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• 動物硬組織線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途動物硬組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動物硬組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。適合于各種動物硬組織（心臟或肌肉）的線粒體的制備。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理生理學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細胞器的分離是現(xiàn)代細胞生物學研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升酶解液（ReagentF）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和酶解液（ReagentF）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證12月用戶自備15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管：用于保存線粒體的容器4℃臺式離心機：用于沉淀細胞4℃超速離心機：用于分離細胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細胞[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-05-19 00:00

  操作手冊

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• 植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-01-14 00:00

  應(yīng)用文章

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• 植物線粒體粗提分離試劑盒

  主要用途植物線粒體粗提分離試劑是一種旨在從植物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種新鮮植物組織，包括葉片（leaf）、谷粒（grain）、種子（seed）、以及培養(yǎng)細胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱國際同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細胞器的分離是現(xiàn)代細胞生物學研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物全血線粒體粗提分離試 劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途動物全血線粒體粗提分離試劑是一種旨在通過化學溶解以純化血白細胞、物理或化學破膜及離心處理分離出完整而純化的線粒體細胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物血細胞中的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學和病理生理學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細胞器的研究是現(xiàn)代細胞生物學的Z重要的課題之一。線粒體成為生物衰老、古生物、細胞凋亡、腫瘤、HIV、老年癡呆癥、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要對象。從任何組織或細胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-02-04 00:00

  其它

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• 細胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  細胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2015-08-25 00:00

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• 細胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  細胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]

  2014-12-31 00:00

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• 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2024-09-28 00:04

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• 動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和培養(yǎng)細胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，可以被用于線粒體酶活性、細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細胞器的分離是現(xiàn)代細胞生物學研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機械或化學方法破裂細胞；第二，通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升活性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液（12028）或PBS緩沖溶液（12033）：用于清理細胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細胞脫離完全細胞培養(yǎng)液（12052）：用于中和胰蛋白酶的細胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管：用于細胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管：用于保存線粒體4℃臺式離心機：用于沉淀細胞4℃超速離心機：用于分離細胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細胞實驗步驟一、動物軟組織線粒體分離（組織勻漿法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和4毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實驗前**使動物空腹12至24小時）2．（選擇步驟）放進預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎組織5．放進一個預(yù)冷的15毫升錐形離心管6．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7．渦旋震蕩5秒，充分混勻8．即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）（注意：參見注意事項8）9．將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管，10．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g11．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞12．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g13．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）15．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g16．（選擇步驟）小心抽去上清液17．加xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻18．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離（化學處理法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實驗前**使動物空腹12至24小時）2．（選擇步驟）放進預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．移入一個液氮凍存管5．即刻放進液氮罐過夜6．次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）碾碎組織（注意：切莫使組織凍融）7．放進一個15毫升錐形離心管8．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9．渦旋震蕩5秒，充分混勻10．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11．加入預(yù)冷的xx微升強化液（ReagentD）12．渦旋震蕩5秒，充分混勻13．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項9）14．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻15．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g16．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞17．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g18．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）20．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g21．（選擇步驟）小心抽去上清液22．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻23．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里三、動物細胞線粒體分離（細胞勻漿法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．準備5至10瓶75cm2細胞培養(yǎng)瓶的細胞（5X107），直至細胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個細胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面，3．小心抽去清洗液4．重復實驗步驟2至3一次5．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)平面6．放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細胞脫落8．分別加入10毫升用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液9．全部移入到一個50毫升錐形離心管10．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為200g11．小心抽去上清液12．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細胞13．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g14．小心抽去上清液15．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16．渦旋震蕩5秒，充分混勻細胞顆粒群17．即刻放進預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化細胞（約80下）（注意：參見注意事項8）18．將所有細胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g20．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞21．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g22．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）24．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g25．（選擇步驟）小心抽去上清液26．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻27．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里四、動物細胞線粒體分離（化學處理法）實驗開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1．準備5至10瓶75cm2細胞培養(yǎng)瓶的細胞（5X107），直至細胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個細胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面28．小心抽去清洗液3．重復實驗步驟2至3一次4．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個培養(yǎng)平面5．放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細胞脫落7．分別加入10毫升用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液8．全部移入到一個50毫升錐形離心管9．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為200g10．小心抽去上清液11．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA）12．放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g13．小心抽去上清液14．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15．渦旋震蕩5秒，充分混勻16．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17．加入預(yù)冷的xx微升強化液（ReagentD）18．渦旋震蕩5秒，充分混勻19．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項9）20．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻21．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g22．小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞23．放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g24．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）26．（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g27．（選擇步驟）小心抽去上清液28．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻29．即刻移入1.5毫升離心管，放進－70℃冰箱里注意事項1．本產(chǎn)品為10次（1克動物組織或5X107細胞）或50次（200毫克動物組織或1X107細胞）操作2．實際操作的動物組織重量或細胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200毫克動物組織：試劑用量是標準用量的五分之一3．所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進行4．操作時，須戴手套5．操作時，須無菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）6．建議使用足夠的樣品量7．建議嚴格控制操作時間8．通常勻化次數(shù)為80下達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)9．通常孵育5分鐘達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)10．對于難以裂解的細胞，例如HeLa細胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11．通常5X107細胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12．如果需要計量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動物細胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒－10006.315．線粒體正?；钚詼y定方法是：CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細胞色素吸收峰譜等16．線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是：CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?；钚?．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-06-11 00:00

