本文由 上海科學(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-11-18 10:00 976閱讀次數(shù)

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• 動物細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑是一種旨在使用考馬斯亮藍染色劑G－250與可溶性蛋白質(zhì)特異性結(jié)合產(chǎn)生色彩差異變化，通過比色測定其Zda吸收轉(zhuǎn)換來定量蛋白質(zhì)濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種蛋白質(zhì)（動物、人體、植物、微生物等）的含量檢測。產(chǎn)品即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感，定量極ng確。技術(shù)背景考馬斯亮藍染料G－250（CoomassieBrilliantBlueG－250）是一種與蛋白質(zhì)結(jié)合的化學(xué)染料。它的三苯甲烷（triphenylmethane）基團，主要與蛋白質(zhì)的非極性結(jié)構(gòu)結(jié)合。而它的陰離子磺酸鹽（anionsulfonate）基團與蛋白質(zhì)分子的陽離子和芳香類氨基酸，尤其是精氨酸和賴氨酸側(cè)鏈的結(jié)合。在酸性環(huán)境下，其Zda吸收波長從465nm轉(zhuǎn)換為595nm。Bradford提出的方法的Zda優(yōu)點在于不受樣品中各種化學(xué)成分的干擾。較之Lowry，Hartree-Lowry和BCA技術(shù)，更為敏感。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過低速差速離心和化學(xué)滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學(xué)破膜和高速差速離心的方法，直接從動物血細(xì)胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細(xì)胞器，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結(jié)構(gòu)破裂而獲得線粒體內(nèi)活性蛋白酶系統(tǒng)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于人體和各種動物全血（鼠、豬、羊等）中血小板線粒體可溶性總蛋白的制備?？梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究?？芍苯佑糜谔囟ǖ鞍缀罄m(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體中含有豐富的細(xì)胞色素氧化酶系統(tǒng)和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白等。通過機械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞，進而差速離心獲得線粒體，然后通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑防止裂解后線粒體內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留線粒體內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性，Z后進行相關(guān)蛋白的獨立分析。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）500毫升裂解液（ReagentB）80毫升凈化液（ReagentC）20毫升強化液（ReagentD）10毫升保存液（ReagentE）200毫升破膜液（ReagentF）2毫升活性液（ReagentG）20微升上樣液（ReagentH）3毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentG）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器50毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器4℃臺式離心機：用于樣品操作4℃超速離心機：用于樣品操作DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞超聲儀：用于裂解細(xì)胞實驗步驟物理處理法實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為裂解工作液。然后進行下列操作。準(zhǔn)備1個無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細(xì)胞顆粒群松動加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放入臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時停止操作，須暫時放進－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板加入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群即刻放進預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿幫勻化細(xì)胞（約10下）（注意：參見注意事項11）將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管（選擇步驟）置于超聲儀槍頭下，離心管在冰槽里（選擇步驟）超聲功率為60％（或150赫茲）猝擊10秒，間隙30秒，10個循環(huán)放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細(xì)胞放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進微型臺式離心機離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1）移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳1）移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管2）加入20微升上樣液（ReagentH）3）渦旋震蕩15秒放進微型臺式離心機離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進行電泳操作和西方雜交化學(xué)處理法實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為裂解工作液。然后進行下列操作。準(zhǔn)備1個無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細(xì)胞顆粒群松動加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）（選擇步驟）放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心15分鐘，速度為200g（選擇步驟）小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)，混勻細(xì)胞顆粒群放入臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時停止操作，須暫時放進－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育2分鐘，期間渦旋震蕩5秒一次加入500微升預(yù)冷的強化液（ReagentD）渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育5分鐘，期間渦旋震蕩5秒二次（注意：參見注意事項12）加入5毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE），輕輕搖動試管混勻放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細(xì)胞放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進微型臺式離心機離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1．