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2018-11-18 10:00 379閱讀次數(shù)

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• 可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑是一種旨在使用化學(xué)穩(wěn)定方法，使可溶性變性純化蛋白重新折疊，恢復(fù)其蛋白功能和活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種可溶性純化蛋白，尤其是細(xì)菌內(nèi)重組蛋白（融合蛋白）以及鹽酸胍或Sarkosyl可溶性處理的包涵體蛋白?？珊罄m(xù)用于蛋白功能、酶活性等分析。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，參數(shù)優(yōu)化，操作便捷，復(fù)性效果理想。技術(shù)背景在蛋白純化和融化過(guò)程中，特別是包涵體蛋白，變性劑（denaturant）提供了Z有效的手段，其獲得的純化蛋白屬于變性蛋白（denaturedprotein）。為了使變性蛋白恢復(fù)為天然蛋白（nativeprotein），即具有蛋白質(zhì)的自然結(jié)構(gòu)和活性，需要進(jìn)行蛋白復(fù)性（renaturation）或重新折疊（refolding）。蛋白復(fù)性是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，諸如pH、離子強(qiáng)度、低分子添加劑、氧化還原電位（redoxpotential）和溫度等物化因子，影響體外蛋白復(fù)性的效率。通常體外復(fù)性的方法包括稀釋法和緩沖交換法。前者通過(guò)化學(xué)處理，而后者采用物理方法（例如透析、膜過(guò)濾（diafiltration）、凝膠過(guò)濾層析（gel-filtrationchromatography）等，以達(dá)到蛋白復(fù)性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜堿（sulfobetaine）、去垢劑、變性劑等將影響化學(xué)稀釋復(fù)性處理的效率。產(chǎn)品內(nèi)容穩(wěn)定液（ReagentA）20毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器恒溫?fù)u床：用于反應(yīng)孵育實(shí)驗(yàn)步驟準(zhǔn)備好可溶性純化變性蛋白樣品移取50微升蛋白樣品（10毫克/毫升）到1.5毫升離心管加入950微升穩(wěn)定液（ReagentA）放進(jìn)20℃恒溫?fù)u床孵育2小時(shí)，速度為200RPM（選擇步驟）移取10微升進(jìn)行生物檢測(cè)，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)等確定復(fù)性蛋白活性值即刻放進(jìn)－70℃冰箱里保存注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)須戴手套本產(chǎn)品的復(fù)性效率達(dá)80％以上建議與本公司系列包涵體蛋白溶解試劑盒配套使用由于樣品的特異性，用戶可以優(yōu)化溫度、孵育時(shí)間、蛋白濃度，以獲得Zda復(fù)性效率如果復(fù)性效率過(guò)低，建議使用可溶性包涵體蛋白復(fù)性（物理透析）試劑盒－HL30044.5如果獲得滿意的復(fù)性效果，用戶可以按比例擴(kuò)大復(fù)性容量本公司提供系列包涵體蛋白處理試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)蛋白酶污染[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 動(dòng)物細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  主要用途Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑是一種旨在使用考馬斯亮藍(lán)染色劑G－250與可溶性蛋白質(zhì)特異性結(jié)合產(chǎn)生色彩差異變化，通過(guò)比色測(cè)定其Zda吸收轉(zhuǎn)換來(lái)定量蛋白質(zhì)濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種蛋白質(zhì)（動(dòng)物、人體、植物、微生物等）的含量檢測(cè)。產(chǎn)品即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感，定量極ng確。技術(shù)背景考馬斯亮藍(lán)染料G－250（CoomassieBrilliantBlueG－250）是一種與蛋白質(zhì)結(jié)合的化學(xué)染料。它的三苯甲烷（triphenylmethane）基團(tuán)，主要與蛋白質(zhì)的非極性結(jié)構(gòu)結(jié)合。而它的陰離子磺酸鹽（anionsulfonate）基團(tuán)與蛋白質(zhì)分子的陽(yáng)離子和芳香類氨基酸，尤其是精氨酸和賴氨酸側(cè)鏈的結(jié)合。在酸性環(huán)境下，其Zda吸收波長(zhǎng)從465nm轉(zhuǎn)換為595nm。Bradford提出的方法的Zda優(yōu)點(diǎn)在于不受樣品中各種化學(xué)成分的干擾。較之Lowry，Hartree-Lowry和BCA技術(shù)，更為敏感。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 動(dòng)物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  動(dòng)物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途動(dòng)物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過(guò)低速差速離心和化學(xué)滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學(xué)破膜和高速差速離心的方法，直接從動(dòng)物血細(xì)胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細(xì)胞器，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結(jié)構(gòu)破裂而獲得線粒體內(nèi)活性蛋白酶系統(tǒng)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于人體和各種動(dòng)物全血（鼠、豬、羊等）中血小板線粒體可溶性總蛋白的制備。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究?？芍苯佑糜谔囟ǖ鞍缀罄m(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體中含有豐富的細(xì)胞色素氧化酶系統(tǒng)和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白等。通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞，進(jìn)而差速離心獲得線粒體，然后通過(guò)特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑防止裂解后線粒體內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留線粒體內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性，Z后進(jìn)行相關(guān)蛋白的獨(dú)立分析。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）500毫升裂解液（ReagentB）80毫升凈化液（ReagentC）20毫升強(qiáng)化液（ReagentD）10毫升保存液（ReagentE）200毫升破膜液（ReagentF）2毫升活性液（ReagentG）20微升上樣液（ReagentH）3毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentG）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器50毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器4℃臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作4℃超速離心機(jī)：用于樣品操作DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞超聲儀：用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟物理處理法實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為裂解工作液。