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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書
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2018-11-18 10:00 450閱讀次數(shù)
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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動(dòng)物軟組織（肝或腦組織）和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強(qiáng)化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升活性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液（12028）或PBS緩沖溶液（12033）：用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液（12052）：用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管：用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管：用于保存線粒體4℃臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、動(dòng)物軟組織線粒體分離（組織勻漿法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和4毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí)）2．（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎組織5．放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管6．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7．渦旋震蕩5秒，充分混勻8．即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）9．將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管，10．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g11．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g13．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）15．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g16．（選擇步驟）小心抽去上清液17．加xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻18．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里二、動(dòng)物軟組織線粒體分離（化學(xué)處理法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí)）2．（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．移入一個(gè)液氮凍存管5．即刻放進(jìn)液氮罐過夜6．次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）碾碎組織（注意：切莫使組織凍融）7．放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管8．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9．渦旋震蕩5秒，充分混勻10．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11．加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液（ReagentD）12．渦旋震蕩5秒，充分混勻13．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項(xiàng)9）14．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻15．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g16．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g18．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）20．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g21．（選擇步驟）小心抽去上清液22．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻23．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里三、動(dòng)物細(xì)胞線粒體分離（細(xì)胞勻漿法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面，3．小心抽去清洗液4．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次5．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面6．放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7．手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落8．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9．全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管10．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g11．小心抽去上清液12．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞13．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g14．小心抽去上清液15．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16．渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群17．即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞（約80下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）18．將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g20．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g22．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）24．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g25．（選擇步驟）小心抽去上清液26．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻27．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里四、動(dòng)物細(xì)胞線粒體分離（化學(xué)處理法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面28．小心抽去清洗液3．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次4．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面5．放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6．手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落7．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8．全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管9．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g10．小心抽去上清液11．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA）12．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g13．小心抽去上清液14．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15．渦旋震蕩5秒，充分混勻16．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17．加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液（ReagentD）18．渦旋震蕩5秒，充分混勻19．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項(xiàng)9）20．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻21．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g22．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g24．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）26．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g27．（選擇步驟）小心抽去上清液28．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻29．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為10次（1克動(dòng)物組織或5X107細(xì)胞）或50次（200毫克動(dòng)物組織或1X107細(xì)胞）操作2．實(shí)際操作的動(dòng)物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200毫克動(dòng)物組織：試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3．所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進(jìn)行4．操作時(shí)，須戴手套5．操作時(shí)，須無(wú)菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）6．