本文由 上海語燕生物技術有限公司 整理匯編

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• 動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過低速差速離心和化學滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學破膜和高速差速離心的方法，直接從動物血細胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細胞器，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結構破裂而獲得線粒體內活性蛋白酶系統(tǒng)的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于人體和各種動物全血（鼠、豬、羊等）中血小板線粒體可溶性總蛋白的制備?？梢员挥糜诩毎蛲?、信號傳遞、代謝和營養(yǎng)學等的研究?？芍苯佑糜谔囟ǖ鞍缀罄m(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質譜分析等等。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定。技術背景線粒體是細胞中重要的細胞器，其主要功能是提供細胞內各種物質代謝所需要的能量。線粒體中含有豐富的細胞色素氧化酶系統(tǒng)和細胞凋亡相關蛋白等。通過機械或化學方法破裂細胞，進而差速離心獲得線粒體，然后通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑防止裂解后線粒體內各種活性蛋白成分遭到活化的內源性蛋白酶的破壞，充分保留線粒體內蛋白質的免疫和生物學活性，Z后進行相關蛋白的獨立分析。產(chǎn)品內容清理液（ReagentA）500毫升裂解液（ReagentB）80毫升凈化液（ReagentC）20毫升強化液（ReagentD）10毫升保存液（ReagentE）200毫升破膜液（ReagentF）2毫升活性液（ReagentG）20微升上樣液（ReagentH）3毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentG）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器50毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器4℃臺式離心機：用于樣品操作4℃超速離心機：用于樣品操作DOUNCE勻漿器：用于裂解細胞超聲儀：用于裂解細胞實驗步驟物理處理法實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標記為裂解工作液。然后進行下列操作。準備1個無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時內抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細胞顆粒群松動加入10毫升預冷的清理液（ReagentA），混勻細胞顆粒群放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預冷的清理液（ReagentA），混勻細胞顆粒群放入臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時停止操作，須暫時放進－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板加入5毫升預冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻細胞顆粒群即刻放進預冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿幫勻化細胞（約10下）（注意：參見注意事項11）將所有細胞勻漿物移入15毫升錐形離心管（選擇步驟）置于超聲儀槍頭下，離心管在冰槽里（選擇步驟）超聲功率為60％（或150赫茲）猝擊10秒，間隙30秒，10個循環(huán)放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細胞放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進微型臺式離心機離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1）移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳1）移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管2）加入20微升上樣液（ReagentH）3）渦旋震蕩15秒放進微型臺式離心機離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進行電泳操作和西方雜交化學處理法實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標記為裂解工作液。然后進行下列操作。準備1個無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時內抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細胞顆粒群松動加入10毫升預冷的清理液（ReagentA），混勻細胞顆粒群放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）（選擇步驟）放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心15分鐘，速度為200g（選擇步驟）小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預冷的清理液(ReagentA)，混勻細胞顆粒群放入臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時停止操作，須暫時放進－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板入5毫升預冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育2分鐘，期間渦旋震蕩5秒一次加入500微升預冷的強化液（ReagentD）渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育5分鐘，期間渦旋震蕩5秒二次（注意：參見注意事項12）加入5毫升預冷的保存液（ReagentE），輕輕搖動試管混勻放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細胞放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進微型臺式離心機離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1．移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管加入20微升上樣液（ReagentH）渦旋震蕩15秒放進微型臺式離心機離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進行電泳操作和西方雜交注意事項本產(chǎn)品為20次（10至20毫升全血）操作其它實際操作的全血容量與試劑使用量按比例調整：例如40毫升全血，試劑用量加倍操作時，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）操作時，須戴手套建議使用新鮮全血：2小時內的全血為理想狀態(tài)，不要超過24小時全血樣品采集須使用全血樣品采集須使用EDTA二鉀血液抗凝液（12059.1）、ACD血液抗凝液（12059.4），或肝素鈉血液抗凝液（12059.5）建議使用足夠的樣品量血小板提取量因人而異；如果不足，建議增加全血量線粒體操作均須在4℃或以下狀態(tài)下進行建議嚴格控制操作時間通常勻化次數(shù)為10下（或細胞顆粒群消失為止）達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)通常孵育5分鐘達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)物理處理法是優(yōu)先推薦的技術處理通常每毫升全血平均可獲得2X108血小板通常10毫升全血的血小板線粒體含量為10至25微克線粒體蛋白16．如果需檢測不可溶性線粒體蛋白，可保留線粒體裂解后的沉淀物，直接加入10微升上樣液（ReagentH）和10微升無離子水，然后繼續(xù)操作二的步驟3至6本公司提供系列線粒體試劑產(chǎn)品質量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染本產(chǎn)品經(jīng)鑒定蛋白萃取產(chǎn)量高本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純化程度高[詳細]