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• 細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2016-03-15 00:00

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• 動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過低速差速離心和化學滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學破膜和高速差速離心的方法，直接從動物血細胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細胞器，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結(jié)構(gòu)破裂而獲得線粒體內(nèi)活性蛋白酶系統(tǒng)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于人體和各種動物全血（鼠、豬、羊等）中血小板線粒體可溶性總蛋白的制備。可以被用于細胞凋亡、信號傳遞、代謝和營養(yǎng)學等的研究。可直接用于特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細胞中重要的細胞器，其主要功能是提供細胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體中含有豐富的細胞色素氧化酶系統(tǒng)和細胞凋亡相關(guān)蛋白等。通過機械或化學方法破裂細胞，進而差速離心獲得線粒體，然后通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑防止裂解后線粒體內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留線粒體內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學活性，Z后進行相關(guān)蛋白的獨立分析。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）500毫升裂解液（ReagentB）80毫升凈化液（ReagentC）20毫升強化液（ReagentD）10毫升保存液（ReagentE）200毫升破膜液（ReagentF）2毫升活性液（ReagentG）20微升上樣液（ReagentH）3毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentG）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器50毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器4℃臺式離心機：用于樣品操作4℃超速離心機：用于樣品操作DOUNCE勻漿器：用于裂解細胞超聲儀：用于裂解細胞實驗步驟物理處理法實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標記為裂解工作液。然后進行下列操作。準備1個無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細胞顆粒群松動加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細胞顆粒群放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細胞顆粒群放入臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時停止操作，須暫時放進－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板加入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻細胞顆粒群即刻放進預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿幫勻化細胞（約10下）（注意：參見注意事項11）將所有細胞勻漿物移入15毫升錐形離心管（選擇步驟）置于超聲儀槍頭下，離心管在冰槽里（選擇步驟）超聲功率為60％（或150赫茲）猝擊10秒，間隙30秒，10個循環(huán)放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細胞放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進微型臺式離心機離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1）移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳1）移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管2）加入20微升上樣液（ReagentH）3）渦旋震蕩15秒放進微型臺式離心機離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進行電泳操作和西方雜交化學處理法實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標記為裂解工作液。然后進行下列操作。準備1個無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細胞顆粒群松動加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細胞顆粒群放進臺式離心機離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）（選擇步驟）放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心15分鐘，速度為200g（選擇步驟）小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細胞顆粒群（扔掉含有細胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)，混勻細胞顆粒群放入臺式離心機離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時停止操作，須暫時放進－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育2分鐘，期間渦旋震蕩5秒一次加入500微升預(yù)冷的強化液（ReagentD）渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育5分鐘，期間渦旋震蕩5秒二次（注意：參見注意事項12）加入5毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE），輕輕搖動試管混勻放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細胞放進4℃超速離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進4℃超速離心機再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進微型臺式離心機離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1．移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管加入20微升上樣液（ReagentH）渦旋震蕩15秒放進微型臺式離心機離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進行電泳操作和西方雜交注意事項本產(chǎn)品為20次（10至20毫升全血）操作其它實際操作的全血容量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如40毫升全血，試劑用量加倍操作時，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）操作時，須戴手套建議使用新鮮全血：2小時內(nèi)的全血為理想狀態(tài)，不要超過24小時全血樣品采集須使用全血樣品采集須使用EDTA二鉀血液抗凝液（12059.1）、ACD血液抗凝液（12059.4），或肝素鈉血液抗凝液（12059.5）建議使用足夠的樣品量血小板提取量因人而異；如果不足，建議增加全血量線粒體操作均須在4℃或以下狀態(tài)下進行建議嚴格控制操作時間通常勻化次數(shù)為10下（或細胞顆粒群消失為止）達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)通常孵育5分鐘達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度：完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)物理處理法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理通常每毫升全血平均可獲得2X108血小板通常10毫升全血的血小板線粒體含量為10至25微克線粒體蛋白16．如果需檢測不可溶性線粒體蛋白，可保留線粒體裂解后的沉淀物，直接加入10微升上樣液（ReagentH）和10微升無離子水，然后繼續(xù)操作二的步驟3至6本公司提供系列線粒體試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染本產(chǎn)品經(jīng)鑒定蛋白萃取產(chǎn)量高本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純化程度高[詳細]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 紅細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  紅細胞可溶性膜蛋白（純提）制備試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-01-29 00:00

