本文由 上海科學(xué)儀器有限公司 整理匯編

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑，通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I，通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分：含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH－輔酶Q還原酶（NADH:QReductase）。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步。基于輔酶Q底物，在魚藤酮存在與否的情況下，通過NADH－輔酶Q還原酶的催化，轉(zhuǎn)化成還原型泛醌（CoQH2），同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化（340nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定NADH－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑，通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I，通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分：含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH－輔酶Q還原酶（NADH:QReductase）。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步。基于輔酶Q底物，在魚藤酮存在與否的情況下，通過NADH－輔酶Q還原酶的催化，轉(zhuǎn)化成還原型泛醌（CoQH2），同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化（340nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定NADH－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-19 00:00

  課件

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物 II 活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書免費(fèi)下載，下載后方可查看！！[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2024-09-17 19:14

  專利

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚，通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)?？捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II，通常稱為琥珀酸－輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶（Succinate-CoenzymeQReductase；SuccinateDehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體：含有四個(gè)亞單位，包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸（flavinadeninedinucleotide；FAD）和三個(gè)鐵硫ZX（Fe-Sclusters），以及細(xì)胞色素b亞單位，其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸－輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化為富馬酸（fumarate），線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤（paraganglioma）、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh綜合征?；阽晁岬孜?，通過琥珀酸－輔酶Q還原酶的催化，氧化為富馬酸，同時(shí)氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化（600nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；緩沖液（ReagentA）室溫預(yù)熱；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測(cè)，此為樣品活性讀數(shù)：600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X21.8（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測(cè)定與ATP合成對(duì)應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測(cè)?？捎糜谛募　⒛芰看x、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V，通常稱為ATP合成酶（ATPsynthase）、F型ATP酶（FtypeATPase）和F1F0ATP酶（F1F0ATPase），是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD，含有十六個(gè)亞單位，其中兩個(gè)：ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：F0為質(zhì)子通道，由幾個(gè)膜蛋白構(gòu)成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycinsensitiveconferringprotein）等；和F1催化活性結(jié)構(gòu)域，由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細(xì)胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時(shí)，呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì)，激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域，促使ATP合成。該酶異常會(huì)導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?；贏TP，在寡霉素參與下，受到F1F0ATP酶的水解，進(jìn)而通過丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），產(chǎn)生的吸光峰值的變化（340nm），來定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升專性液（ReagentE）250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于光度分析的容器分光光度儀：用于光度分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；反應(yīng)液（ReagentB）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為340nm，間隔30秒，讀數(shù)11次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentA）室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品總活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)開始前，移取100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）到1.5毫升離心管，加入20微升專性液（ReagentE），混勻后，放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測(cè)樣品上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品非特異活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性1）樣品活性（總活性和非特異活性）【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X6.22（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾NADH/分鐘2）樣品特異活性樣品總活性－樣品非特異活性＝樣品特異活性[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV（MRCC-IV）說明書

  CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子?；阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長(zhǎng)）的變化，來測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升緩沖液（ReagentC）XX毫升反應(yīng)液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升陰性液（ReagentF）XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentD）含有毒性物質(zhì)，避免直接用手接觸；底物液（ReagentE），避免光照；有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器4℃（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品處理DOUNCE勻漿器：用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)物孵育比色皿：用于比色測(cè)定的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定200毫克組織重量（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（選擇步驟）抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過夜次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約20至40下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1）放進(jìn)－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品，置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長(zhǎng)600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentC）在室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取XX微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸-輔酶Q還原酶）試劑盒使用說明書

  兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸-輔酶Q還原酶）試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2014-09-01 00:00

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• Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上，是生物膜上的一種蛋白酶，機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下，ATP酶受到損傷，活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等，本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī)，方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）6毫升反應(yīng)液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升陰性液（ReagentD）6毫升標(biāo)準(zhǔn)品（reagentE）6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一：血漿樣品1．準(zhǔn)備好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為5000g4．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分（注意：避免觸碰白色液體層）5．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存6．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二：血清樣品1．準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2．抽取2毫升血液，置于儲(chǔ)存管里3．室溫下，靜置30分鐘，直至血液凝結(jié)4．放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為5000g5．小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分（注意：避免觸碰白色液體層）6．即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)－70℃冰箱里保存7．（選擇步驟）移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三：組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量，按照重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理鹽水，冰水浴條件下機(jī)械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘，去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品，置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：背景對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2．分別移取50微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品），樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液（ReagentD）4．分別加入50微升反應(yīng)液（ReagentB）5．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6．在37℃溫度下孵育2分鐘7．放進(jìn)酶標(biāo)儀，置零8．取出酶標(biāo)板，分別加入50微升底物液（ReagentC）9．輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10．即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè)，包括（0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù)）四，樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]

