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2015-05-19 00:00 217閱讀次數(shù)

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• 動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-19 00:00

  操作手冊

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• 動物硬組織線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途動物硬組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動物硬組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種動物硬組織（心臟或肌肉）的線粒體的制備?？梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強(qiáng)化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升酶解液（ReagentF）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和酶解液（ReagentF）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證12月用戶自備15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管：用于保存線粒體的容器4℃臺式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動物軟組織（肝或腦組織）和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，活性保證，可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強(qiáng)化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升活性液（ReagentF）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentF）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液（12028）或PBS緩沖溶液（12033）：用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（12024）：用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液（12052）：用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管：用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管：用于保存線粒體4℃臺式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、動物軟組織線粒體分離（組織勻漿法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和4毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實(shí)驗(yàn)前**使動物空腹12至24小時(shí)）2．（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．即刻用刀片切碎組織5．放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管6．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7．渦旋震蕩5秒，充分混勻8．即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化組織（約80下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）9．將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管，10．放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g11．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g13．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）15．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g16．（選擇步驟）小心抽去上清液17．加xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻18．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離（化學(xué)處理法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定組織重量（注意：實(shí)驗(yàn)前**使動物空腹12至24小時(shí)）2．（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3．（選擇步驟）加入適量的（1克組織需要xx毫升）清理液（ReagentA）清洗1次4．移入一個(gè)液氮凍存管5．即刻放進(jìn)液氮罐過夜6．次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）碾碎組織（注意：切莫使組織凍融）7．放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管8．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9．渦旋震蕩5秒，充分混勻10．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11．加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液（ReagentD）12．渦旋震蕩5秒，充分混勻13．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項(xiàng)9）14．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻15．放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g16．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g18．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）20．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g21．（選擇步驟）小心抽去上清液22．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻23．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里三、動物細(xì)胞線粒體分離（細(xì)胞勻漿法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面，3．小心抽去清洗液4．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次5．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面6．放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落8．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9．全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管10．放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g11．小心抽去上清液12．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞13．放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g14．小心抽去上清液15．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16．渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群17．即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞（約80下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）18．將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19．放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g20．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g22．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）24．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g25．（選擇步驟）小心抽去上清液26．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻27．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里四、動物細(xì)胞線粒體分離（化學(xué)處理法）實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的活性液（ReagentF）凍融，然后移出xx微升活性液（ReagentF）、xx毫升凈化液（ReagentC）和xx毫升的裂解液（ReagentB）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標(biāo)記為裂解工作液，放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1．準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞（5X107），直至細(xì)胞生長鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2．分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面28．小心抽去清洗液3．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次4．加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面5．放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6．手擊震動培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫落7．分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8．全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管9．放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為200g10．小心抽去上清液11．加入xx毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA）12．放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為300g13．小心抽去上清液14．加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15．渦旋震蕩5秒，充分混勻16．在冰槽里孵育2分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17．加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液（ReagentD）18．渦旋震蕩5秒，充分混勻19．在冰槽里孵育5分鐘，其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒（注意：參見注意事項(xiàng)9）20．加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE），用手混勻21．放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g22．小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23．放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g24．小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25．（選擇步驟）加入預(yù)冷的xx毫升保存液（ReagentE）26．（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g27．（選擇步驟）小心抽去上清液28．加入xx毫升保存液（ReagentE），充分混勻29．即刻移入1.5毫升離心管，放進(jìn)－70℃冰箱里注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為10次（1克動物組織或5X107細(xì)胞）或50次（200毫克動物組織或1X107細(xì)胞）操作2．實(shí)際操作的動物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如200毫克動物組織：試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3．所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進(jìn)行4．操作時(shí)，須戴手套5．操作時(shí)，須無菌操作，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）6．建議使用足夠的樣品量7．建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間8．通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)9．通常孵育5分鐘達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)10．對于難以裂解的細(xì)胞，例如HeLa細(xì)胞，采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11．通常5X107細(xì)胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12．如果需要計(jì)量線粒體，稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成，否則線粒體將分解13．本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g，可以提高粗提的線粒體純化程度，但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14．如果需要獲得99％以上純度的線粒體，使用動物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒－10006.315．線粒體正?；钚詼y定方法是：CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16．線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是：CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17．本公司提供線粒體套餐：ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18．本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正常活性4．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-14 00:00