  2018-11-19 10:00

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• 動物細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途Bradford蛋白質濃度定量試劑是一種旨在使用考馬斯亮藍染色劑G－250與可溶性蛋白質特異性結合產(chǎn)生色彩差異變化，通過比色測定其Zda吸收轉換來定量蛋白質濃度的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種蛋白質（動物、人體、植物、微生物等）的含量檢測。產(chǎn)品即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感，定量極ng確。技術背景考馬斯亮藍染料G－250（CoomassieBrilliantBlueG－250）是一種與蛋白質結合的化學染料。它的三苯甲烷（triphenylmethane）基團，主要與蛋白質的非極性結構結合。而它的陰離子磺酸鹽（anionsulfonate）基團與蛋白質分子的陽離子和芳香類氨基酸，尤其是精氨酸和賴氨酸側鏈的結合。在酸性環(huán)境下，其Zda吸收波長從465nm轉換為595nm。Bradford提出的方法的Zda優(yōu)點在于不受樣品中各種化學成分的干擾。較之Lowry，Hartree-Lowry和BCA技術，更為敏感。[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-19 00:00

  操作手冊

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• 動物硬組織線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途動物硬組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動物硬組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。適合于各種動物硬組織（心臟或肌肉）的線粒體的制備。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理生理學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術背景線粒體細胞器的分離是現(xiàn)代細胞生物學研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細胞分離線粒體的技術方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升酶解液（ReagentF）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和酶解液（ReagentF）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證12月用戶自備15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管：用于保存線粒體的容器4℃臺式離心機：用于沉淀細胞4℃超速離心機：用于分離細胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細胞[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 細胞可溶性總蛋白質制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途細胞可溶性總蛋白質制備試劑是一種旨在使用化學方法快速充分裂解細胞，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，通過超速離心，收集所有細胞內可溶性蛋白質的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞（動物、人體）等樣品?？芍苯佑糜诤怂岬鞍捉Y合凝膠遷移電泳分析（EMSA）、DNA足跡法檢測、特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質譜分析等等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，收集效果好。技術背景通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑可以防止裂解后細胞內各種活性蛋白成分遭到活化的內源性蛋白酶的破壞，充分保留細胞內蛋白質的免疫和生物學活性。[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 動物線粒體呼吸鏈復合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物線粒體呼吸鏈復合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2024-09-17 19:14