  2024-09-29 05:34

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過極譜法檢測(cè)系統(tǒng)（polarographicsystem）測(cè)定新鮮活體線粒體在ADP存在（III態(tài)呼吸）與否（IV態(tài)呼吸）的情況下溶解氧（dissolvedoxygen）的消耗差異，即呼吸控制率（RCR），以評(píng)價(jià)線粒體結(jié)構(gòu)和功能完整性以及氧化磷酸化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。可以被用于線粒體生理功能和藥物作用機(jī)制等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體。線粒體結(jié)構(gòu)完整，功能正常，底物充分，電子傳遞形成的質(zhì)子梯度不斷被消耗，電子得以順暢傳遞，氧氣快速消耗，其耗氧率大，為III態(tài)呼吸。ADP耗竭，質(zhì)子梯度不能消耗，阻礙電子傳遞，氧氣消耗減少，為IV態(tài)呼吸。呼吸控制率（respiratorycontrolratio或respiratorycontrolindex；RCR），又稱呼吸調(diào)節(jié)比，是指III態(tài)（加入ADP）的呼吸速率與IV態(tài)（ADP耗竭）的呼吸速率之比。正常線粒體的RCR為3至10：RCR降低意味著線粒體ATP合成功能損傷，呼吸障礙；RCR意味著細(xì)胞活動(dòng)旺盛，代謝加快。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液（ReagentA）毫升態(tài)底物液（ReagentB）微升態(tài)底物液（ReagentC）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀：用于測(cè)定溶解氧濃度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用；同時(shí)將－20℃冰箱里的試劑融化，并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進(jìn)行下列操作。1．加入xx毫升介質(zhì)液（ReagentA）到反應(yīng)玻璃槽2．使用微型磁力子攪拌，充分混勻3．密封反應(yīng)槽[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說明書

  細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶（protease）又稱為肽酶（peptidase）或蛋白質(zhì)酶（proteinase），是一類蛋白水解的酶，屬于水解酶（hydrolase）家屬中一員，存在于所有生物體內(nèi)。通過肽鍵的水解，進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解代謝，參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補(bǔ)體系統(tǒng)、凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)和分化等一系列生理活動(dòng)。蛋白酶基本分成6類，包括絲氨酸（serine）、蘇氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金屬（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等；還可以分成內(nèi)切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。細(xì)菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān)；作為外毒素（exotoxin），也是細(xì)菌致病的毒力（virulence）因子；同時(shí)細(xì)菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌，例如枯草芽孢桿菌（Bac.Subtilis）等?；诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein），在細(xì)菌蛋白酶的催化水解下，產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物，通過其吸收峰值的變化（440nm波長(zhǎng)），來定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容裂解液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升終止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升陰性液（ReagentE）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品制備恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測(cè)細(xì)菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107細(xì)胞/毫升）轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為37℃）：波長(zhǎng)440nm，并置零實(shí)驗(yàn)開始前，將反應(yīng)液（ReagentB）置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液（ReagentE）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照樣品活性測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管加入100微升待測(cè)樣品（蛋白總量100微克）（注意：樣品需澄清）上下傾倒數(shù)次，混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液（ReagentC）渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管（注意：沉淀物為橘紅色）加入xx微升中和液（ReagentD），混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品讀數(shù)計(jì)算樣品活性注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蝕性，注意操作安全系統(tǒng)檢測(cè)時(shí)，背景測(cè)定只需一次樣品須澄清，至關(guān)重要比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底建議待測(cè)樣本的蛋白濃度為100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）如果待測(cè)樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義：在37℃下，pH7.5的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細(xì)菌生理生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I（CARNITINEPALMITOYL-TRANSFERASEI）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過肉堿和脂酰輔酶A以及特定YZ劑反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A，使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品（動(dòng)物、人體等）肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶I的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程（β-oxidation）在動(dòng)物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路，可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及Z后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O，并釋放能量等四個(gè)階段。大于10個(gè)碳（C10）的活化型長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A是不能直接透過線粒體內(nèi)膜，需要借助肉堿（camitine），即L-3羥-4-三甲基銨丁酸，而被轉(zhuǎn)運(yùn)入線粒體內(nèi)，在線粒體內(nèi)膜的外側(cè)及內(nèi)側(cè)分別有肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶（carnitinepalmitoyltransferase；CPT；EC2.3.1.21）I和Ⅱ。位于內(nèi)膜外側(cè)的酶Ⅰ，促進(jìn)脂酰CoA轉(zhuǎn)化為脂酰肉堿，后者可借助線粒體內(nèi)膜上的轉(zhuǎn)位酶（或載體），轉(zhuǎn)運(yùn)到內(nèi)膜內(nèi)側(cè)，然后，在酶Ⅱ催化下脂酰肉堿釋放肉堿到胞漿，留下脂酰CoA。由此位于胞漿的活化脂肪酸―脂酰CoA穿過線粒體內(nèi)膜進(jìn)入基質(zhì)而被氧化分解。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶缺失癥導(dǎo)致機(jī)體無法代謝脂肪酸?；谌鈮A和脂酰輔酶A在丙二酰輔酶A（malonylCoA）存在與否的條件下，通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶的作用，產(chǎn)生脂酰肉堿，并釋放出巰基輔酶A（CoA-SH），與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來定量分析丙二酰輔酶A敏感性肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I的特異活性。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-28 00:00

  期刊論文

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• 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書...