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備1個(gè)無(wú)菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時(shí)內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動(dòng)的細(xì)胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細(xì)胞顆粒群松動(dòng)加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動(dòng)的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）放入含有上清液的離心管到臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動(dòng)的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺(tái)式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g可見(jiàn)白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放入臺(tái)式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時(shí)停止操作，須暫時(shí)放進(jìn)－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板加入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿幫勻化細(xì)胞（約10下）（注意：參見(jiàn)注意事項(xiàng)11）將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管（選擇步驟）置于超聲儀槍頭下，離心管在冰槽里（選擇步驟）超聲功率為60％（或150赫茲）猝擊10秒，間隙30秒，10個(gè)循環(huán)放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細(xì)胞放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時(shí)不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進(jìn)行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測(cè)1）移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳1）移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管2）加入20微升上樣液（ReagentH）3）渦旋震蕩15秒放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進(jìn)行電泳操作和西方雜交化學(xué)處理法實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為裂解工作液。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備1個(gè)無(wú)菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時(shí)內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動(dòng)的細(xì)胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細(xì)胞顆粒群松動(dòng)加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動(dòng)的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）（選擇步驟）放入含有上清液的離心管到臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g（選擇步驟）小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動(dòng)的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺(tái)式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g可見(jiàn)白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)，混勻細(xì)胞顆粒群放入臺(tái)式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時(shí)停止操作，須暫時(shí)放進(jìn)－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育2分鐘，期間渦旋震蕩5秒一次加入500微升預(yù)冷的強(qiáng)化液（ReagentD）渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育5分鐘，期間渦旋震蕩5秒二次（注意：參見(jiàn)注意事項(xiàng)12）加入5毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE），輕輕搖動(dòng)試管混勻放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細(xì)胞放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時(shí)不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進(jìn)行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測(cè)1．移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管加入20微升上樣液（ReagentH）渦旋震蕩15秒放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進(jìn)行電泳操作和西方雜交注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次（10至20毫升全血）操作其它實(shí)際操作的全血容量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如40毫升全血，試劑用量加倍操作時(shí)，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）操作時(shí)，須戴手套建議使用新鮮全血：2小時(shí)內(nèi)的全血為理想狀態(tài)，不要超過(guò)24小時(shí)全血樣品采集須使用全血樣品采集須使用EDTA二鉀血液抗凝液（12059.1）、ACD血液抗凝液（12059.4），或肝素鈉血液抗凝液（12059.5）建議使用足夠的樣品量血小板提取量因人而異；如果不足，建議增加全血量線粒體操作均須在4℃或以下?tīng)顟B(tài)下進(jìn)行建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間通常勻化次數(shù)為10下（或細(xì)胞顆粒群消失為止）達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)通常孵育5分鐘達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)物理處理法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理通常每毫升全血平均可獲得2X108血小板通常10毫升全血的血小板線粒體含量為10至25微克線粒體蛋白16．如果需檢測(cè)不可溶性線粒體蛋白，可保留線粒體裂解后的沉淀物，直接加入10微升上樣液（ReagentH）和10微升無(wú)離子水，然后繼續(xù)操作二的步驟3至6本公司提供系列線粒體試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)蛋白酶污染本產(chǎn)品經(jīng)鑒定蛋白萃取產(chǎn)量高本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純化程度高[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