移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管加入20微升上樣液（ReagentH）渦旋震蕩15秒放進微型臺式離心機離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進行電泳操作和西方雜交注意事項本產(chǎn)品為20次（10至20毫升全血）操作其它實際操作的全血容量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如40毫升全血，試劑用量加倍操作時，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）操作時，須戴手套建議使用新鮮全血：2小時內(nèi)的全血為理想狀態(tài)，不要超過24小時全血樣品采集須使用全血樣品采集須使用EDTA二鉀血液抗凝液（12059.1）、ACD血液抗凝液（12059.4），或肝素鈉血液抗凝液（12059.5）建議使用足夠的樣品量血小板提取量因人而異；如果不足，建議增加全血量線粒體操作均須在4℃或以下狀態(tài)下進行建議嚴(yán)格控制操作時間通常勻化次數(shù)為10下（或細(xì)胞顆粒群消失為止）達到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)通常孵育5分鐘達到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)物理處理法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理通常每毫升全血平均可獲得2X108血小板通常10毫升全血的血小板線粒體含量為10至25微克線粒體蛋白16．如果需檢測不可溶性線粒體蛋白，可保留線粒體裂解后的沉淀物，直接加入10微升上樣液（ReagentH）和10微升無離子水，然后繼續(xù)操作二的步驟3至6本公司提供系列線粒體試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染本產(chǎn)品經(jīng)鑒定蛋白萃取產(chǎn)量高本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純化程度高[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細(xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升活性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液（12028）或PBS緩沖溶液（12033）：用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液（12052）：用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管：用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管：用于保存線粒體4℃臺式離心機：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞實驗步驟一、動物軟組織線粒體分離（組織勻漿法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和4毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實驗前**使動物空腹12至24小時）2．（選擇步驟）放進預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎組織5．放進一個預(yù)冷的15毫升錐形離心管6．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7．渦旋震蕩5秒，充分混勻8．即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）（注意：參見注意事項8）9．將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管，10．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g11．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g13．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）15．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g16．（選擇步驟）小心抽去上清液17．加xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻18．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離（化學(xué)處理法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實驗前**使動物空腹12至24小時）2．（選擇步驟）放進預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．移入一個液氮凍存管5．即刻放進液氮罐過夜6．次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）碾碎組織（注意：切莫使組織凍融）7．放進一個15毫升錐形離心管8．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9．渦旋震蕩5秒，充分混勻10．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11．加入預(yù)冷的xx微升強化液（ReagentD）12．渦旋震蕩5秒，充分混勻13．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項9）14．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻15．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g16．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g18．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）20．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g21．（選擇步驟）小心抽去上清液22．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻23．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里三、動物細(xì)胞線粒體分離（細(xì)胞勻漿法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面，3．小心抽去清洗液4．重復(fù)實驗步驟2至3一次5．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)平面6．放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落8．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9．全部移入到一個50毫升錐形離心管10．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為200g11．小心抽去上清液12．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞13．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g14．小心抽去上清液15．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16．渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群17．即刻放進預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞（約80下）（注意：參見注意事項8）18．將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g20．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g22．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）24．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g25．（選擇步驟）小心抽去上清液26．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻27．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里四、動物細(xì)胞線粒體分離（化學(xué)處理法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面28．小心抽去清洗液3．重復(fù)實驗步驟2至3一次4．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)平面5．放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落7．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8．全部移入到一個50毫升錐形離心管9．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為200g10．