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動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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本文由 上海一基實業(yè)有限公司 整理匯編
2024-09-17 19:14 578閱讀次數(shù)
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動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2024-09-17 19:14
專利
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-19 00:00
課件
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物 II 活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書免費下載,下載后方可查看??![詳細]
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2018-10-01 10:01
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測定與ATP合成對應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測。可用于心肌、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V,通常稱為ATP合成酶(ATPsynthase)、F型ATP酶(FtypeATPase)和F1F0ATP酶(F1F0ATPase),是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD,含有十六個亞單位,其中兩個:ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個結(jié)構(gòu)域:F0為質(zhì)子通道,由幾個膜蛋白構(gòu)成,包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP(oligomycinsensitiveconferringprotein)等;和F1催化活性結(jié)構(gòu)域,由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時,呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì),激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域,促使ATP合成。該酶異常會導致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?;贏TP,在寡霉素參與下,受到F1F0ATP酶的水解,進而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm),來定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升專性液(ReagentE)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于光度分析的容器分光光度儀:用于光度分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentB)注意避光。然后進行下列操作。測定準備準備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為340nm,間隔30秒,讀數(shù)11次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentA)室溫下均衡溫度背景對照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為背景空對照:340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品總活性讀數(shù):340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測定實驗開始前,移取100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)到1.5毫升離心管,加入20微升專性液(ReagentE),混勻后,放進30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測樣品上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品非特異活性讀數(shù):340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計算樣品活性1)樣品活性(總活性和非特異活性)【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾NADH/分鐘2)樣品特異活性樣品總活性-樣品非特異活性=樣品特異活性[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測??捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-CoenzymeQReductase;SuccinateDehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個亞單位,包括共價結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide;FAD)和三個鐵硫ZX(Fe-Sclusters),以及細胞色素b亞單位,其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進行呼吸鏈傳遞。該酶異常會導致嗜鉻細胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征?;阽晁岬孜铮ㄟ^琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm波長),由此定量測定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;緩沖液(ReagentA)室溫預(yù)熱;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD)注意避光。然后進行下列操作。測定準備準備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零背景對照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為背景空對照:600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為樣品活性讀數(shù):600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計算樣品活性【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X21.8(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書
- CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)試劑盒使用說明書
- 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)試劑盒使用說明書[詳細]
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2014-09-01 00:00
選購指南
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純化線粒體呼吸控制率(RCR)定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途純化線粒體呼吸控制率(RCR)定量檢測試劑是一種旨在通過極譜法檢測系統(tǒng)(polarographicsystem)測定新鮮活體線粒體在ADP存在(III態(tài)呼吸)與否(IV態(tài)呼吸)的情況下溶解氧(dissolvedoxygen)的消耗差異,即呼吸控制率(RCR),以評價線粒體結(jié)構(gòu)和功能完整性以及氧化磷酸化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的??梢员挥糜诰€粒體生理功能和藥物作用機制等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體。線粒體結(jié)構(gòu)完整,功能正常,底物充分,電子傳遞形成的質(zhì)子梯度不斷被消耗,電子得以順暢傳遞,氧氣快速消耗,其耗氧率大,為III態(tài)呼吸。ADP耗竭,質(zhì)子梯度不能消耗,阻礙電子傳遞,氧氣消耗減少,為IV態(tài)呼吸。呼吸控制率(respiratorycontrolratio或respiratorycontrolindex;RCR),又稱呼吸調(diào)節(jié)比,是指III態(tài)(加入ADP)的呼吸速率與IV態(tài)(ADP耗竭)的呼吸速率之比。正常線粒體的RCR為3至10:RCR降低意味著線粒體ATP合成功能損傷,呼吸障礙;RCR意味著細胞活動旺盛,代謝加快。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液(ReagentA)毫升態(tài)底物液(ReagentB)微升態(tài)底物液(ReagentC)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀:用于測定溶解氧濃度實驗步驟實驗開始前,制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用;同時將-20℃冰箱里的試劑融化,并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進行下列操作。1.加入xx毫升介質(zhì)液(ReagentA)到反應(yīng)玻璃槽2.使用微型磁力子攪拌,充分混勻3.密封反應(yīng)槽[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-19 00:00
操作手冊