  人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2015-05-29 00:00

  其它

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• 人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）的含量。l有效期：6個(gè)月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白（sTM）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本處理1.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過(guò)高，應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說(shuō)明書(shū)所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測(cè)不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測(cè)出。7.建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過(guò)期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測(cè)范圍：1.25ng/mL40ng/mL。2.靈敏度：Zdi檢測(cè)濃度小于0.1ng/mL。3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。說(shuō)明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別，如：檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說(shuō)明書(shū)僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到**的檢測(cè)結(jié)果。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人血栓前體蛋白（TpP）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人血栓前體蛋白（TpP）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人TpP單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的TpP與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人TpP，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，TpP濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中TpP濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：600ug/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成1200ug/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入1200ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品120、60、30、15、7.5、3.75、1.875、0ug/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)TpP含量即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的TpP檢測(cè)濃度小于1ug/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人TpP。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于9.7％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人血栓前體蛋白說(shuō)明書(shū)

  人血栓前體蛋白（TPP）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中血栓前體蛋白（TPP）的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血栓前體蛋白（TPP）水平。用純化的人血栓前體蛋白（TPP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血栓前體蛋白（TPP），再與HRP標(biāo)記的血栓前體蛋白（TPP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血栓前體蛋白（TPP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人血栓前體蛋白（TPP）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：2250μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1500μg/L，1000μg/L，500μg/L，250μg/L，125μg/L）。2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%檢測(cè)范圍：50μg/L-2000μg/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月FORRESEARCHUSEONLYHumanthrombusprecursorproteinDrugNamesGenericName：Humanthrombusprecursorprotein（TPP）ELISAKit.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofTPPconcentrationsinHumanserum,bloodplasma,andotherbiologicalfluids.PrincipleoftheassayThekitassayHumanTPPlevelinthesample，usePurifiedHumanTPPantibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddTPPtowells,CombinedTPPantibodywhichWithHRPlabeled,becomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofTPPinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard：2250μg/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent1.5ml×1bottle1.5ml×1bottle2-8℃HRP-Conjugatereagent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Samplediluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution（20ml×20fold）×1bottle（20ml×30fold）×1bottle2-8℃Specimenrequirements1.serum-coagulationatroomtemperature10-20mins，centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.2.plasma-usesuitedEDTAorcitrateorasananticoagulant,mix10-20mins,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.3.Urine-collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.TheOperationofHydrothoraxandcerebrospinalfluidReferencetoit.4.cellculturesupernatant-detectsecretorycomponents,collectsueasterilecontainer,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,detectthecompositionofcells,DilutcellsuspensionwithPBS（PH7.2-7.4）,Cellconcentrationreached1million/ml,repeatedfreeze-thawcycles,damagecellsandreleaseofintracellularcomponents,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant,Ifprecipitationappeared,Centrifugalagain.5.Tissuesamples-Aftercuttingsamples,checktheweight,addPBS（PH7.2-7.4）,Rapidlyfrozenwithliquidnitrogen,maintainsamplesat2-8℃aftermelting,addPBS（PH7.4）,HomogenizedbyhandorGrinders,centrifugation20-minatthespeedof2000-3000r.p.m.removesupernatant.6.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.7.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.DiluteandaddsampletoStandard:set10StandardwellsontheELISAplatescoated,addStandard100μltothefirstandthesecondwell,thenaddStandarddilution50μltothefirstandthesecondwell,mix;takeout100μlformthefirstandthesecondwellthenaddittothethirdandtheforthwellseparately.thenaddStandarddilution50μltothethirdandtheforthwell,mix;thentakeout50μlfromthethirdandtheforthwelldiscard,add50μltothefifthandthesixthwell,thenaddStandarddilution50μltothefifthandthesixthwell,mix;takeout50μlfromthefifthandthesixthwellandaddtotheseventhandtheeighthwell,thenaddStandarddilution50μltotheseventhandtheeighthwell,mix;takeout50μlfromtheseventhandtheeighthwellandaddtotheninthandthetenthwell,addStandarddilution50μltotheninthandthetenthwell,mix,takeout50μlfromtheninthandthetenthwelldiscard（addSample50μltoeachwellafterDiluting,（density:1500μg/L，1000μg/L，500μg/L，250μg/L，125μg/L）2.addsample：Setblankwellsseparately（blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame）.testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl（samplefinaldilutionis5-fold）,addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold（or20-fold）washsolutiondiluted30-fold（or20-fold）withdistilledwaterandreserve.5.washing：UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme：AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate：Operationwith3.8.washing：Operationwith5.9.color：AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction：AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction（thebluecolorchangetoyellowcolor）.11.assay：takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.Importantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.washingbufferwillCrystallizationseparation,itcanbeheatedthewaterhelpsdissolvewhendilute.Washingdoesnotaffecttheresult.3.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.addsamplewithin5min,ifthenumberofsampleismuch,recommendtouseVolley.4.ifthetestingmaterialcontentisexcessivelyhigher（ThesampleODisbiggerthanthefirststandardwell）,pleasediluteSample（n-fold）,Pleasediluenteandmultipliedbythedilutionfactor.（×n×5）.5.Closureplatemembraneonlylimitsthedisposableuse,toavoidcross-contamination.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.7.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.8.Allsamples,washingbufferandeachkindofreject首ldaccordingtoinfectivematerialprocess.9.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.Takethestandarddensityasthehorizontal,theODvalueforthevertical,drawthestandardcurveongraphpaper,FindoutthecorrespondingdensityaccordingtothesampleODvaluebytheSamplecurve,multipliedbythedilutionmultiple,orcalculatethestraightlineregressionequationofthestandardcurvewiththestandarddensityandtheODvalue,withthesampleODvalueintheequation,calculatethesampledensity,multipliedbythedilutionfactor,theresultisthesampleactualdensity.CalculateThischartforreferenceonlyAssayrange50μg/L-2000μg/LStorageandvalidity1．Storage：2-8℃.2．validity：sixmonths.[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

