本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編

2024-09-28 00:04 257閱讀次數(shù)

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• 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:04

  課件

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• 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子?；阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長(zhǎng)）的變化，來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升緩沖液（ReagentC）XX毫升反應(yīng)液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升陰性液（ReagentF）XX微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentD）含有毒性物質(zhì)，避免直接用手接觸；底物液（ReagentE），避免光照；有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器4℃（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品處理DOUNCE勻漿器：用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)物孵育比色皿：用于比色測(cè)定的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定200毫克組織重量（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（選擇步驟）抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約20至40下）（注意：參見(jiàn)注意事項(xiàng)8）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1）放進(jìn)－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品，置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長(zhǎng)600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentC）在室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取XX微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-06-11 00:00

  選購(gòu)指南

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• 動(dòng)物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  動(dòng)物硬組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-19 00:00

  操作手冊(cè)

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• 植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-14 00:00

  應(yīng)用文章

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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2016-03-15 00:00

  選購(gòu)指南

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• 動(dòng)物硬組織線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  主要用途動(dòng)物硬組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動(dòng)物硬組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種動(dòng)物硬組織（心臟或肌肉）的線粒體的制備。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶，即到即用，性能穩(wěn)定，分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用：**，通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞；第二，通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器；第三，通過(guò)高速差速離心獲得線粒體；甚至，第四，可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升凈化液（ReagentC）毫升強(qiáng)化液（ReagentD）毫升保存液（ReagentE）毫升酶解液（ReagentF）毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存凈化液（ReagentC）和酶解液（ReagentF）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保證12月用戶自備15毫升錐形離心管：用于線粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管：用于保存線粒體的容器4℃臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī)：用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器：用于裂解細(xì)胞[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  主要用途純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)極譜法檢測(cè)系統(tǒng)（polarographicsystem）測(cè)定新鮮活體線粒體在ADP存在（III態(tài)呼吸）與否（IV態(tài)呼吸）的情況下溶解氧（dissolvedoxygen）的消耗差異，即呼吸控制率（RCR），以評(píng)價(jià)線粒體結(jié)構(gòu)和功能完整性以及氧化磷酸化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的?？梢员挥糜诰€粒體生理功能和藥物作用機(jī)制等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過(guò)質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體。線粒體結(jié)構(gòu)完整，功能正常，底物充分，電子傳遞形成的質(zhì)子梯度不斷被消耗，電子得以順暢傳遞，氧氣快速消耗，其耗氧率大，為III態(tài)呼吸。ADP耗竭，質(zhì)子梯度不能消耗，阻礙電子傳遞，氧氣消耗減少，為IV態(tài)呼吸。呼吸控制率（respiratorycontrolratio或respiratorycontrolindex；RCR），又稱呼吸調(diào)節(jié)比，是指III態(tài)（加入ADP）的呼吸速率與IV態(tài)（ADP耗竭）的呼吸速率之比。正常線粒體的RCR為3至10：RCR降低意味著線粒體ATP合成功能損傷，呼吸障礙；RCR意味著細(xì)胞活動(dòng)旺盛，代謝加快。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液（ReagentA）毫升態(tài)底物液（ReagentB）微升態(tài)底物液（ReagentC）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀：用于測(cè)定溶解氧濃度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用；同時(shí)將－20℃冰箱里的試劑融化，并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進(jìn)行下列操作。1．加入xx毫升介質(zhì)液（ReagentA）到反應(yīng)玻璃槽2．使用微型磁力子攪拌，充分混勻3．密封反應(yīng)槽[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2016-03-10 00:00

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• 活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  主要用途活體細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過(guò)長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光染料特異性地聚集在線粒體，并呈現(xiàn)紅色，用于分析和觀察線粒體活性與形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種線粒體（動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等）的形態(tài)觀察、活性探測(cè)和定位標(biāo)記。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，活體檢測(cè)，分辨率高，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，滯留持久。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞中重要的細(xì)胞器，其主要功能是提供細(xì)胞內(nèi)各種物質(zhì)代謝所需要的能量。線粒體大量存在于代謝旺盛的細(xì)胞中，如動(dòng)物的心肌，肝，腎等器官和組織的細(xì)胞中。大量制備線粒體就是從這些器官組織中提取，或從組織培養(yǎng)細(xì)胞中提取。在光學(xué)顯微鏡下線粒體呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細(xì)線。線粒體熒光探針MitoTrackerRED，是一種含有硫醇（Thiol）氯甲基基團(tuán)的熒光染料，自由通過(guò)細(xì)胞膜，選擇性地聚集在線粒體。它可以對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行直接染色，在580nm波長(zhǎng)可以清晰看到被染成紅色的線狀或顆粒小體的線粒體。并可以分析線粒體膜電位，以檢測(cè)線粒體活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  主要用途活體細(xì)胞線粒體損傷/氧化熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)特異性染色劑分析線粒體膜心磷脂的變化來(lái)定性或定量測(cè)定線粒體內(nèi)含質(zhì)量以及自由基、氧化物等對(duì)細(xì)胞線粒體的毒性與損傷作用的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的?？梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景心磷脂（Cardiolipin）是線粒體膜上的主要成分之一。它對(duì)細(xì)胞氧化特別敏感。線粒體脂類分解，致使心磷脂顯著減少，Z終造成線粒體的嚴(yán)重?fù)p害。Nonyl-AcrydineOrange（NAO）是一種可自由通過(guò)細(xì)胞膜的染色劑，特異性地染色線粒體上的心磷脂，并發(fā)出熒光。一旦線粒體膜質(zhì)量減少或受到損害以及被氧化，其熒光顯著減弱。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 純化線粒體磷氧比（ADP/O）定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品