  應(yīng)用文章

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• 活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在線粒體，并呈現(xiàn)紅色，用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種線粒體（動物、人體、昆蟲等）的形態(tài)觀察、活性探測和定位標(biāo)記。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，活體檢測，分辨率高，操作簡捷，性能穩(wěn)定，滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細(xì)胞中，如動物的心肌，肝，腎等器官和組織的細(xì)胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取，或從組織培養(yǎng)細(xì)胞中提取。在光學(xué)顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細(xì)線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED，是一種含有硫醇（Thiol）氯甲基基團(tuán)的熒光染料，自由通過細(xì)胞膜，選擇性地聚集在線粒體。它可以對活細(xì)胞進(jìn)行直接染色，在580nm波長可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位，以檢測線粒體活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子?；阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長）的變化，來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升緩沖液（ReagentC）XX毫升反應(yīng)液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升陰性液（ReagentF）XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentD）含有毒性物質(zhì)，避免直接用手接觸；底物液（ReagentE），避免光照；有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器4℃（微型）臺式離心機(jī)：用于樣品處理DOUNCE勻漿器：用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)物孵育比色皿：用于比色測定的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動物組織，并秤重以確定200毫克組織重量（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（選擇步驟）抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過夜次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約20至40下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1）放進(jìn)－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品，置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentC）在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2024-09-17 19:14

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• 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:04

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-19 00:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測定與ATP合成對應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測?？捎糜谛募?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V，通常稱為ATP合成酶（ATPsynthase）、F型ATP酶（FtypeATPase）和F1F0ATP酶（F1F0ATPase），是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD，含有十六個(gè)亞單位，其中兩個(gè)：ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：F0為質(zhì)子通道，由幾個(gè)膜蛋白構(gòu)成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycinsensitiveconferringprotein）等；和F1催化活性結(jié)構(gòu)域，由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細(xì)胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時(shí)，呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì)，激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域，促使ATP合成。該酶異常會導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?；贏TP，在寡霉素參與下，受到F1F0ATP酶的水解，進(jìn)而通過丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），產(chǎn)生的吸光峰值的變化（340nm），來定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升專性液（ReagentE）250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于光度分析的容器分光光度儀：用于光度分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；反應(yīng)液（ReagentB）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長為340nm，間隔30秒，讀數(shù)11次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentA）室溫下均衡溫度背景對照測定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測，此為背景空對照：340波長讀數(shù)0分鐘－340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測，此為樣品總活性讀數(shù)：340波長讀數(shù)0分鐘－340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測定實(shí)驗(yàn)開始前，移取100微升待測樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）到1.5毫升離心管，加入20微升專性液（ReagentE），混勻后，放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測樣品上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測，此為樣品非特異活性讀數(shù)：340波長讀數(shù)0分鐘－340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性1）樣品活性（總活性和非特異活性）【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X6.22（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾NADH/分鐘2）樣品特異活性樣品總活性－樣品非特異活性＝樣品特異活性[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚，通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化，即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。可用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II，通常稱為琥珀酸－輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶（Succinate-CoenzymeQReductase；SuccinateDehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體：含有四個(gè)亞單位，包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸（flavinadeninedinucleotide；FAD）和三個(gè)鐵硫ZX（Fe-Sclusters），以及細(xì)胞色素b亞單位，其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸－輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化為富馬酸（fumarate），線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤（paraganglioma）、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh綜合征。基于琥珀酸底物，通過琥珀酸－輔酶Q還原酶的催化，氧化為富馬酸，同時(shí)氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化（600nm波長），由此定量測定琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；緩沖液（ReagentA）室溫預(yù)熱；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長為600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零背景對照測定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測，此為背景空對照：600波長讀數(shù)0分鐘－600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測，此為樣品活性讀數(shù)：600波長讀數(shù)0分鐘－600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X21.8（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-06-11 00:00