  人血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2024-10-08 05:27

  安裝說(shuō)明

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• 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠sEPCR單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的sEPCR與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠sEPCR，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，sEPCR濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中sEPCR濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1：5至10倍稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)sEPCR含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的sEPCR檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠sEPCR。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

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• 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（sEPCR）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人sEPCR單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的sEPCR與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人sEPCR，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，sEPCR濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中sEPCR濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：200ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1：20稀釋（取10ul，加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍）。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0n’g/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)sEPCR含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的sEPCR檢測(cè)濃度小于0.2ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人sEPCR。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 蛋白質(zhì)純化及復(fù)性

  蛋白質(zhì)純化及復(fù)性[詳細(xì)]

  2007-10-11 00:00

  應(yīng)用文章

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• 蛋白質(zhì)復(fù)性基本信息說(shuō)明

  蛋白質(zhì)因受某些物理或化學(xué)因素的影響，分子的空間構(gòu)象被破壞，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)發(fā)生改變并失去原有的生物學(xué)活性的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用（denaturation）。變性作用并不引起蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞，而是二級(jí)結(jié)構(gòu)以上的高級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞，變性后的蛋白質(zhì)稱為變性蛋白。包涵體復(fù)性，蛋白質(zhì)折疊，如果變性條件劇烈持久，蛋白質(zhì)的變性是不可逆的。如果變性條件不劇烈，這種變性作用是可逆的，說(shuō)明蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)的變化不大。這時(shí)，如果除去變性因素，在適當(dāng)條件下變性蛋白質(zhì)可恢復(fù)其天然構(gòu)象和生物活性，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的復(fù)性（renaturation）。例如胃蛋白酶加熱至80～90℃時(shí)，失去溶解性，也無(wú)消化蛋白質(zhì)的能力，如將溫度再降低到37℃，則又可恢復(fù)溶解性和消化蛋白質(zhì)的能力。分離步驟分離包含體并復(fù)性蛋白質(zhì)的操作步驟并不復(fù)雜，從破碎細(xì)胞開(kāi)始，然后將細(xì)胞勻漿離心，回收包含體后，加入變性劑溶解包含體，使之成為可溶性伸展態(tài)，再除去變性劑使表達(dá)產(chǎn)物折疊恢復(fù)天然構(gòu)象及活性。但在實(shí)際研究中發(fā)現(xiàn)，在體外折疊時(shí)，蛋白質(zhì)分子間由于存在大量錯(cuò)誤折疊和聚合，復(fù)性效率往往很低。究其原因，蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)雖然由其氨基酸順序決定，然而伸展肽鏈折疊為天然活性結(jié)構(gòu)的過(guò)程還受到周圍環(huán)境的影響。1995年，Karuppiah和Sharma發(fā)表文章，介紹了使用環(huán)糊精輔助碳酸酐酶B的復(fù)性［9］。環(huán)糊精由淀粉通過(guò)環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶降解制得，是由D-吡喃葡萄糖單元以α-1，4-糖苷鍵相互結(jié)合成互為椅式構(gòu)象的環(huán)狀低聚糖，其分子通常含有6～12個(gè)吡喃葡萄糖單元。有實(shí)用意義的是含6、7、8個(gè)吡喃葡萄糖單元的α、β、γ-環(huán)糊精，但α-環(huán)糊精空腔較小，γ-環(huán)糊精價(jià)格昂貴，常用的是β-環(huán)糊精［10］。環(huán)糊精的特征是能形成包絡(luò)化合物，客體分子從寬口端進(jìn)入其分子空腔。包絡(luò)物的形成主要靠非共價(jià)鍵相互作用如范德華力、氫鍵、疏水相互作用、幾何形狀匹配等。利用環(huán)糊精的疏水性空腔結(jié)合變性蛋白質(zhì)多肽鏈的疏水性位點(diǎn)，可以YZ其相互聚集失活，從而促進(jìn)肽鏈正確折疊為活性蛋白質(zhì)。1999年，Sundari等報(bào)道了用直鏈糊精輔助胰島素、碳酸酐酶和雞蛋白溶菌酶復(fù)性［11］，發(fā)現(xiàn)直鏈糊精基本上能夠模擬環(huán)糊精在輔助蛋白質(zhì)復(fù)性方面的作用，而且具有這樣一些優(yōu)點(diǎn)：直鏈糊精的螺旋結(jié)構(gòu)形成一個(gè)疏水性空管，可以結(jié)合更多的蛋白質(zhì)分子；在水中溶解度較高，有利于提高復(fù)性酶濃度和實(shí)驗(yàn)操作；價(jià)格比環(huán)糊精便宜，實(shí)際應(yīng)用前景廣闊。[詳細(xì)]