小心抽去上清液11．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA）12．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g13．小心抽去上清液14．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15．渦旋震蕩5秒，充分混勻16．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17．加入預(yù)冷的xx微升強化液（ReagentD）18．渦旋震蕩5秒，充分混勻19．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項9）20．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻21．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g22．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g24．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）26．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g27．（選擇步驟）小心抽去上清液28．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻29．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里注意事項1．本產(chǎn)品為10次（1克動物組織或5X107細(xì)胞）或50次（200毫克動物組織或1X107細(xì)胞）操作2．實際操作的動物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200毫克動物組織：試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3．所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進行4．操作時，須戴手套5．操作時，須無菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）6．建議使用足夠的樣品量7．建議嚴(yán)格控制操作時間8．通常勻化次數(shù)為80下達到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)9．通常孵育5分鐘達到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)10．對于難以裂解的細(xì)胞，例如HeLa細(xì)胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11．通常5X107細(xì)胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12．如果需要計量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒－10006.315．線粒體正?；钚詼y定方法是：CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16．線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是：CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?；钚?．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑是一種旨在使用化學(xué)方法快速充分裂解細(xì)胞，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，通過超速離心，收集所有細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細(xì)胞（動物、人體）等樣品?？芍苯佑糜诤怂岬鞍捉Y(jié)合凝膠遷移電泳分析（EMSA）、DNA足跡法檢測、特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，收集效果好。技術(shù)背景通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑可以防止裂解后細(xì)胞內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 抗體/蛋白HRP標(biāo)記制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  上海哈靈生物科技有限公司HL40029v.A抗體/蛋白HRP標(biāo)記制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途抗體/蛋白HRP標(biāo)記制備試劑是一種旨在通過高碘酸氧化產(chǎn)生活化的辣根過氧化酶，與抗體或蛋白中氨基偶聯(lián)反應(yīng)，進一步還原和中和作用，確保復(fù)合體的穩(wěn)定的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種種系的抗體、純化蛋白的HRP標(biāo)記。其應(yīng)用于后續(xù)WESTERNBLOT、免疫組化、ELISA等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，反應(yīng)敏感，重復(fù)性好。技術(shù)背景辣根過氧化酶，分子量44Kd，常作為標(biāo)記，用于免疫反應(yīng)的定量檢測（enzymeimmunoassay；EIA），例如免疫印跡WESTERNBLOT、免疫檢測ELISA和免疫化學(xué)染色immunohistochemicalstaining等。辣根過氧化酶具有價廉、高純、高特異活性、穩(wěn)定等優(yōu)點，成為主要的（占80％）抗體或蛋白綴和標(biāo)記酶。基于辣根過氧化酶為糖蛋白，含有8個糖鏈，通過高碘酸避光氧化，使羥基和醛基分離后，活化的HRP既不失活，又能在堿性條件下，與所有蛋白或抗體存在的氨基進行偶聯(lián)反應(yīng)，形成席夫堿（Schiff'sbases），進而在酸性透析處理后去除剩余的高碘酸和預(yù)防自偶聯(lián)。經(jīng)過溫和的硼氫化氰鈉（sodiumcyanoborohydride）還原水合作用，以及乙醇胺（ethanolamine）或2-巰基乙胺（2-mercaptoethylamine）中和殘余的醛基，使標(biāo)記蛋白/抗體更加穩(wěn)定。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）1毫升標(biāo)記液（ReagentB）50微升還原液（ReagentC）200微升中和液（ReagentD）50微升保存液（ReagentE）1毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里；有效保證6月用戶自備目標(biāo)抗體或蛋白：用于HRP標(biāo)記1.5毫升離心管：用于樣品反應(yīng)操作和保存的容器震蕩器：用于混勻反應(yīng)物實驗步驟移取10微升（總量100微克）用戶自備的目標(biāo)抗體或蛋白（分子量在160Kd左右或以下）加入90微升緩沖液（ReagentA），混勻加入10微升標(biāo)記液（ReagentB），混勻室溫下（25℃）孵育1小時或4℃冰箱里孵育16小時加入10微升還原液（ReagentC），混勻室溫下孵育15分鐘加入10微升中和液（ReagentD），混勻室溫下孵育15分鐘加入130微升保存液（ReagentE），混勻獲得標(biāo)記蛋白或抗體終濃度0.6毫克/毫升即刻放進-70℃保存或置于冰槽里備用或繼續(xù)后續(xù)ELISA、WESTERNBLOT、IMMUNOHISTOLOGY等注意事項本產(chǎn)品為5次（100微克/次）操作操作時，須戴手套樣品中避免含有疊氮化鈉（sodiumazide）、Tris、甘氨酸（glycine）、氫氧化銨（NH4OH）等，否則干擾標(biāo)記如果標(biāo)記液（ReagentB）沒有充分溶解，可以放在4℃冰箱里72小時或更長時間后使用如果需要增加標(biāo)記量，則相應(yīng)增加試劑用量如果標(biāo)記500Kd以上的蛋白或抗體，則使用20微升標(biāo)記液（ReagentB）即可標(biāo)記效率取決于目標(biāo)蛋白或抗體與活化HRP的分子摩爾濃度比例和結(jié)構(gòu)關(guān)系HRP標(biāo)記蛋白復(fù)合體在4℃溫度下保持4周穩(wěn)定；在－20℃溫度下，保持6個月穩(wěn)定標(biāo)記抗體后續(xù)應(yīng)用建議用量如下：應(yīng)用標(biāo)記抗體濃度ELISA250納克/毫升至2.5微克/毫升WESTERNBLOT0.5微克/毫升至50微克/毫升IMMUNOHISTOLOGY2.0微克/毫升至5.0微克/毫升本公司提供系列蛋白/抗體標(biāo)記試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

