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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-05-19 00:00 328閱讀次數(shù)
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
課件
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測??捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-CoenzymeQReductase;SuccinateDehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個(gè)亞單位,包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide;FAD)和三個(gè)鐵硫ZX(Fe-Sclusters),以及細(xì)胞色素b亞單位,其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征?;阽晁岬孜?,通過琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時(shí)氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm波長),由此定量測定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;緩沖液(ReagentA)室溫預(yù)熱;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零背景對照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為背景空對照:600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為樣品活性讀數(shù):600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X21.8(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物 II 活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書免費(fèi)下載,下載后方可查看??![詳細(xì)]
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2018-10-01 10:01
產(chǎn)品樣冊
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動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-17 19:14
專利
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測定與ATP合成對應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測??捎糜谛募 ⒛芰看x、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V,通常稱為ATP合成酶(ATPsynthase)、F型ATP酶(FtypeATPase)和F1F0ATP酶(F1F0ATPase),是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD,含有十六個(gè)亞單位,其中兩個(gè):ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域:F0為質(zhì)子通道,由幾個(gè)膜蛋白構(gòu)成,包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP(oligomycinsensitiveconferringprotein)等;和F1催化活性結(jié)構(gòu)域,由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細(xì)胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時(shí),呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì),激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域,促使ATP合成。該酶異常會(huì)導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?;贏TP,在寡霉素參與下,受到F1F0ATP酶的水解,進(jìn)而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm),來定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升專性液(ReagentE)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于光度分析的容器分光光度儀:用于光度分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentB)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為340nm,間隔30秒,讀數(shù)11次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentA)室溫下均衡溫度背景對照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測,此為背景空對照:340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測,此為樣品總活性讀數(shù):340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測定實(shí)驗(yàn)開始前,移取100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)到1.5毫升離心管,加入20微升專性液(ReagentE),混勻后,放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測樣品上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測,此為樣品非特異活性讀數(shù):340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性1)樣品活性(總活性和非特異活性)【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾NADH/分鐘2)樣品特異活性樣品總活性-樣品非特異活性=樣品特異活性[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子。基于琥珀酸脫氫酶的反應(yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升緩沖液(ReagentC)XX毫升反應(yīng)液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升陰性液(ReagentF)XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentD)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸;底物液(ReagentE),避免光照;有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器4℃(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品處理DOUNCE勻漿器:用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)物孵育比色皿:用于比色測定的容器分光光度儀:用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定200毫克組織重量(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管(選擇步驟)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(選擇步驟)抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過夜次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融)放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)渦旋震蕩5秒,充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約20至40下)(注意:參見注意事項(xiàng)8)將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1)放進(jìn)-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品,置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentC)在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書
- CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
期刊論文
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細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-04-08 00:00
期刊論文
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血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-03-30 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-03-30 00:00
安裝說明
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細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書 (中文版)
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2015-01-05 00:00
期刊論文
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細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2024-09-20 13:41
應(yīng)用文章
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乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2015-05-22 00:00
安裝說明
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兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)試劑盒使用說明書
- 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2014-09-01 00:00
選購指南
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等,本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī),方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標(biāo)準(zhǔn)品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一:血漿樣品1.準(zhǔn)備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2.抽取2毫升血液,置于儲(chǔ)存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對照,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進(jìn)酶標(biāo)儀,置零8.取出酶標(biāo)板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10.即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊
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純化線粒體呼吸控制率(RCR)定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途純化線粒體呼吸控制率(RCR)定量檢測試劑是一種旨在通過極譜法檢測系統(tǒng)(polarographicsystem)測定新鮮活體線粒體在ADP存在(III態(tài)呼吸)與否(IV態(tài)呼吸)的情況下溶解氧(dissolvedoxygen)的消耗差異,即呼吸控制率(RCR),以評價(jià)線粒體結(jié)構(gòu)和功能完整性以及氧化磷酸化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的??梢员挥糜诰€粒體生理功能和藥物作用機(jī)制等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體。線粒體結(jié)構(gòu)完整,功能正常,底物充分,電子傳遞形成的質(zhì)子梯度不斷被消耗,電子得以順暢傳遞,氧氣快速消耗,其耗氧率大,為III態(tài)呼吸。ADP耗竭,質(zhì)子梯度不能消耗,阻礙電子傳遞,氧氣消耗減少,為IV態(tài)呼吸。呼吸控制率(respiratorycontrolratio或respiratorycontrolindex;RCR),又稱呼吸調(diào)節(jié)比,是指III態(tài)(加入ADP)的呼吸速率與IV態(tài)(ADP耗竭)的呼吸速率之比。正常線粒體的RCR為3至10:RCR降低意味著線粒體ATP合成功能損傷,呼吸障礙;RCR意味著細(xì)胞活動(dòng)旺盛,代謝加快。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液(ReagentA)毫升態(tài)底物液(ReagentB)微升態(tài)底物液(ReagentC)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀:用于測定溶解氧濃度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用;同時(shí)將-20℃冰箱里的試劑融化,并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進(jìn)行下列操作。1.加入xx毫升介質(zhì)液(ReagentA)到反應(yīng)玻璃槽2.使用微型磁力子攪拌,充分混勻3.密封反應(yīng)槽[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-12 00:00
產(chǎn)品樣冊
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