建議使用足夠的樣品量7．建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間8．通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會(huì)存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)9．通常孵育5分鐘達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會(huì)存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)10．對(duì)于難以裂解的細(xì)胞，例如HeLa細(xì)胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11．通常5X107細(xì)胞或1克動(dòng)物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12．如果需要計(jì)量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動(dòng)物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒－10006.315．線粒體正常活性測(cè)定方法是：CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16．線粒體內(nèi)外膜完整測(cè)定方法是：CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長(zhǎng)期穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?；钚?．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書- 動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動(dòng)物軟組織（肝或腦組織）和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強(qiáng)化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升活性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液（12028）或PBS緩沖溶液（12033）：用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液（12052）：用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管：用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管：用于保存線粒體4℃臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、動(dòng)物軟組織線粒體分離（組織勻漿法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和4毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí)）2．（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎組織5．放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管6．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7．渦旋震蕩5秒，充分混勻8．即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）9．將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管，10．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g11．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g13．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）15．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g16．（選擇步驟）小心抽去上清液17．加xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻18．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里二、動(dòng)物軟組織線粒體分離（化學(xué)處理法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí)）2．（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．移入一個(gè)液氮凍存管5．即刻放進(jìn)液氮罐過夜6．次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）碾碎組織（注意：切莫使組織凍融）7．放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管8．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9．渦旋震蕩5秒，充分混勻10．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11．加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液（ReagentD）12．渦旋震蕩5秒，充分混勻13．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項(xiàng)9）14．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻15．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g16．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g18．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）20．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g21．（選擇步驟）小心抽去上清液22．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻23．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里三、動(dòng)物細(xì)胞線粒體分離（細(xì)胞勻漿法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面，3．小心抽去清洗液4．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次5．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面6．放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7．手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落8．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9．全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管10．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g11．小心抽去上清液12．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞13．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g14．小心抽去上清液15．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16．渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群17．即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞（約80下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）18．將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g20．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g22．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）24．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g25．（選擇步驟）小心抽去上清液26．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻27．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里四、動(dòng)物細(xì)胞線粒體分離（化學(xué)處理法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面28．小心抽去清洗液3．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次4．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面5．放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6．手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落7．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8．全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管9．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g10．小心抽去上清液11．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA）12．放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g13．小心抽去上清液14．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15．渦旋震蕩5秒，充分混勻16．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17．加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液（ReagentD）18．渦旋震蕩5秒，充分混勻19．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項(xiàng)9）20．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻21．放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g22．