  主要用途純化線粒體磷氧比（ADP/O）定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)極譜法檢測(cè)系統(tǒng)（polarographicsystem）測(cè)定新鮮活體線粒體在已知濃度ADP存在（III態(tài)呼吸）的情況下氧濃度的降低，來(lái)分析磷氧比（P：Oratio），以評(píng)價(jià)線粒體呼吸鏈和氧化磷酸化偶聯(lián)程度，即能量轉(zhuǎn)化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的?？梢员挥糜诰€粒體生理功能和藥物作用機(jī)制等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過(guò)質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體，即線粒體的呼吸耗氧偶聯(lián)著ADP與Pi合成ATP的磷酸化反應(yīng)。線粒體每吸收一克原子氧的同時(shí)，生長(zhǎng)ATP（ADP磷酸化）的克分子數(shù)的比值，為ADP/O值。線粒體的磷氧比直接表征線粒體呼吸耗氧和ATP合成的關(guān)系。正常線粒體的ADP/O（P/O）為1.5：磷氧比降低意味著線粒體解偶聯(lián)；磷氧比意味著線粒體偶聯(lián)良好。其Zda值為3.3。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液（ReagentA）xx毫升底物液（ReagentC）xx微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀：用于測(cè)定溶解氧濃度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用；同時(shí)將－20℃冰箱里的試劑融化，并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進(jìn)行下列操作。1．加入xx毫升介質(zhì)液（ReagentA）到反應(yīng)玻璃槽2．使用微型磁力子攪拌，充分混勻3．密封反應(yīng)槽4．開(kāi)始記錄氧濃度：起始飽和氧濃度值為0.240微摩爾分子氧/毫升（25℃）5．持續(xù)記錄1分鐘后，注射加入20微升待測(cè)的線粒體（總量2毫克）（注意：氧濃度可能瞬時(shí)增加5％）[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體（lysosome）分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體（lysosome）分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-19 00:00

  安裝說(shuō)明

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• 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2015-04-29 00:00

  安裝說(shuō)明

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• CK-E植物線粒體ATP酶（M-ATPase）說(shuō)明書(shū)中文版

  CK-E植物線粒體ATP酶(M-ATPase)說(shuō)明書(shū)中文版[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-19 00:00

  課件

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• 真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化（NAO）熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化（NAO）熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-02-06 00:00

  期刊論文

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• 真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化（NAO）熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  真菌/酵母細(xì)胞線粒體損傷/氧化（NAO）熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-01-29 00:00

  期刊論文

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測(cè)定與ATP合成對(duì)應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過(guò)程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測(cè)?？捎糜谛募　⒛芰看x、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V，通常稱為ATP合成酶（ATPsynthase）、F型ATP酶（FtypeATPase）和F1F0ATP酶（F1F0ATPase），是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD，含有十六個(gè)亞單位，其中兩個(gè)：ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：F0為質(zhì)子通道，由幾個(gè)膜蛋白構(gòu)成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycinsensitiveconferringprotein）等；和F1催化活性結(jié)構(gòu)域，由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細(xì)胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時(shí)，呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過(guò)F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì)，激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域，促使ATP合成。該酶異常會(huì)導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?；贏TP，在寡霉素參與下，受到F1F0ATP酶的水解，進(jìn)而通過(guò)丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），產(chǎn)生的吸光峰值的變化（340nm），來(lái)定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升專性液（ReagentE）250微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于光度分析的容器分光光度儀：用于光度分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；反應(yīng)液（ReagentB）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為340nm，間隔30秒，讀數(shù)11次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentA）室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品總活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，移取100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）到1.5毫升離心管，加入20微升專性液（ReagentE），混勻后，放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測(cè)樣品上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品非特異活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性1）樣品活性（總活性和非特異活性）【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X6.22（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾NADH/分鐘2）樣品特異活性樣品總活性－樣品非特異活性＝樣品特異活性[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)?？捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II，通常稱為琥珀酸－輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶（Succinate-CoenzymeQReductase；SuccinateDehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體：含有四個(gè)亞單位，包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸（flavinadeninedinucleotide；FAD）和三個(gè)鐵硫ZX（Fe-Sclusters），以及細(xì)胞色素b亞單位，其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸－輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化為富馬酸（fumarate），線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤（paraganglioma）、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh綜合征。基于琥珀酸底物，通過(guò)琥珀酸－輔酶Q還原酶的催化，氧化為富馬酸，同時(shí)氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化（600nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無(wú)色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；緩沖液（ReagentA）室溫預(yù)熱；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測(cè)，此為樣品活性讀數(shù)：600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X21.8（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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