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純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個單體組成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升緩沖液(ReagentC)XX毫升反應(yīng)液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升陰性液(ReagentF)XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentD)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸;底物液(ReagentE),避免光照;有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器4℃(微型)臺式離心機:用于樣品處理DOUNCE勻漿器:用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)物孵育比色皿:用于比色測定的容器分光光度儀:用于比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后進行下列操作。一、樣品準備手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定200毫克組織重量(選擇步驟)放進預(yù)冷的15毫升錐形離心管(選擇步驟)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(選擇步驟)抽去清洗液移入到一個液氮凍存管即刻放進液氮罐過夜次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融)放進一個15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)渦旋震蕩5秒,充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約20至40下)(注意:參見注意事項8)將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混勻顆粒群移取10微升進行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1)放進-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準備準備好待測樣品,置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentC)在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放進25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(正鐵細胞色素C-氧化還原酶)elisa試劑盒使用說明書
- 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(正鐵細胞色素C-氧化還原酶)elisa試劑盒使用說明書[詳細]
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2014-02-14 00:00
應(yīng)用文章
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呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書
- 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2015-04-29 00:00
安裝說明
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呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測定試劑盒
- 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測定試劑盒[詳細]
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2015-04-29 00:00
產(chǎn)品樣冊
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呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級熒光測定試劑盒
- 主要用途呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑是一種旨在通過透膜熒光染色劑二氯熒光乙酰乙酸鹽,在線粒體氧化條件下,選擇性阻止膜電位,所產(chǎn)生的熒光,來定量檢測線粒體內(nèi)膜電位依賴性活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的??梢员挥糜诰€粒體功能、氧化激發(fā)和YZ機理等的研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導致細胞衰老或凋亡。2',7'-二氯熒光乙酰乙酸鹽(2',7'-dichlorofluoresceindiacetate,DCFH-DA)一種完全自由通過細胞膜的染色劑。一旦被過氧化氫、過氧化基、過氧亞硝基陰離子等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測定線粒體活性氧族的濃度。三氟甲氧基苯腙羧基氰化物(carbonylcyanide4-rifluoromethoxyhenylhydrazone;FCCP)使線粒體膜化學離子梯度消失。[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書
- 動物細胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,可以被用于線粒體酶活性、細胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細胞器的分離是現(xiàn)代細胞生物學研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過機械或化學方法破裂細胞;第二,通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細胞器;第三,通過高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液(12028)或PBS緩沖溶液(12033):用于清理細胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于細胞脫離完全細胞培養(yǎng)液(12052):用于中和胰蛋白酶的細胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管:用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管:用于細胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管:用于保存線粒體4℃臺式離心機:用于沉淀細胞4℃超速離心機:用于分離細胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細胞實驗步驟一、動物軟組織線粒體分離(組織勻漿法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標記為裂解工作液,放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實驗前**使動物空腹12至24小時)2.(選擇步驟)放進預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎組織5.放進一個預(yù)冷的15毫升錐形離心管6.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7.渦旋震蕩5秒,充分混勻8.即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化組織(約80下)(注意:參見注意事項8)9.將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管,10.放進4℃臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g11.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞12.放進4℃超速離心機離心10分鐘,速度為10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(選擇步驟)放進4℃超速離心機再次離心5分鐘,速度為10000g16.(選擇步驟)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻18.即刻移入1.5毫升離心管,放進-70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離(化學處理法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標記為裂解工作液,放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實驗前**使動物空腹12至24小時)2.(選擇步驟)放進預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一個液氮凍存管5.即刻放進液氮罐過夜6.次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎組織(注意:切莫使組織凍融)7.放進一個15毫升錐形離心管8.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9.渦旋震蕩5秒,充分混勻10.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11.加入預(yù)冷的xx微升強化液(ReagentD)12.渦旋震蕩5秒,充分混勻13.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見注意事項9)14.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻15.放進4℃臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g16.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞17.放進4℃超速離心機離心10分鐘,速度為10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(選擇步驟)放進4℃超速離心機再次離心5分鐘,速度為10000g21.(選擇步驟)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻23.即刻移入1.5毫升離心管,放進-70℃冰箱里三、動物細胞線粒體分離(細胞勻漿法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標記為裂解工作液,放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1.準備5至10瓶75cm2細胞培養(yǎng)瓶的細胞(5X107),直至細胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個細胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重復(fù)實驗步驟2至3一次5.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面6.放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7.手擊震動培養(yǎng)瓶,使細胞脫落8.分別加入10毫升用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液9.全部移入到一個50毫升錐形離心管10.放進臺式離心機離心10分鐘,速度為200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA),混勻細胞13.放進臺式離心機離心10分鐘,速度為300g14.小心抽去上清液15.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16.渦旋震蕩5秒,充分混勻細胞顆粒群17.即刻放進預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化細胞(約80下)(注意:參見注意事項8)18.將所有細胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19.放進4℃臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g20.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞21.