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• 紅細(xì)胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  紅細(xì)胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-29 00:00

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• 人線粒體促凋亡蛋白（SMAC）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人線粒體促凋亡蛋白（SMAC）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人SMAC/Diablo單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的SMAC與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人SMAC，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，SMAC濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中SMAC濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)SMAC含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的SMAC檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人SMAC。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒使用說明書

  人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2015-05-29 00:00

  其它

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• 動物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途動物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑是一種旨在通過機械或化學(xué)處理、差速和等密度離心方法，從動物細(xì)胞中分離出活性完整而高度純化的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞器組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，純度可達99％。適合于各種動物原代和培養(yǎng)細(xì)胞（人體、老鼠、兔子等）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的制備?？梢员挥糜诩?xì)胞色素P450系統(tǒng)外源化合物（xenobiotics）代謝、脂類代謝、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白和腔內(nèi)蛋白等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量高。技術(shù)背景內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmicreticulum；ER）是真核生物的細(xì)胞器組分，構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)小管（tubules）、囊泡（vesicles）和小池（cisternae/sac）相互連接的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，負(fù)責(zé)蛋白轉(zhuǎn)譯、折疊和轉(zhuǎn)運成為細(xì)胞膜成分（例如跨膜受體和其它整合膜蛋白等）或分泌型蛋白（例如消化性酶），負(fù)責(zé)鈣離子區(qū)隔（sequestration），以及糖原、固醇類和其它大分子的生產(chǎn)和儲存等功能。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分成三種：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（Roughendoplasmicreticulum；RER）、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（Smoothendoplasmicreticulum；SER）和肌質(zhì)網(wǎng)（sarcoplasmicreticulum；SR）。根據(jù)細(xì)胞代謝的需要，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)會互相轉(zhuǎn)換。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通過核糖體合成蛋白質(zhì)并分類；滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行固醇、碳水化合物和藥物代謝等。肌質(zhì)網(wǎng)的主要功能為儲存和釋放鈣離子。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的常用手段之一：**，通過機械或化學(xué)方法破裂組織細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細(xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:04

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• 可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑盒產(chǎn)品說明書

  可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑是一種旨在使用化學(xué)穩(wěn)定方法，使可溶性變性純化蛋白重新折疊，恢復(fù)其蛋白功能和活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種可溶性純化蛋白，尤其是細(xì)菌內(nèi)重組蛋白（融合蛋白）以及鹽酸胍或Sarkosyl可溶性處理的包涵體蛋白?？珊罄m(xù)用于蛋白功能、酶活性等分析。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，參數(shù)優(yōu)化，操作便捷，復(fù)性效果理想。技術(shù)背景在蛋白純化和融化過程中，特別是包涵體蛋白，變性劑（denaturant）提供了Z有效的手段，其獲得的純化蛋白屬于變性蛋白（denaturedprotein）。為了使變性蛋白恢復(fù)為天然蛋白（nativeprotein），即具有蛋白質(zhì)的自然結(jié)構(gòu)和活性，需要進行蛋白復(fù)性（renaturation）或重新折疊（refolding）。蛋白復(fù)性是一個復(fù)雜的過程，諸如pH、離子強度、低分子添加劑、氧化還原電位（redoxpotential）和溫度等物化因子，影響體外蛋白復(fù)性的效率。通常體外復(fù)性的方法包括稀釋法和緩沖交換法。前者通過化學(xué)處理，而后者采用物理方法（例如透析、膜過濾（diafiltration）、凝膠過濾層析（gel-filtrationchromatography）等，以達到蛋白復(fù)性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜堿（sulfobetaine）、去垢劑、變性劑等將影響化學(xué)稀釋復(fù)性處理的效率。產(chǎn)品內(nèi)容穩(wěn)定液（ReagentA）20毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器恒溫?fù)u床：用于反應(yīng)孵育實驗步驟準(zhǔn)備好可溶性純化變性蛋白樣品移取50微升蛋白樣品（10毫克/毫升）到1.5毫升離心管加入950微升穩(wěn)定液（ReagentA）放進20℃恒溫?fù)u床孵育2小時，速度為200RPM（選擇步驟）移取10微升進行生物檢測，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受體結(jié)合實驗等確定復(fù)性蛋白活性值即刻放進－70℃冰箱里保存注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時須戴手套本產(chǎn)品的復(fù)性效率達80％以上建議與本公司系列包涵體蛋白溶解試劑盒配套使用由于樣品的特異性，用戶可以優(yōu)化溫度、孵育時間、蛋白濃度，以獲得Zda復(fù)性效率如果復(fù)性效率過低，建議使用可溶性包涵體蛋白復(fù)性（物理透析）試劑盒－HL30044.5如果獲得滿意的復(fù)性效果，用戶可以按比例擴大復(fù)性容量本公司提供系列包涵體蛋白處理試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）ELISA試劑盒說明書