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• 動物全血線粒體粗提分離試 劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途動物全血線粒體粗提分離試劑是一種旨在通過化學(xué)溶解以純化血白細(xì)胞、物理或化學(xué)破膜及離心處理分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動物血細(xì)胞中的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高，可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的研究是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)的Z重要的課題之一。線粒體成為生物衰老、古生物、細(xì)胞凋亡、腫瘤、HIV、老年癡呆癥、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要對象。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2016-03-15 00:00

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• 動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書

  動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑是一種旨在通過低速差速離心和化學(xué)滲壓休克處理純化血小板、以及物理或化學(xué)破膜和高速差速離心的方法，直接從動物血細(xì)胞中分離出完整而純化的血小板線粒體細(xì)胞器，并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下，使已純化的線粒體膜結(jié)構(gòu)破裂而獲得線粒體內(nèi)活性蛋白酶系統(tǒng)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于人體和各種動物全血（鼠、豬、羊等）中血小板線粒體可溶性總蛋白的制備。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。可直接用于特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體中含有豐富的細(xì)胞色素氧化酶系統(tǒng)和細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白等。通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞，進(jìn)而差速離心獲得線粒體，然后通過特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑防止裂解后線粒體內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞，充分保留線粒體內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性，Z后進(jìn)行相關(guān)蛋白的獨(dú)立分析。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）500毫升裂解液（ReagentB）80毫升凈化液（ReagentC）20毫升強(qiáng)化液（ReagentD）10毫升保存液（ReagentE）200毫升破膜液（ReagentF）2毫升活性液（ReagentG）20微升上樣液（ReagentH）3毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和活性液（ReagentG）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器50毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器1.5毫升離心管：用于樣品保存的容器4℃臺式離心機(jī)：用于樣品操作4℃超速離心機(jī)：用于樣品操作DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞超聲儀：用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟物理處理法實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為裂解工作液。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備1個(gè)無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時(shí)內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進(jìn)臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細(xì)胞顆粒群松動加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放進(jìn)臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）放入含有上清液的離心管到臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放入臺式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時(shí)停止操作，須暫時(shí)放進(jìn)－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板加入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻細(xì)胞顆粒群即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿幫勻化細(xì)胞（約10下）（注意：參見注意事項(xiàng)11）將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管（選擇步驟）置于超聲儀槍頭下，離心管在冰槽里（選擇步驟）超聲功率為60％（或150赫茲）猝擊10秒，間隙30秒，10個(gè)循環(huán)放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細(xì)胞放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時(shí)不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進(jìn)行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1）移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳1）移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管2）加入20微升上樣液（ReagentH）3）渦旋震蕩15秒放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進(jìn)行電泳操作和西方雜交化學(xué)處理法實(shí)驗(yàn)開始前，將試劑盒里的凈化液（ReagentC）凍融，然后移出1毫升凈化液（ReagentC）到4毫升的裂解液（ReagentB）里，混勻后，置入冰槽里，標(biāo)記為裂解工作液。