放進4℃超速離心機離心10分鐘,速度為10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(選擇步驟)放進4℃超速離心機再次離心5分鐘,速度為10000g25.(選擇步驟)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻27.即刻移入1.5毫升離心管,放進-70℃冰箱里四、動物細胞線粒體分離(化學處理法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標記為裂解工作液,放進冰槽里備用。然后進行下列操作。1.準備5至10瓶75cm2細胞培養(yǎng)瓶的細胞(5X107),直至細胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個細胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面28.小心抽去清洗液3.重復(fù)實驗步驟2至3一次4.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面5.放進37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6.手擊震動培養(yǎng)瓶,使細胞脫落7.分別加入10毫升用戶自備的完全細胞培養(yǎng)液8.全部移入到一個50毫升錐形離心管9.放進臺式離心機離心10分鐘,速度為200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)12.放進臺式離心機離心10分鐘,速度為300g13.小心抽去上清液14.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15.渦旋震蕩5秒,充分混勻16.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17.加入預(yù)冷的xx微升強化液(ReagentD)18.渦旋震蕩5秒,充分混勻19.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見注意事項9)20.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻21.放進4℃臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g22.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細胞核和未溶解的細胞23.放進4℃超速離心機離心10分鐘,速度為10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(選擇步驟)放進4℃超速離心機再次離心5分鐘,速度為10000g27.(選擇步驟)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻29.即刻移入1.5毫升離心管,放進-70℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為10次(1克動物組織或5X107細胞)或50次(200毫克動物組織或1X107細胞)操作2.實際操作的動物組織重量或細胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動物組織:試劑用量是標準用量的五分之一3.所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進行4.操作時,須戴手套5.操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建議使用足夠的樣品量7.建議嚴格控制操作時間8.通常勻化次數(shù)為80下達到80%的細胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細胞裂解程度:完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)9.通常孵育5分鐘達到80%的細胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細胞裂解程度:完整細胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)10.對于難以裂解的細胞,例如HeLa細胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11.通常5X107細胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12.如果需要計量線粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線粒體將分解13.本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14.如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動物細胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒-10006.315.線粒體正?;钚詼y定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細胞色素吸收峰譜等16.線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17.本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18.本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?;钚?.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細胞等,本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機,方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標準品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機:用于樣品制備比色皿或酶標板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標儀:用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進行下列操作。樣品準備選擇一:血漿樣品1.準備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準備好不含抗凝劑的儲存管2.抽取2毫升血液,置于儲存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準備1.準備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標板上做好相應(yīng)標記:背景對照,標準品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標準品孔(加入50微升標準品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動96孔酶標板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進酶標儀,置零8.取出酶標板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動酶標板10.即刻放進酶標儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計算樣本活性=樣本OD值/標準OD值*標品濃度[詳細]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊
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組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I(CARNITINEPALMITOYL-TRANSFERASEI)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過肉堿和脂酰輔酶A以及特定YZ劑反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及Z后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O,并釋放能量等四個階段。大于10個碳(C10)的活化型長鏈脂酰輔酶A是不能直接透過線粒體內(nèi)膜,需要借助肉堿(camitine),即L-3羥-4-三甲基銨丁酸,而被轉(zhuǎn)運入線粒體內(nèi),在線粒體內(nèi)膜的外側(cè)及內(nèi)側(cè)分別有肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(carnitinepalmitoyltransferase;CPT;EC2.3.1.21)I和Ⅱ。位于內(nèi)膜外側(cè)的酶Ⅰ,促進脂酰CoA轉(zhuǎn)化為脂酰肉堿,后者可借助線粒體內(nèi)膜上的轉(zhuǎn)位酶(或載體),轉(zhuǎn)運到內(nèi)膜內(nèi)側(cè),然后,在酶Ⅱ催化下脂酰肉堿釋放肉堿到胞漿,留下脂酰CoA。由此位于胞漿的活化脂肪酸―脂酰CoA穿過線粒體內(nèi)膜進入基質(zhì)而被氧化分解。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶缺失癥導致機體無法代謝脂肪酸。基于肉堿和脂酰輔酶A在丙二酰輔酶A(malonylCoA)存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析丙二酰輔酶A敏感性肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I的特異活性。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后吸光峰值的,即采用光度法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體、昆蟲等)谷氨酰胺酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶(glutaminase;EC3.5.1.2)是一種氨基酸水解酶(amidohydrolase),將谷氨酰胺脫氨基(deaminating)轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性:其功能在肝細胞中產(chǎn)生的氨,用于合成尿素;在腎小管上皮細胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌,調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡;同時在膠質(zhì)細胞(glialcell)和腸細胞中也有表達。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛,例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等?;诘孜锕劝滨0吩诠劝滨0访该傅淖饔孟?,轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣,進而在谷氨酸脫氫酶的催化下,伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD+)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm波長),來定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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