本文由 上海銘博生物科技有限公司 整理匯編

2018-11-08 10:00 942閱讀次數(shù)

收藏 評(píng)價(jià) 舉報(bào)

• 分享

立即下載

參與評(píng)論

評(píng)論

登錄后參與評(píng)論

登錄或新用戶注冊(cè)

• 微信登錄
• 密碼登錄
• 短信登錄

請(qǐng)用手機(jī)微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊(cè)新賬號(hào)

微信掃碼，手機(jī)電腦聯(lián)動(dòng)

注冊(cè)登錄即表示同意《儀器網(wǎng)服務(wù)條款》和《隱私協(xié)議》

賬  號(hào)：

密  碼：

圖片碼： 看不清？
換一張？

手機(jī)和郵箱號(hào)注冊(cè)新賬號(hào)>> 忘記密碼？

手機(jī)號(hào)：

圖片碼： 看不清？
換一張？

短信碼： 獲取短信碼

手機(jī)和郵箱號(hào)注冊(cè)新賬號(hào)>> 忘記密碼？

更多資料

• 細(xì)胞尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑（uPA）活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途細(xì)胞尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑（uPA）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑的水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體等）尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑（uPA）的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑（urokinase-typePlasminogenActivator；uPA；EC3.4.21.73），又稱為尿激酶（urokinase；UK），屬于絲氨酸蛋白酶，存在于血液、細(xì)胞外基質(zhì)和尿液中。尿激酶由411氨基酸構(gòu)成，分子量為54KD，有3個(gè)結(jié)構(gòu)域：絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域、kringle結(jié)構(gòu)域和生長因子結(jié)構(gòu)域。其主要的生理性底物為纖維蛋白溶酶原（Plasminogen），即纖維蛋白溶酶（plasmin）的酶原形式（zymogen），切離部位為Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切離后激活，纖維蛋白溶酶參與細(xì)胞蛋白水解過程，包括血栓溶解（thrombolysis）和細(xì)胞外基質(zhì)降解等。uPA與組織重構(gòu)、修復(fù)、血管形成（angiogenesis）性疾病和腫瘤擴(kuò)散有關(guān)。uPA的YZ劑是絲氨酸蛋白酶YZ劑（serpins），即纖維蛋白溶酶原激活劑YZ劑（PlasminogenActivatorInhibitor；PAI）?；谌斯ず铣傻娜幕衔锏孜飌-EGR-pNA（pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nitroaniline；焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰對(duì)硝基苯胺）受到尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑的水解，釋放有色對(duì)硝基苯胺，在分光光度儀（405nm波長）下，測(cè)定吸光峰值的變化，來定量測(cè)定尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒

  大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-11 00:00

  應(yīng)用文章

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-3活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過四肽化合物底物Ac-DEVD-pNA，受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體、昆蟲等）半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3）的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景半胱氨酸蛋白酶（Cysteine-requiringAspartateprotease；CASPASE），或稱半胱天冬蛋白酶，是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的一類蛋白酶家屬。半胱氨酸蛋白酶-3（CASPASE-3；EC3.4.22.56）是半胱氨酸蛋白酶家屬中CED-3（CellDeathGeneNumber3；秀麗隱桿線蟲細(xì)胞死亡基因數(shù)3）分支的一種，又稱CPP32（CysteineProteinaseProtein32kd；半胱氨酸蛋白酶蛋白32）、apopain（凋亡素）、Yama（印度傳說中的死亡之神）等。半胱氨酸蛋白酶-3前體為32kd，被切離為17kd和11kd而激活細(xì)胞凋亡。其底物是多聚ADP-核糖多聚酶（poly（ADP-ribose）polymerase；PARP）、半胱氨酸蛋白酶激活DNA酶YZ劑（ICAD）等。半胱氨酸蛋白酶-3的活性檢測(cè)用來評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織的凋亡狀況?；谌斯ず铣傻乃碾幕衔锏孜顰c-DEVD-pNA（acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-p-Nithoaniline；乙酰天冬氨酰谷氨酰頡氨酰天冬氨酰對(duì)硝基苯胺）受到半胱氨酸蛋白酶-3的水解，釋放有色對(duì)硝基苯胺，在分光光度儀（405nm波長）下，測(cè)定吸光峰值的變化，來定量測(cè)定半胱氨酸蛋白酶-3的活性。半胱氨酸蛋白酶-3反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA）檢測(cè)試劑盒

  兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA）檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-08-05 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后，產(chǎn)生多巴色素，呈現(xiàn)吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物細(xì)胞，尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè)，以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一種單酚單加氧酶（monophenolmonooxygenase），又稱為單酚酶（monophenolase）或單酚二羥基苯丙氨酸：O2氧化還原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有雙功能的含銅糖蛋白，廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中，其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白，而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞（melanocyte）或色素細(xì)胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羥基化（o-hydroxylation）反應(yīng)變成L-多巴（L-dopamine），進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），從而由多巴色素（dopachrome）轉(zhuǎn)化為黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性，嚴(yán)重時(shí)，會(huì)引起色素沉著（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?；诘孜锢野彼幔诶野彼崦傅拇呋?，產(chǎn)生多巴色素，通過其吸光值的變化（475nm波長），來定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取懸液樣品（動(dòng)物、人體、植物、昆蟲等）丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶（PyruvateKinase；PK）是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶，催化細(xì)胞糖酵解的Z后反應(yīng)：將磷酸烯醇丙酮酸（phosphoenolpyruvate；PEP）轉(zhuǎn)化成丙酮酸（pyruvate），同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶由4個(gè)相同的亞單位構(gòu)成，在肝組織、肌肉組織和紅細(xì)胞中有不同類型的異構(gòu)體。果糖-2，6-二磷酸（Fructose-2，6-bisphosphate；F2，6BP）是該酶的激活劑，而ATP、蛋氨酸（alanine）、乙酰輔酶A（Acetyl-CoA）是該酶的YZ劑。丙酮酸激酶的活性檢測(cè)用來評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織，包括紅細(xì)胞的損害狀況?；诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后，通過乳酸脫氫酶系統(tǒng)，測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD）的峰值變化（340nm波長），來定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人（Human）組織型纖溶酶原激活劑 （t-PA） ELISA 檢測(cè)試劑盒

  人（Human）組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：t-PA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知t-PA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將t-PA和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中t-PA的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：80ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗t-PA抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人（Human）組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：80ng/ml（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40ng/ml（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/ml（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml（空白對(duì)照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。人（Human）組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人（Human）組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的t-PA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的t-PA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-80ng/ml4、敏感度：0.1ng/ml[詳細(xì)]

  2018-09-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒

  豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-12 00:00

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA試劑盒

  大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-11 00:00

  專利

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒

  人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  其它

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)

  主要用途細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙酰化p53多肽底物，經(jīng)過SIRT1脫乙酰基后，被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙酰基酶（histonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類共20多個(gè)蛋白：種類I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴氨酸脫乙?；福╨ysyl-deacetylase）。催化賴氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡。基于人工合成的乙?；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙?；琙后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長405nm），由此來定量測(cè)定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 大鼠纖溶酶原激活劑YZ物(PAI－1)檢測(cè)試劑盒

  大鼠纖溶酶原激活劑YZ物(PAI－1)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2014-09-29 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒說明書?

  小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒說明書?[詳細(xì)]

  2016-01-20 00:00

  選購指南

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒說明書

  試驗(yàn)原理：uPA-R試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知uPA-R濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將uPA-R和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中uPA-R的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：40ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標(biāo)記的抗uPA-R抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9．按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：40ng/ml（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20ng/ml（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.25ng/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml（空白對(duì)照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9．在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的uPA-R標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的uPA-R含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-40ng/ml4、敏感度：0.1ng/ml[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下，受到MMP2的水解，釋放出巰基，進(jìn)而使用Ellman試劑，產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化，即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測(cè)，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶（Matrixmetalloproteinases；MMPs）是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)（extracellularmatrix）成分，同時(shí)參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissueresorption）、疾病發(fā)生，例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質(zhì)溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲(chǔ)備MMPs，當(dāng)需要MMPs的信號(hào)傳遞到細(xì)胞后才臨時(shí)合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細(xì)胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應(yīng)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2，又稱明膠酶A（gelatinase-A）或IV型膠原酶（typeIVcollagenase），其前體分子量為72kDa，激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白（collagens）、纖維連接蛋白（fibronectin）、彈性纖維蛋白（elastin）、層粘連蛋白-5（laminin-5）、前體腫瘤壞死因子-α（pro-TNF-α）和神經(jīng)（蛋白）聚糖（neurocan）?；|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?；诤蚨嚯模╰hiopeptide）底物Ac-PLG（2-mercapto-4-methyl-pentanoyl）-LG-OC2H5，在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下，受到MMP2的水解，釋放出巰基（sulfhydrylgroup），進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙（2-硝基苯甲酸）[5,5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反應(yīng)后，產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通過其吸收峰值的變化（412nm波長），來定量測(cè)定細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?；|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測(cè)