  安裝說明

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• 活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途活體細胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在線粒體，并呈現(xiàn)紅色，用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種線粒體（動物、人體、昆蟲等）的形態(tài)觀察、活性探測和定位標記。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，活體檢測，分辨率高，操作簡捷，性能穩(wěn)定，滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細胞中重要的細胞器，其主要功能是提供細胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細胞中，如動物的心肌，肝，腎等器官和組織的細胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取，或從組織培養(yǎng)細胞中提取。在光學顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED，是一種含有硫醇（Thiol）氯甲基基團的熒光染料，自由通過細胞膜，選擇性地聚集在線粒體。它可以對活細胞進行直接染色，在580nm波長可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位，以檢測線粒體活性。[詳細]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 活體細胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途活體細胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對細胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的?？梢员挥糜诩毎蛲?、信號傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌，即到即用，操作簡易，活體檢測，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂（Cardiolipin）是線粒體膜上的主要成分之一。它對細胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解，致使心磷脂顯著減少，Z終造成線粒體的嚴重損害。Nonyl-AcrydineOrange（NAO）是一種可自由通過細胞膜的染色劑，特異性地染色線粒體上的心磷脂，并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化，其熒光顯著減弱。[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2016-03-17 00:00

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• 動物細胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物細胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-03-30 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物細胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物細胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細]

  2015-03-30 00:00

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• 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個單體組成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子?；阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長）的變化，來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升緩沖液（ReagentC）XX毫升反應(yīng)液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升陰性液（ReagentF）XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復凍融；反應(yīng)液（ReagentD）含有毒性物質(zhì)，避免直接用手接觸；底物液（ReagentE），避免光照；有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器4℃（微型）臺式離心機：用于樣品處理DOUNCE勻漿器：用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)物孵育比色皿：用于比色測定的容器分光光度儀：用于比色分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后進行下列操作。一、樣品準備手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定200毫克組織重量（選擇步驟）放進預(yù)冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（選擇步驟）抽去清洗液移入到一個液氮凍存管即刻放進液氮罐過夜次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）放進一個15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約20至40下）（注意：參見注意事項8）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混勻顆粒群移取10微升進行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1）放進－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準備準備好待測樣品，置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentC）在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放進25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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