  專利

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• 抗體/蛋白HRP標記制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  上海哈靈生物科技有限公司HL40029v.A抗體/蛋白HRP標記制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途抗體/蛋白HRP標記制備試劑是一種旨在通過高碘酸氧化產(chǎn)生活化的辣根過氧化酶，與抗體或蛋白中氨基偶聯(lián)反應，進一步還原和中和作用，確保復合體的穩(wěn)定的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種種系的抗體、純化蛋白的HRP標記。其應用于后續(xù)WESTERNBLOT、免疫組化、ELISA等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，反應敏感，重復性好。技術背景辣根過氧化酶，分子量44Kd，常作為標記，用于免疫反應的定量檢測（enzymeimmunoassay；EIA），例如免疫印跡WESTERNBLOT、免疫檢測ELISA和免疫化學染色immunohistochemicalstaining等。辣根過氧化酶具有價廉、高純、高特異活性、穩(wěn)定等優(yōu)點，成為主要的（占80％）抗體或蛋白綴和標記酶?；诶备^氧化酶為糖蛋白，含有8個糖鏈，通過高碘酸避光氧化，使羥基和醛基分離后，活化的HRP既不失活，又能在堿性條件下，與所有蛋白或抗體存在的氨基進行偶聯(lián)反應，形成席夫堿（Schiff'sbases），進而在酸性透析處理后去除剩余的高碘酸和預防自偶聯(lián)。經(jīng)過溫和的硼氫化氰鈉（sodiumcyanoborohydride）還原水合作用，以及乙醇胺（ethanolamine）或2-巰基乙胺（2-mercaptoethylamine）中和殘余的醛基，使標記蛋白/抗體更加穩(wěn)定。產(chǎn)品內容緩沖液（ReagentA）1毫升標記液（ReagentB）50微升還原液（ReagentC）200微升中和液（ReagentD）50微升保存液（ReagentE）1毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里；有效保證6月用戶自備目標抗體或蛋白：用于HRP標記1.5毫升離心管：用于樣品反應操作和保存的容器震蕩器：用于混勻反應物實驗步驟移取10微升（總量100微克）用戶自備的目標抗體或蛋白（分子量在160Kd左右或以下）加入90微升緩沖液（ReagentA），混勻加入10微升標記液（ReagentB），混勻室溫下（25℃）孵育1小時或4℃冰箱里孵育16小時加入10微升還原液（ReagentC），混勻室溫下孵育15分鐘加入10微升中和液（ReagentD），混勻室溫下孵育15分鐘加入130微升保存液（ReagentE），混勻獲得標記蛋白或抗體終濃度0.6毫克/毫升即刻放進-70℃保存或置于冰槽里備用或繼續(xù)后續(xù)ELISA、WESTERNBLOT、IMMUNOHISTOLOGY等注意事項本產(chǎn)品為5次（100微克/次）操作操作時，須戴手套樣品中避免含有疊氮化鈉（sodiumazide）、Tris、甘氨酸（glycine）、氫氧化銨（NH4OH）等，否則干擾標記如果標記液（ReagentB）沒有充分溶解，可以放在4℃冰箱里72小時或更長時間后使用如果需要增加標記量，則相應增加試劑用量如果標記500Kd以上的蛋白或抗體，則使用20微升標記液（ReagentB）即可標記效率取決于目標蛋白或抗體與活化HRP的分子摩爾濃度比例和結構關系HRP標記蛋白復合體在4℃溫度下保持4周穩(wěn)定；在－20℃溫度下，保持6個月穩(wěn)定標記抗體后續(xù)應用建議用量如下：應用標記抗體濃度ELISA250納克/毫升至2.5微克/毫升WESTERNBLOT0.5微克/毫升至50微克/毫升IMMUNOHISTOLOGY2.0微克/毫升至5.0微克/毫升本公司提供系列蛋白/抗體標記試劑產(chǎn)品質量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶[詳細]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 紅細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  紅細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-01-29 00:00

  安裝說明

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• 人線粒體促凋亡蛋白（SMAC）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人線粒體促凋亡蛋白（SMAC）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人SMAC/Diablo單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的SMAC與單抗結合，加入生物素化的抗人SMAC，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，SMAC濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中SMAC濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應SMAC含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的SMAC檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人SMAC。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人可溶性血栓調節(jié)蛋白試劑盒使用說明書

  人可溶性血栓調節(jié)蛋白試劑盒使用說明書[詳細]

  2015-05-29 00:00

  其它

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• 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2024-09-28 00:04

  課件

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• 可溶性包涵體蛋白復性（化學稀釋II）試劑盒產(chǎn)品說明書

  可溶性包涵體蛋白復性（化學稀釋II）試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途可溶性包涵體蛋白復性（化學稀釋II）試劑是一種旨在使用化學穩(wěn)定方法，使可溶性變性純化蛋白重新折疊，恢復其蛋白功能和活性的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種可溶性純化蛋白，尤其是細菌內重組蛋白（融合蛋白）以及鹽酸胍或Sarkosyl可溶性處理的包涵體蛋白?？珊罄m(xù)用于蛋白功能、酶活性等分析。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，參數(shù)優(yōu)化，操作便捷，復性效果理想。技術背景在蛋白純化和融化過程中，特別是包涵體蛋白，變性劑（denaturant）提供了Z有效的手段，其獲得的純化蛋白屬于變性蛋白（denaturedprotein）。為了使變性蛋白恢復為天然蛋白（nativeprotein），即具有蛋白質的自然結構和活性，需要進行蛋白復性（renaturation）或重新折疊（refolding）。蛋白復性是一個復雜的過程，諸如pH、離子強度、低分子添加劑、氧化還原電位（redoxpotential）和溫度等物化因子，影響體外蛋白復性的效率。通常體外復性的方法包括稀釋法和緩沖交換法。前者通過化學處理，而后者采用物理方法（例如透析、膜過濾（diafiltration）、凝膠過濾層析（gel-filtrationchromatography）等，以達到蛋白復性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜堿（sulfobetaine）、去垢劑、變性劑等將影響化學稀釋復性處理的效率。產(chǎn)品內容穩(wěn)定液（ReagentA）20毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器恒溫搖床：用于反應孵育實驗步驟準備好可溶性純化變性蛋白樣品移取50微升蛋白樣品（10毫克/毫升）到1.5毫升離心管加入950微升穩(wěn)定液（ReagentA）放進20℃恒溫搖床孵育2小時，速度為200RPM（選擇步驟）移取10微升進行生物檢測，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受體結合實驗等確定復性蛋白活性值即刻放進－70℃冰箱里保存注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時須戴手套本產(chǎn)品的復性效率達80％以上建議與本公司系列包涵體蛋白溶解試劑盒配套使用由于樣品的特異性，用戶可以優(yōu)化溫度、孵育時間、蛋白濃度，以獲得Zda復性效率如果復性效率過低，建議使用可溶性包涵體蛋白復性（物理透析）試劑盒－HL30044.5如果獲得滿意的復性效果，用戶可以按比例擴大復性容量本公司提供系列包涵體蛋白處理試劑產(chǎn)品質量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 人可溶性血栓調節(jié)蛋白（sTM）ELISA試劑盒說明書

