国产三级在线看完整版-内射白嫩大屁股在线播放91-欧美精品国产精品综合-国产精品视频网站一区-一二三四在线观看视频韩国-国产不卡国产不卡国产精品不卡-日本岛国一区二区三区四区-成年人免费在线看片网站-熟女少妇一区二区三区四区

儀器網(wǎng)(yiqi.com)歡迎您!

| 注冊2 登錄
網(wǎng)站首頁-資訊-話題-產(chǎn)品-評(píng)測-品牌庫-供應(yīng)商-展會(huì)-招標(biāo)-采購-知識(shí)-技術(shù)-社區(qū)-資料-方案-產(chǎn)品庫-視頻

資料庫

儀器網(wǎng)> 資料庫>線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)

線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)

本文由 上海銘博生物科技有限公司 整理匯編

2018-11-08 10:00 425閱讀次數(shù)

掃    碼    分   享
文檔僅可預(yù)覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
立即下載
線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測??捎糜谒ダ稀⒛芰看x、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-CoenzymeQReductase;SuccinateDehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個(gè)亞單位,包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide;FAD)和三個(gè)鐵硫ZX(Fe-Sclusters),以及細(xì)胞色素b亞單位,其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征?;阽晁岬孜铮ㄟ^琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時(shí)氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm波長),由此定量測定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;緩沖液(ReagentA)室溫預(yù)熱;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零背景對(duì)照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為背景空對(duì)照:600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為樣品活性讀數(shù):600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X21.8(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾二氯酚靛酚/分鐘

參與評(píng)論

全部評(píng)論(0條)

更多資料

該會(huì)員其他資料
細(xì)胞總抗氧化能力(TAC)熒光法(ORAC)定量檢測試劑盒
真菌酵母β1,3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧單線態(tài)氧氣比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)活性免疫捕獲定量檢測試劑盒
細(xì)胞尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
組織基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子紅色熒光測定試劑盒
有機(jī)磷和氨基甲酸脂類酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
純化線粒體磷氧比(ADP/O)定量檢測試劑盒產(chǎn)品

在線留言

換一張?
取消