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g24．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）26．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g27．（選擇步驟）小心抽去上清液28．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻29．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為10次（1克動(dòng)物組織或5X107細(xì)胞）或50次（200毫克動(dòng)物組織或1X107細(xì)胞）操作2．實(shí)際操作的動(dòng)物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200毫克動(dòng)物組織：試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3．所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進(jìn)行4．操作時(shí)，須戴手套5．操作時(shí)，須無(wú)菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）6．建議使用足夠的樣品量7．建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間8．通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會(huì)存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)9．通常孵育5分鐘達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會(huì)存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)10．對(duì)于難以裂解的細(xì)胞，例如HeLa細(xì)胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11．通常5X107細(xì)胞或1克動(dòng)物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12．如果需要計(jì)量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動(dòng)物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒－10006.315．線粒體正?；钚詼y(cè)定方法是：CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16．線粒體內(nèi)外膜完整測(cè)定方法是：CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長(zhǎng)期穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?；钚?．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 動(dòng)物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 動(dòng)物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
操作手冊(cè)
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- 動(dòng)物細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑是一種旨在使用考馬斯亮藍(lán)染色劑G－250與可溶性蛋白質(zhì)特異性結(jié)合產(chǎn)生色彩差異變化，通過比色測(cè)定其Zda吸收轉(zhuǎn)換來(lái)定量蛋白質(zhì)濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種蛋白質(zhì)（動(dòng)物、人體、植物、微生物等）的含量檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感，定量極ng確。技術(shù)背景考馬斯亮藍(lán)染料G－250（CoomassieBrilliantBlueG－250）是一種與蛋白質(zhì)結(jié)合的化學(xué)染料。它的三苯甲烷（triphenylmethane）基團(tuán)，主要與蛋白質(zhì)的非極性結(jié)構(gòu)結(jié)合。而它的陰離子磺酸鹽（anionsulfonate）基團(tuán)與蛋白質(zhì)分子的陽(yáng)離子和芳香類氨基酸，尤其是精氨酸和賴氨酸側(cè)鏈的結(jié)合。在酸性環(huán)境下，其Zda吸收波長(zhǎng)從465nm轉(zhuǎn)換為595nm。Bradford提出的方法的Zda優(yōu)點(diǎn)在于不受樣品中各種化學(xué)成分的干擾。較之Lowry，Hartree-Lowry和BCA技術(shù)，更為敏感。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書- 主要用途動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑是一種旨在通過機(jī)械或化學(xué)處理、差速和等密度離心方法，從動(dòng)物細(xì)胞中分離出活性完整而高度純化的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞器組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，純度可達(dá)99％。適合于各種動(dòng)物原代和培養(yǎng)細(xì)胞（人體、老鼠、兔子等）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的制備。可以被用于細(xì)胞色素P450系統(tǒng)外源化合物（xenobiotics）代謝、脂類代謝、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白和腔內(nèi)蛋白等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量高。技術(shù)背景內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmicreticulum；ER）是真核生物的細(xì)胞器組分，構(gòu)成細(xì)胞內(nèi)小管（tubules）、囊泡（vesicles）和小池（cisternae/sac）相互連接的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，負(fù)責(zé)蛋白轉(zhuǎn)譯、折疊和轉(zhuǎn)運(yùn)成為細(xì)胞膜成分（例如跨膜受體和其它整合膜蛋白等）或分泌型蛋白（例如消化性酶），負(fù)責(zé)鈣離子區(qū)隔（sequestration），以及糖原、固醇類和其它大分子的生產(chǎn)和儲(chǔ)存等功能。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分成三種：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（Roughendoplasmicreticulum；RER）、滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（Smoothendoplasmicreticulum；SER）和肌質(zhì)網(wǎng)（sarcoplasmicreticulum；SR）。根據(jù)細(xì)胞代謝的需要，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)會(huì)互相轉(zhuǎn)換。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通過核糖體合成蛋白質(zhì)并分類；滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行固醇、碳水化合物和藥物代謝等。肌質(zhì)網(wǎng)的主要功能為儲(chǔ)存和釋放鈣離子。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的常用手段之一：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂組織細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
報(bào)價(jià)單
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- 動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒
- 主要用途動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑是一種旨在通過機(jī)械或化學(xué)處理、差速和等密度離心方法，從動(dòng)物細(xì)胞中分離出活性完整而高度純化的高爾基細(xì)胞器組分的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，純度可達(dá)99％。適合于各種動(dòng)物細(xì)胞，包括人體細(xì)胞等的高爾基體的制備?？梢员挥糜谑荏w循環(huán)、糖蛋白和脂蛋白合成，以及抗體釋放機(jī)制等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量高。技術(shù)背景高爾基體（Golgiapparatus或Golgibodies），又稱為高爾基復(fù)合體（Golgicomplex），是一種細(xì)胞器，存在于大多數(shù)真核生物細(xì)胞中。高爾基體由扁平膜結(jié)合的高爾基堆（stacks），即小池（cisternae）組成，約有4至8層，分成3個(gè)功能區(qū)：順面、中層、反面等，進(jìn)一步地構(gòu)成細(xì)胞膜、分泌泡、內(nèi)涵體等。高爾基體整合各種大分子進(jìn)行加工、分類和包裝，然后分門別類地送到細(xì)胞特定的部位或分泌到細(xì)胞外。高爾基體參與糖蛋白質(zhì)的糖基化、碳水化合物的合成、蛋白質(zhì)的分泌、膜轉(zhuǎn)化、溶酶體形成的細(xì)胞活動(dòng)。高爾基體的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的常用手段之一：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂組織細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得高爾基體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的高爾基體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2015-01-14 00:00
應(yīng)用文章