  要用途細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ劑存在下，受到PP1去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復(fù)合物和粗提或部分純化酶樣品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又稱為1型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶，是7個(gè)主要絲/蘇氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成員之一，從酵母到人類高度進(jìn)化保留。其參與調(diào)節(jié)多種重要的細(xì)胞生理功能，包括糖原代謝、細(xì)胞分裂、肌肉收縮、信號(hào)傳導(dǎo)、神經(jīng)元功能、轉(zhuǎn)錄、翻譯等，以及與HIV-1轉(zhuǎn)錄過程的調(diào)節(jié)，并且與老年性癡呆等多種疾病密切相關(guān)。PP1分子結(jié)構(gòu)表面的3個(gè)凹槽及β12-β13Loop環(huán)結(jié)構(gòu)，是底物與YZ劑的結(jié)合部位；其催化亞體為37kd，調(diào)節(jié)亞體有2種：目標(biāo)亞體和YZ亞體?；谔禺愋缘孜锾窃姿峄竌，在PP2AYZ劑福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情況下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠（malachitegreen）染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長）產(chǎn)生峰值的變化，由此測(cè)定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特異活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞PTEN活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測(cè)定其峰值的變化，以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景細(xì)胞張力蛋白同源在10號(hào)染色體缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又稱為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一個(gè)腫瘤YZ基因，位于染色體10q23.3，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物515kb，蛋白產(chǎn)物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個(gè)氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白（tenasin）、輔助蛋白（auxilin）同源的區(qū)域，是一種雙重特異性磷酸酶，能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、防止細(xì)胞過度生長和分開裂解、參與細(xì)胞凋亡、粘附、遷移、浸潤，控制細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，調(diào)控Akt/PKB信號(hào)通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，以及多發(fā)性錯(cuò)構(gòu)瘤綜合征（Cowdensyndrome）等?；诘孜锪字＜〈?3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解產(chǎn)生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同時(shí)釋放出游離磷酸根，進(jìn)而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)產(chǎn)生其峰值的變化（660nm波長），以此測(cè)算PTEN的活性。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升緩沖液（ReagentC）1毫升陰性液（ReagentD）1毫升反應(yīng)液（ReagentE）200微升終止液（ReagentF）1毫升顯色液（ReagentG）4毫升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、緩沖液（ReagentC）、反應(yīng)液（ReagentE）和顯色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；其余的保存在4℃冰箱里；終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸；顯色液（ReagentG）避免光照，有效保證6月用戶自備15毫升離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品處理和保存的容器細(xì)胞刮脫棒：用于貼壁細(xì)胞脫離（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品收集培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進(jìn)冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞（5X106細(xì)胞）小心加入3毫升預(yù)冷的清理液（ReagentA），覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞加入3毫升清理液（ReagentA），混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管（注意：懸浮細(xì)胞從這一步驟開始）放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取2微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）即刻放進(jìn)－70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：樣品須澄清）設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長為660nm，并置零準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管按下表分別加入陰性液（ReagentD）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）到每個(gè)離心管，混勻?qū)?至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號(hào)陰性液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentH）測(cè)定體系標(biāo)準(zhǔn)磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定移取20微升陰性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為吸光單位（A）；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度（微摩爾/升）樣品背景測(cè)定移取20微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度樣品活性測(cè)定移取10微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待測(cè)樣品（總量100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應(yīng)液（ReagentE）在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液（ReagentF），混勻加入100微升顯色液（ReagentG），混勻室溫下靜置15分鐘，避免光照即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)：獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度計(jì)算樣品活性{[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對(duì)應(yīng)磷濃度（微摩爾/升）]X5（體系倍數(shù)）X樣品稀釋倍數(shù)}÷10（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）＝納摩爾磷/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為25次操作，包括5次標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定操作時(shí)，避免污染母液操作時(shí)，須戴手套終止液（ReagentF）和顯色液（ReagentG）具有腐蝕性，避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測(cè)定后，比色皿須清洗徹底如果用戶沒有660nm波長，可以使用600至660nm的任一波長替代顯示綠色表明具有較強(qiáng)酶活性空白對(duì)照讀數(shù)應(yīng)小于0.2建議待測(cè)樣本蛋白濃度為100微克/5微升；如果樣本酶活性過低或過高，則可以增加或降低樣本量；（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－HL30030.1）鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性單位濃度定義：在37℃溫度下，pH8.0的情況下，每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)（每分鐘）釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)準(zhǔn)確[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒使用方法

  人可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒使用方法[詳細(xì)]

  2016-09-06 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體（uPA-R）ELISA試劑盒

  試驗(yàn)原理：uPA-R試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知uPA-R濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將uPA-R和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中uPA-R的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：40ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標(biāo)記的抗uPA-R抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPA-R)ELISA試劑盒安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9．按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPA-R)ELISA試劑盒試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：40ng/ml（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20ng/ml（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.25ng/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml（空白對(duì)照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9．在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（ng/ml）A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的uPA-R標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的uPA-R含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-40ng/ml4、敏感度：0.1ng/ml[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人可溶性尿激酶型纖溶酶原激活物受體 試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍：96T[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

  |

  • 
  • 
  • 
  •