  人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）ELISA試劑盒說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）的含量。l有效期：6個月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會影響Z后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。標(biāo)本處理1.本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。2.實驗前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對標(biāo)本進行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預(yù)實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水注意事項嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結(jié)果計算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍：1.25ng/mL40ng/mL。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于0.1ng/mL。3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。2.Z終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實驗環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結(jié)果。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

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• 動物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

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• 動物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

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• 人總蛋白S（TPS）ELISA試劑盒說明書

  人總蛋白S（TPS）ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中人總蛋白S（TPS）的含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人總蛋白S（TPS）水平。用純化的總蛋白S（TPS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白S（TPS），再與HRP標(biāo)記的總蛋白S（TPS）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人總蛋白S（TPS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人總蛋白S（TPS）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：360ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為240ng/L，160ng/L，80ng/L，40ng/L，20ng/L）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：10ng/L-300ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

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• 人總P53蛋白（Total P53）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人總P53蛋白（TotalP53）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人P53單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的P53與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人P53，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，P53濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中P53濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：5ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊，上下混勻。2－8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊，上下混勻。4.即用，或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。（注意：不同的標(biāo)本P53的水平可能有較大差異，請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度）5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋（410ul的標(biāo)本稀釋液＋50ul樣本＋20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH）。檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品（已激活）100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62、31、15.6、0PG/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)P53含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的P53檢測濃度小于10pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人P53。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9％。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 現(xiàn)貨豬總蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T10μg/L-400μg/L使用目的：本試劑盒用于測定豬血清樣本中總蛋白（TP）含量。豬總蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬總蛋白（TP）水平。用純化的豬總蛋白（TP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白（TP），再與HRP標(biāo)記的總蛋白（TP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的總蛋白（TP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬總蛋白（TP）濃度。試劑盒組成標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。豬總蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)：計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。豬總蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-11-04 10:00

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• 人總蛋白（TP）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  人總蛋白(TP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T20ng/ml-1000ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中總蛋白(TP)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人總蛋白(TP)水平。用純化的人總蛋白(TP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白(TP)，再與HRP標(biāo)記的總蛋白(TP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的總蛋白(TP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人總蛋白(TP)濃度。人總蛋白(TP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人總蛋白(TP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。人總蛋白(TP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié)：計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-11-05 10:00

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• 總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒

  總蛋白C(TPC)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2016-07-11 00:00

  其它

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• 線蟲總蛋白（TP）試劑盒使用方法

  檢測范圍：96T15ng/ml-400ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定線蟲相關(guān)樣本中總蛋白(TP)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中線蟲總蛋白(TP)水平。用純化的線蟲總蛋白(TP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總蛋白(TP)，再與HRP標(biāo)記的總蛋白(TP)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的總蛋白(TP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中線蟲總蛋白(TP)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（800ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細(xì)]

  2018-09-19 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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