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- 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定組織線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織（動(dòng)物、人體等）內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體純化。Rhod-2，羅丹明123（rhodamine123）的衍生產(chǎn)物，一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光，同時(shí)其正電荷特性，特異性地聚集在線粒體里，由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm，來(lái)定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀（22℃）：激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm準(zhǔn)備好純化的線粒體樣品，置于冰槽里融化測(cè)定開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板，標(biāo)記為：線粒體樣品孔、空白對(duì)照孔（不含線粒體）、Zda對(duì)照孔（不含線粒體）移取100微升純化線粒體樣品（100微克）到線粒體樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板，混勻室溫下（22℃），孵育30分鐘，避免光照放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘，避免光照即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀：獲得相對(duì)熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【（樣品RFU－空白對(duì)照孔R(shí)FU）÷（Zda對(duì)照孔R(shí)FU－樣品RFU）】X570（納摩爾；解離常數(shù)）=納摩爾/100微克線粒體注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 冰凍切片組織堿性磷酸酶活性染色試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途冰凍切片組織堿性磷酸酶活性染色試劑是一種旨在使用偶聯(lián)偶氮技術(shù)，在底物存在的情況下，分析組織樣本中堿性磷酸酶表達(dá)，而呈現(xiàn)亮紅色沉淀現(xiàn)象的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于動(dòng)物組織冰凍切片，同時(shí)也適合原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的酶活性檢測(cè)。尤其可用于骨組織病理生理的研究和干細(xì)胞分化能力的鑒定。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，靈敏牢固，顯色清晰。技術(shù)背景堿性磷酸酶（ALKALINEPHOSPHATASE）在堿性環(huán)境下催化各種醇和酚的磷酸酯水解，存在于活躍運(yùn)輸?shù)哪ど?，如毛?xì)血管及毛細(xì)血管的動(dòng)脈部分的內(nèi)皮，腎近曲小管壁邊緣和小腸上皮的紋狀緣，胎盤組織，未分化的干細(xì)胞等表達(dá)含量Z為豐富。它與骨質(zhì)的形成，維持細(xì)胞內(nèi)磷酸酶的濃度，以及與經(jīng)膜吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)過程有關(guān)。偶聯(lián)偶氮技術(shù)的基本原理為堿性磷酸酶水解底物（磷酸萘酯）釋放出萘酚，立即為重氮鹽所捕獲而成為不溶性有色的偶氮染料。實(shí)驗(yàn)Z初（1944）應(yīng)用β-萘磷酸鹽作為底物，釋放出的萘酚與重氮α-萘胺偶聯(lián)，在酶的活動(dòng)處形成有色沉淀。Burstone（1962）推薦使用替代萘酚，如萘酚AS-MX磷酸鹽。重氮鹽有很多種，但較適宜的有FastblueRR，F(xiàn)astredTR，F(xiàn)astvioletB，F(xiàn)astblueVRT和FastblackB。偶聯(lián)偶氮技術(shù)孵育時(shí)間短；穩(wěn)定，靈敏；在正常組織中因無(wú)萘酚，故不需要對(duì)照；反應(yīng)產(chǎn)物為偶氮染料難以溶解，不易彌散因而圖象清晰。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-11 17:46
操作手冊(cè)
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- 真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書
- 真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-05-04 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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- 活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光染料特異性地聚集在線粒體，并呈現(xiàn)紅色，用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種線粒體（動(dòng)物、人體、昆蟲等）的形態(tài)觀察、活性探測(cè)和定位標(biāo)記。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，活體檢測(cè)，分辨率高，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細(xì)胞中，如動(dòng)物的心肌，肝，腎等器官和組織的細(xì)胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取，或從組織培養(yǎng)細(xì)胞中提取。在光學(xué)顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細(xì)線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED，是一種含有硫醇（Thiol）氯甲基基團(tuán)的熒光染料，自由通過細(xì)胞膜，選擇性地聚集在線粒體。它可以對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行直接染色，在580nm波長(zhǎng)可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位，以檢測(cè)線粒體活性。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 動(dòng)物硬組織線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 主要用途動(dòng)物硬組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動(dòng)物硬組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種動(dòng)物硬組織（心臟或肌肉）的線粒體的制備?？梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強(qiáng)化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升酶解液（ReagentF）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和酶解液（ReagentF）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證12月用戶自備15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管：用于保存線粒體的容器4℃臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2015-09-11 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2015-08-26 00:00
課件
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- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）
- 動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]
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2014-12-19 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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- 組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織谷氨酰胺酶（glutaminase）活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）還原后吸光峰值的，即采用光度法來(lái)測(cè)定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品（動(dòng)物、人體、昆蟲等）谷氨酰胺酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶（glutaminase；EC3.5.1.2）是一種氨基酸水解酶（amidohydrolase），將谷氨酰胺脫氨基（deaminating）轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性：其功能在肝細(xì)胞中產(chǎn)生的氨，用于合成尿素；在腎小管上皮細(xì)胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌，調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡；同時(shí)在膠質(zhì)細(xì)胞（glialcell）和腸細(xì)胞中也有表達(dá)。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛，例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等。基于底物谷氨酰胺在谷氨酰胺酶酶的作用下，轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣，進(jìn)而在谷氨酸脫氫酶的催化下，伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotide；NAD＋）轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH），產(chǎn)生的吸光峰值的變化（340nm波長(zhǎng)），來(lái)定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-08-25 00:00
課件
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- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-12-31 00:00
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