  2018-09-28 10:00

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• 細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  主要用途細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑是一種旨在使用化學(xué)方法快速充分裂解細(xì)胞，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，通過(guò)超速離心，收集所有細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞（動(dòng)物、人體）等樣品?？芍苯佑糜诤怂岬鞍捉Y(jié)合凝膠遷移電泳分析（EMSA）、DNA足跡法檢測(cè)、特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，收集效果好。技術(shù)背景通過(guò)特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑可以防止裂解后細(xì)胞內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 大鼠II型膠原蛋白（Collagen II）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com大鼠II型膠原蛋白（CollagenII）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠CollagenII單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CollagenII與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠CollagenII，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，CollagenII濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CollagenII濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1000ng/ml2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管7管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入1000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第六管中吸出300ul棄去。第七管為空白對(duì)照。加上原液管總共八管。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CollagenII含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CollagenII檢測(cè)濃度小于10ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠CollagenII。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

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• 人尾加壓素II（Urotensin II）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com人尾加壓素II（UrotensinII）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人UrotensinII單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的UrotensinII與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人UrotensinII，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，UrotensinII濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中UrotensinII濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：250pg/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成250pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入250pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品25、12.5、6.25、3.12、1.56、0.78、0.39、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)UrotensinII含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的UrotensinII檢測(cè)濃度小于0.2pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人UrotensinII。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于9.6％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 小鼠II型膠原（Collagen II）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  小鼠II型膠原（CollagenII）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CollagenII單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CollagenII與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗小鼠CollagenII，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，CollagenII濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CollagenII濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1000ng/ml1瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管7管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入1000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第六管中吸出300ul棄去。第七管為空白對(duì)照。加上原液管總共八管。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CollagenII含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CollagenII檢測(cè)濃度小于8ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠CollagenII。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人II型膠原（Collagen II）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  人II型膠原（CollagenII）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CollagenII單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CollagenII與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人CollagenII，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，CollagenII濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CollagenII濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1000ng/ml1瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管7管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入1000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第六管中吸出300ul棄去。第七管為空白對(duì)照。加上原液管總共八管。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CollagenII含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CollagenII檢測(cè)濃度小于8ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人CollagenII。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人血管生成素II （Ang II）ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

  人血管生成素II(AngII)ELISA試劑盒試驗(yàn)原理：AngII試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知AngII濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將AngII和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中AngII的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人血管生成素II(AngII)ELISA試劑盒操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人血管生成素II(AngII)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的AngII標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的AngII含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-400pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 大鼠體聚試劑盒說(shuō)明書(shū)

  大鼠多配體聚糖酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)使用目的：本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中多配體聚糖(Syndecan1）含量。實(shí)驗(yàn)原理大鼠體聚試劑盒說(shuō)明書(shū)應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠多配體聚糖(Syndecan1）水平。用純化的大鼠多配體聚糖(Syndecan1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入多配體聚糖(Syndecan1），再與HRP標(biāo)記的多配體聚糖(Syndecan1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的多配體聚糖(Syndecan1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠多配體聚糖(Syndecan1）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（8ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。4ng/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2ng/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1ng/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.5ng/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.25ng/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算大鼠體聚試劑盒說(shuō)明書(shū)以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒

  大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 21:52

  專利

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