液（DAB25mg/ml）的配制：DAB250mg+PBS10ml，待完全溶解后分裝成1ml，100μl，50μl，20μl等，-20℃，凍存。②工作液：DAB儲備液20μl+PBS1000μl+3%H2O25μl16.自來水（細(xì)水）充分沖洗。17.蘇木素復(fù)染，室溫，30秒，自來水沖洗。18.自來水沖洗返藍(lán)，15分鐘。19.梯度酒精脫水：80%，2分鐘95%，2分鐘1**%，2次，5分鐘。20.二甲苯透明：I，II（二甲苯）各5分鐘21.封片：加拿大樹膠（或中性樹膠）封片。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 做好免疫組化染色必須注意的問題

  做好免疫組化染色必須注意的問題[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:04

  專利

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• 人PR免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)說明書

  人PR免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性PR抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的PR一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型PR一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

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• CD90免疫組化試劑盒

  CD90免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD90抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD90一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型CD90一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-10-31 10:00

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• DAB染色試劑盒使用說明書

  DAB染色試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2015-04-21 00:00

  其它

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• 小鼠 Thy1 免疫組化試劑盒

  小鼠ELISA試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Thy1抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Thy1一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型Thy1一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附11：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

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• 人IL-29 免疫組化試劑盒

  該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性IL-29抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的IL-29一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。注：本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究。本步驟是根據(jù)我們長期實(shí)驗(yàn)得出的有效步驟，不一定是Zyou方法，請客戶根據(jù)具體科研實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化，并歡迎客戶和我們探討。[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:00

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• 高爾基體染色試劑盒說明書PK401A PK401

  FDRapidGolgiStainKit（small）fdneurotech是世界的染色試劑盒供應(yīng)商，其提供的高爾基體染色試劑盒以其高品質(zhì)的結(jié)果于科研界，光2012年列出來的引用文獻(xiàn)就多達(dá)70篇，2011年更是100多篇，fdneurotech從2012年開始就和上海起福生物科技公司簽訂長期合作協(xié)議為ZG科研人員帶來**的產(chǎn)品，并在ZG設(shè)有庫存，歡迎廣大科研工作者和我們公司聯(lián)系上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司上海市浦東繡川路561號1102室4006551678傳真:021-50724961WWW.QFBIO.COMPK401AFDRapidGolgiStainKit125mlFDNEUROTECHNOLOGIES6200PK401FDRapidGolgiStainKit250mlFDNEURO9800Golgi-Coximpregnation1,2hasbeenoneofthemosteffectivetechniquesforstudyingboththenormalandabnormalmorphologyofneuronsaswellasglia.UsingtheGolgitechnique,subtlemorphologicalalterationsinneuronaldendritesanddendriticspineshavebeendiscoveredinthebrainsofanimalstreatedwithdrugsaswellasinthepostmortembrainsofpatientswithneurologicaldiseases3,4.However,theunreliabilityandthetime-consumingprocessofGolgistaininghavebeenmajorobstaclestothewidespreadapplicationofthistechniqueFDRapidGolgiStainKitisdesignedbasedontheprincipleofthemethodsdescribedbyRamón-Moliner2,GlaserandVanderLoos5.ThiskithasnotonlydramaticallyimprovedandsimplifiedtheGolgi-Coxtechniquebuthasalsoproventobeextremelyreliableandsensitivefordemonstratingmorphologicaldetailsofneuronsandglia,especiallydendriticspines.TheFDRapidGolgiStainKithasbeentestedextensivelyandwidelyusedonthebrainsfromseveralspeciesofanimalsaswellasonthespecimensofpostmortemhumanbrains.Kitcontents:StoreatroomtemperatureSolutionA125mlSolutionB125mlSolutionC125mlx2SolutionD125mlSolutionE125mlGlassSpecimenRetriever2Naturalhairpaintbrush3Droppingbottle1UserManual1Materialsrequiredbutnotincluded:Doubledistilledordeionizedwater.Plasticorglasstubesorvials.Histologicalsuppliesandequipment,includinggelatin-coatedmicroscopeslides,coverslips,stainingjars,ethanol,xyleneorxylenesubstitutes,resinousmountingmedium（e.g.Permount）,andalightmicroscope.References:CorsiP.（1987）CamilloGolgi’smorphologicalapproachtoneuroanatomy.InMaslandRL,Portera-SanchezAandToffanoG（eds.）,Neuroplasticity:anewtherapeutictoolintheCNSpathology,pp1-7.Berlin:Springer.Ramón-MolinerE.（1970）TheGolgi-Coxtechnique.InNautaWJHandEbbessonSOE（eds.）,ContemporaryMethodsinNeuroanatomy.pp32-55,NewYork:Springer.GravelandGA,WilliamsRS,andDiFigliaM.（1985）EvidencefordegenerativeandregenerativechangesinneostriatalspinyneuronsinHuntington’sdisease.Science.227:770-3.RobinsonTE,andKolbB.（1997）Persistentstructuralmodificationinnucleusaccumbensandprefrontalcortexneuronsproducedbypreviousexperiencewithamphetamine.J.Neurosci.17:8491-7.GlaserME,andVanderLoosH.（1981）Analysisofthickbrainsectionsbyobverse-reversecomputermicroscopy:applicationofanew,highclarityGolgi-Nisslstain.J.Neurosci.Meth.4:117-25.[詳細(xì)]

  2018-09-29 10:03

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• 骨磨片甲苯胺藍(lán)染色試劑盒說明書

  主要用途骨磨片（groundsection）甲苯胺藍(lán)（toluidineblue）染色試劑是一種旨在通過甲苯胺藍(lán)染料的使用，觀察分析由成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞產(chǎn)生的的各種骨組織形成狀態(tài)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛應(yīng)用于各種不脫鈣骨組織、類骨質(zhì)和軟骨組織的染色分析。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，顯色清晰。技術(shù)背景甲苯胺藍(lán)（toluidineblue）是一種異染性（metachromatic）染料，其分子式是C15H16ClN3S，分子量為305.83。常用于骨組織淺表染色，觀察成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞產(chǎn)生的的骨粘合線（cementline）、反折線（reversalline）、長線（dermacationline）、類骨質(zhì)（osteoid）、鈣質(zhì)化新骨（mineralized）等骨組織變化，以評價(jià)各種骨整合（osseointegration）、新骨形成、材料再吸收（materialsresorption）、骨組織重塑（remode領(lǐng)）和骨組織計(jì)量測定（histomorphometrics）等。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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