  人可溶性血栓調節(jié)蛋白（sTM）ELISA試劑盒說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人可溶性血栓調節(jié)蛋白（sTM）的含量。l有效期：6個月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人可溶性血栓調節(jié)蛋白（sTM）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人可溶性血栓調節(jié)蛋白（sTM）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。3.組織勻漿：用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。注：標本溶血會影響Z后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。2.實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水注意事項嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍：1.25ng/mL40ng/mL。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于0.1ng/mL。3.特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性：板內變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質量技術風險。2.Z終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關，請務必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據(jù)試劑盒內說明書進行實驗操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結果。[詳細]

  2018-11-16 10:02

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• 人血小板反應蛋白1 （TSP-1）ELISA試劑盒使用說明書

  我司ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應，質量保證，價格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)水平。用純化的人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)，再與HRP標記的血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：270ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180ng/ml，120ng/ml，60ng/ml，30ng/ml，15ng/ml）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：7ng/ml-260ng/ml保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

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• 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa試劑盒說明書

  大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa試劑盒說明書[詳細]

  2024-10-08 05:29

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• 人總蛋白S（TPS）ELISA試劑盒說明書

  人總蛋白S（TPS）ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中人總蛋白S（TPS）的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人總蛋白S（TPS）水平。用純化的總蛋白S（TPS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白S（TPS），再與HRP標記的總蛋白S（TPS）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人總蛋白S（TPS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人總蛋白S（TPS）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：360ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為240ng/L，160ng/L，80ng/L，40ng/L，20ng/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：10ng/L-300ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