  組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑，通過檢測(cè)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）還原后峰值的，即采用比色法來測(cè)定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品（動(dòng)物、人體等）乙醛脫氫酶2的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶（aldehydedehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又稱為乙醛NAD氧化還原酶（aldehydeNAD-oxidoreductase）是一類NAD（P）依賴性酶，催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenicamine）、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個(gè)氫原子脫掉，使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸，生成的乙酸進(jìn)入脂肪酸氧化途徑，Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶：ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于線粒體中，ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少，使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳，而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi)，使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?；趤碜杂谝掖即x產(chǎn)生的乙醛（acetaldehyde），在7-羥基-3-（4-羥苯基）-異黃酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在與否的情況下，由乙醛脫氫酶2的催化作用，轉(zhuǎn)化為乙酸（aceticacid）產(chǎn)物后，通過測(cè)定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide；NAD）轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）的變化（340nm波長(zhǎng)），來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升反應(yīng)液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）毫升陰性液（ReagentF）毫升專性液（ReagentG）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentD）、底物液（ReagentE）和專性液（ReagentG）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；反應(yīng)液（ReagentD）和底物液（ReagentE）避免光照；有效保證6月[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途組織基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進(jìn)而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs，當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細(xì)胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)?；|(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）。基質(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?；诤蚨嚯模╰hiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進(jìn)而與Ellman試劑5，5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來定量測(cè)定組織基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?；|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進(jìn)而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs，當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細(xì)胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)?；|(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）。基質(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?；诤蚨嚯模╰hiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長(zhǎng)），來定量測(cè)定細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?；|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶（ISOCITRATEDEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸（NADP）還原后峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶（isocitratedehydrogenase；IDH；EC1.1.1.42）是三羧酸循環(huán)（citricacidcycle）或克雷布斯循環(huán)（Krehescycle）中的酶之一，存在于所有生物體內(nèi)。細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶：同源雙體，40至45Kd分子量；單體，80至100Kd分子量。在細(xì)菌體內(nèi)，氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADP）依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子（Mn）的推動(dòng)，脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳（氧化性脫羧基作用），轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸（α-ketoglutarate），同時(shí)生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate；NADPH）。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中，以及有限的葡萄糖條件下，異檸檬酸脫氫酶則失活，從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路（glyoxylatebypass）之間碳的流動(dòng)?；诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴性，和作用后所產(chǎn)生的NADPH，通過分光光度儀的峰值變化（340nm波長(zhǎng)），來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景細(xì)胞張力蛋白同源在10號(hào)染色體缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又稱為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一個(gè)腫瘤YZ基因，位于染色體10q23.3，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物515kb，蛋白產(chǎn)物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個(gè)氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白（tenasin）、輔助蛋白（auxilin）同源的區(qū)域，是一種雙重特異性磷酸酶，能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、防止細(xì)胞過度生長(zhǎng)和分開裂解、參與細(xì)胞凋亡、粘附、遷移、浸潤，控制細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，調(diào)控Akt/PKB信號(hào)通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，以及多發(fā)性錯(cuò)構(gòu)瘤綜合征（Cowdensyndrome）等?；诘孜锪字＜〈?3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解產(chǎn)生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同時(shí)釋放出游離磷酸根，進(jìn)而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)產(chǎn)生其峰值的變化（660nm波長(zhǎng)），以此測(cè)算PTEN的活性。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升緩沖液（ReagentC）1毫升陰性液（ReagentD）1毫升反應(yīng)液（ReagentE）200微升終止液（ReagentF）1毫升顯色液（ReagentG）4毫升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentE）和顯色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸；顯色液（ReagentG）避免光照，有效保證6月用戶自備15毫升離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品處理和保存的容器細(xì)胞刮脫棒：用于貼壁細(xì)胞脫離（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品收集培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進(jìn)冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞（5X106細(xì)胞）小心加入3毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），覆蓋生長(zhǎng)表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞加入3毫升清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細(xì)胞從這一步驟開始）放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取2微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：樣品須澄清）設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為660nm，并置零準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管按下表分別加入陰性液（ReagentD）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）到每個(gè)離心管，混勻?qū)?至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號(hào)陰性液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）測(cè)定體系標(biāo)準(zhǔn)磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定移取20微升陰性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光單位（A）；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度（微摩爾/升）樣品背景測(cè)定移取20微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度樣品活性測(cè)定移取10微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應(yīng)液（ReagentE）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度計(jì)算樣品活性{[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）]X5（體系倍數(shù)）X樣品稀釋倍數(shù)}÷10（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）＝納摩爾磷/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為25次操作，包括5次標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定操作時(shí)，避免污染母液操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底如果用戶沒有660nm波長(zhǎng)，可以使用600至660nm的任一波長(zhǎng)替代顯示綠色表明具有較強(qiáng)酶活性空白對(duì)照讀數(shù)應(yīng)小于0.2建議待測(cè)樣本蛋白濃度為100微克/5微升；如果樣本酶活性過低或過高，則可以增加或降低樣本量；（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性單位濃度定義：在37℃溫度下，pH8.0的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)準(zhǔn)確[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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