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備1個(gè)無菌的50毫升錐形離心管輕輕混勻10至20毫升新鮮（2小時(shí)內(nèi)抽取的靜脈血）的抗凝全血樣品移入到50毫升錐形離心管放進(jìn)臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群用手指輕彈離心管2至3下，使細(xì)胞顆粒群松動加入10毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞顆粒群放進(jìn)臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g小心移取上清液合并到上述50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）（選擇步驟）放入含有上清液的離心管到臺式離心機(jī)離心15分鐘，速度為200g（選擇步驟）小心移取上清液到新的50毫升錐形離心管，留下200微升液體，以防抽取松動的細(xì)胞顆粒群（扔掉含有細(xì)胞顆粒群的離心管）――此步驟獲得血小板富集血清放入含有上清液的離心管到臺式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g可見白色沉淀顆粒群，小心抽掉上清液加入10毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)，混勻細(xì)胞顆粒群放入臺式離心機(jī)離心20分鐘，速度為2000g小心抽去上清液（注意：如果暫時(shí)停止操作，須暫時(shí)放進(jìn)－70℃冰箱里）――此步驟獲得純化的血小板入5毫升預(yù)冷的裂解工作液渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育2分鐘，期間渦旋震蕩5秒一次加入500微升預(yù)冷的強(qiáng)化液（ReagentD）渦旋震蕩5秒，充分混勻在冰槽里孵育5分鐘，期間渦旋震蕩5秒二次（注意：參見注意事項(xiàng)12）加入5毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE），輕輕搖動試管混勻放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除未溶解的細(xì)胞放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液，保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物（選擇步驟）加入3毫升預(yù)冷的保存液（ReagentE）（選擇步驟）放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘，速度為10000g（選擇步驟）小心抽去上清液加入100微升破膜液（ReagentF）到線粒體顆粒樣品中加入1微升活性液（ReagentG）渦旋震蕩15秒置入冰槽中孵育15分鐘渦旋震蕩60秒放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心2分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取上清液到新的1.5毫升離心管――此為所有可溶性線粒體蛋白系統(tǒng)若暫時(shí)不予后續(xù)處理，保存在－20℃冰箱里繼續(xù)進(jìn)行下列操作：操作一、線粒體總蛋白定量檢測1．移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）操作二、可溶性線粒體蛋白電泳移取20微升（1微克/微升）上清液到新的1.5毫升離心管加入20微升上樣液（ReagentH）渦旋震蕩15秒放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心10秒，速度為500g（或2000RPM，例如eppendorf5415）煮沸5分鐘上樣，進(jìn)行電泳操作和西方雜交注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次（10至20毫升全血）操作其它實(shí)際操作的全血容量與試劑使用量按比例調(diào)整：例如40毫升全血，試劑用量加倍操作時(shí)，避免污染母液，尤其是裂解液（ReagentB）和保存液（ReagentE）操作時(shí)，須戴手套建議使用新鮮全血：2小時(shí)內(nèi)的全血為理想狀態(tài)，不要超過24小時(shí)全血樣品采集須使用全血樣品采集須使用EDTA二鉀血液抗凝液（12059.1）、ACD血液抗凝液（12059.4），或肝素鈉血液抗凝液（12059.5）建議使用足夠的樣品量血小板提取量因人而異；如果不足，建議增加全血量線粒體操作均須在4℃或以下狀態(tài)下進(jìn)行建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間通常勻化次數(shù)為10下（或細(xì)胞顆粒群消失為止）達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加勻化次數(shù)通常孵育5分鐘達(dá)到80％的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài)。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度：完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)物理處理法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理通常每毫升全血平均可獲得2X108血小板通常10毫升全血的血小板線粒體含量為10至25微克線粒體蛋白16．如果需檢測不可溶性線粒體蛋白，可保留線粒體裂解后的沉淀物，直接加入10微升上樣液（ReagentH）和10微升無離子水，然后繼續(xù)操作二的步驟3至6本公司提供系列線粒體試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無蛋白酶污染本產(chǎn)品經(jīng)鑒定蛋白萃取產(chǎn)量高本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純化程度高[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書

  真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2015-05-04 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  主要用途活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測定試劑是一種旨在通過特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來定性或定量測定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對細(xì)胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡易，活體檢測，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂（Cardiolipin）是線粒體膜上的主要成分之一。它對細(xì)胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解，致使心磷脂顯著減少，Z終造成線粒體的嚴(yán)重?fù)p害。Nonyl-AcrydineOrange（NAO）是一種可自由通過細(xì)胞膜的染色劑，特異性地染色線粒體上的心磷脂，并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化，其熒光顯著減弱。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 溴化乙啶細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  溴化乙啶細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

  期刊論文

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• 人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  人體血小板高純分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2016-03-17 00:00

  應(yīng)用文章

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• 動物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  動物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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