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• 動物全血線粒體粗提分離試 劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途動物全血線粒體粗提分離試劑是一種旨在通過化學溶解以純化血白細胞、物理或化學破膜及離心處理分離出完整而純化的線粒體細胞器的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物血細胞中的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理生理學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術背景線粒體細胞器的研究是現(xiàn)代細胞生物學的Z重要的課題之一。線粒體成為生物衰老、古生物、細胞凋亡、腫瘤、HIV、老年癡呆癥、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要對象。從任何組織或細胞分離線粒體的技術方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細胞器的權威而經(jīng)典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和培養(yǎng)細胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，可以被用于線粒體酶活性、細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術背景線粒體細胞器的分離是現(xiàn)代細胞生物學研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細胞分離線粒體的技術方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升活性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液（12028）或PBS緩沖溶液（12033）：用于清理細胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細胞脫離完全細胞培養(yǎng)液（12052）：用于中和胰蛋白酶的細胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管：用于細胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管：用于保存線粒體4℃臺式離心機：用于沉淀細胞4℃超速離心機：用于分離細胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細胞實驗步驟一、動物軟組織線粒體分離（組織勻漿法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和4毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．手術取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實驗前**使動物空腹12至24小時）2．（選擇步驟）放進預冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎組織5．放進一個預冷的15毫升錐形離心管6．加入預冷的xx毫升裂解工作液7．渦旋震蕩5秒，充分混勻8．即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）（注意：參見注意事項8）9．將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管，10．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g11．小心移出上清液到另一個新的預冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞12．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g13．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14．（選擇步驟）加入預冷的xx毫升保存液（ReagentE）15．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g16．（選擇步驟）小心抽去上清液17．加xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻18．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離（化學處理法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．手術取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實驗前**使動物空腹12至24小時）2．（選擇步驟）放進預冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．移入一個液氮凍存管5．即刻放進液氮罐過夜6．次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）碾碎組織（注意：切莫使組織凍融）7．放進一個15毫升錐形離心管8．加入預冷的xx毫升裂解工作液9．渦旋震蕩5秒，充分混勻10．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11．加入預冷的xx微升強化液（ReagentD）12．渦旋震蕩5秒，充分混勻13．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項9）14．加入預冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻15．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g16．小心移出上清液到另一個新的預冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞17．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g18．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19．（選擇步驟）加入預冷的xx毫升保存液（ReagentE）20．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g21．（選擇步驟）小心抽去上清液22．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻23．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里三、動物細胞線粒體分離（細胞勻漿法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．準備5至10瓶75cm2細胞培養(yǎng)瓶的細胞（5X107），直至細胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個細胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面，3．小心抽去清洗液4．重復實驗步驟2至3一次5．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)平面6．放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細胞脫落8．分別加入10毫升用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液9．全部移入到一個50毫升錐形離心管10．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為200g11．小心抽去上清液12．加入xx毫升預冷的清理液（ReagentA），混勻細胞13．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g14．小心抽去上清液15．加入預冷的xx毫升裂解工作液16．渦旋震蕩5秒，充分混勻細胞顆粒群17．即刻放進預冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化細胞（約80下）（注意：參見注意事項8）18．將所有細胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g20．小心移出上清液到另一個新的預冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞21．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g22．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23．（選擇步驟）加入預冷的xx毫升保存液（ReagentE）24．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g25．（選擇步驟）小心抽去上清液26．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻27．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里四、動物細胞線粒體分離（化學處理法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．準備5至10瓶75cm2細胞培養(yǎng)瓶的細胞（5X107），直至細胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個細胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面28．小心抽去清洗液3．重復實驗步驟2至3一次4．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)平面5．放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細胞脫落7．分別加入10毫升用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液8．全部移入到一個50毫升錐形離心管9．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為200g10．小心抽去上清液11．加入xx毫升預冷的清理液（ReagentA）12．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g13．小心抽去上清液14．加入預冷的xx毫升裂解工作液15．渦旋震蕩5秒，充分混勻16．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17．加入預冷的xx微升強化液（ReagentD）18．渦旋震蕩5秒，充分混勻19．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項9）20．加入預冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻21．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g22．小心移出上清液到另一個新的預冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞23．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g24．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25．（選擇步驟）加入預冷的xx毫升保存液（ReagentE）26．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g27．（選擇步驟）小心抽去上清液28．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻29．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里注意事項1．本產(chǎn)品為10次（1克動物組織或5X107細胞）或50次（200毫克動物組織或1X107細胞）操作2．實際操作的動物組織重量或細胞量與試劑使用量按比例調整：例如200毫克動物組織：試劑用量是標準用量的五分之一3．所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進行4．操作時，須戴手套5．操作時，須無菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）6．建議使用足夠的樣品量7．建議嚴格控制操作時間8．通常勻化次數(shù)為80下達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)9．通常孵育5分鐘達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)10．對于難以裂解的細胞，例如HeLa細胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術處理11．通常5X107細胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12．如果需要計量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內完成，否則線粒體將分解13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應減少14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動物細胞/組織高質純化線粒體分離試劑盒－10006.315．線粒體正?；钚詼y定方法是：CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細胞色素吸收峰譜等16．線粒體內外膜完整測定方法是：CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質量標準1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內外膜完整3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?；钚?．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• ELISA試劑盒 人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1 ELISA試劑盒

  人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1ELISA試劑盒本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1（TSP-1）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1（TSP-1）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1（TSP-1）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3.細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標儀（450nm）人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1ELISA試劑盒2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱操作注意事項1.試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3.標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白；預處理后的樣本無需稀釋，直接取10μL加樣即可。4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5.所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品（800ng/mL）0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：800、400、200、100、50、25ng/mL.試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1.手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。2.自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；3.待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；4.隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值，大于等于0.9900。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于10ng/mL。3.特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性：板內、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6個月免責聲明1.試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。2.嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。人血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-29 02:39

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• 人總P53蛋白（Total P53）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人總P53蛋白（TotalP53）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人P53單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的P53與單抗結合，加入生物素化的抗人P53，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，P53濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中P53濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：5ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成10ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標本激活方法1.將450ul標本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結果時乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標本P53的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）5.細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活）100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62、31、15.6、0PG/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應P53含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的P53檢測濃度小于10pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人P53。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數(shù)均小于8.9％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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