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細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) (中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-01-05 00:00 365閱讀次數(shù)
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細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) (中文版)
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細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) (中文版)
- 細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) (中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-05 00:00
期刊論文
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細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、發(fā)酵分析等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線(xiàn)粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線(xiàn)粒體內(nèi)膜,參與細(xì)胞呼吸鏈。細(xì)菌琥珀酸脫氫酶,又稱(chēng)為SdhCDAB,為膜結(jié)合性蛋白,分為周邊(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成:SdhA亞體含有黃素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有鐵硫蛋白(iron-sulfurprotein),進(jìn)行電子傳遞;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成:SdhC含有亞鐵血紅素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)結(jié)合部位(Q部位)。其作用在于參與三羧酸循環(huán)(TCAcycle)和呼吸鏈活動(dòng)。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長(zhǎng))的變化,來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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純化線(xiàn)粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 純化線(xiàn)粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途純化線(xiàn)粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線(xiàn)粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線(xiàn)粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線(xiàn)粒體內(nèi)膜,參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長(zhǎng))的變化,來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升緩沖液(ReagentC)XX毫升反應(yīng)液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升陰性液(ReagentF)XX微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentD)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸;底物液(ReagentE),避免光照;有效保證3月用戶(hù)自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器4℃(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品處理DOUNCE勻漿器:用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)物孵育比色皿:用于比色測(cè)定的容器分光光度儀:用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定200毫克組織重量(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管(選擇步驟)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(選擇步驟)抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融)放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)渦旋震蕩5秒,充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約20至40下)(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)8)將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1)放進(jìn)-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品,置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長(zhǎng)600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentC)在室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取XX微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-04-08 00:00
期刊論文
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細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)還原后峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循環(huán)(citricacidcycle)或克雷布斯循環(huán)(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物體內(nèi)。細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶:同源雙體,40至45Kd分子量;單體,80至100Kd分子量。在細(xì)菌體內(nèi),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依賴(lài)性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子(Mn)的推動(dòng),脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳(氧化性脫羧基作用),轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同時(shí)生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中,以及有限的葡萄糖條件下,異檸檬酸脫氫酶則失活,從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之間碳的流動(dòng)?;诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴(lài)性,和作用后所產(chǎn)生的NADPH,通過(guò)分光光度儀的峰值變化(340nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)還原后峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循環(huán)(citricacidcycle)或克雷布斯循環(huán)(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物體內(nèi)。細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶:同源雙體,40至45Kd分子量;單體,80至100Kd分子量。在細(xì)菌體內(nèi),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依賴(lài)性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子(Mn)的推動(dòng),脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳(氧化性脫羧基作用),轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同時(shí)生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中,以及有限的葡萄糖條件下,異檸檬酸脫氫酶則失活,從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之間碳的流動(dòng)。基于異檸檬酸脫氫酶的NADP依賴(lài)性,和作用后所產(chǎn)生的NADPH,通過(guò)分光光度儀的峰值變化(340nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-22 00:00
安裝說(shuō)明
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細(xì)菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解,產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶(protease)又稱(chēng)為肽酶(peptidase)或蛋白質(zhì)酶(proteinase),是一類(lèi)蛋白水解的酶,屬于水解酶(hydrolase)家屬中一員,存在于所有生物體內(nèi)。通過(guò)肽鍵的水解,進(jìn)行蛋白質(zhì)的分解代謝,參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補(bǔ)體系統(tǒng)、凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)和分化等一系列生理活動(dòng)。蛋白酶基本分成6類(lèi),包括絲氨酸(serine)、蘇氨酸(threonine)、半胱氨酸(cysteine)、谷氨酸(glutamate)、天冬氨酸(aspartate)、金屬(metalloprotease)蛋白酶等;也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等;還可以分成內(nèi)切肽酶,例如胰蛋白酶(trypsin),和外切肽酶,例如羧基肽酶A(carboxypeptidase)。細(xì)菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān);作為外毒素(exotoxin),也是細(xì)菌致病的毒力(virulence)因子;同時(shí)細(xì)菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌,例如枯草芽孢桿菌(Bac.Subtilis)等?;诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein),在細(xì)菌蛋白酶的催化水解下,產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物,通過(guò)其吸收峰值的變化(440nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容裂解液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升終止液(ReagentC)毫升中和液(ReagentD)毫升陰性液(ReagentE)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;終止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品制備恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測(cè)細(xì)菌(OD600=0.4至0.8,即1至2X107細(xì)胞/毫升)轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF5415)小心抽去上清液加入xx微升裂解液(ReagentA),充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-30030.1)即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如細(xì)菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長(zhǎng)440nm,并置零實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將反應(yīng)液(ReagentB)置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液(ReagentE)上下傾倒數(shù)次,混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液(ReagentC)渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液(ReagentD),混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為背景空對(duì)照樣品活性測(cè)定移取xx微升反應(yīng)液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管加入100微升待測(cè)樣品(蛋白總量100微克)(注意:樣品需澄清)上下傾倒數(shù)次,混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液(ReagentC)渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管(注意:沉淀物為橘紅色)加入xx微升中和液(ReagentD),混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為樣品讀數(shù)計(jì)算樣品活性注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套終止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蝕性,注意操作安全系統(tǒng)檢測(cè)時(shí),背景測(cè)定只需一次樣品須澄清,至關(guān)重要比色測(cè)定后,比色皿須清洗徹底建議待測(cè)樣本的蛋白濃度為100微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低,可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義:在37℃下,pH7.5的情況下,每單位酶在單位時(shí)間內(nèi)(每分鐘)產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細(xì)菌生理生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解,釋放出巰基基團(tuán),使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解液樣品脂肪酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性酶蛋白分子,催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵(esterbond)的水解。許多細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)胞外酶(exoenzyme),稱(chēng)為水解酶(hydrolase),在水分子的參與下,催化底物的水解,成為細(xì)菌生理特征之一。其中脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG)、脂肪、油等,產(chǎn)生1個(gè)分子甘油(glycerol)和3個(gè)分子脂肪酸分子(fattyacid),由此用于合成細(xì)菌脂質(zhì)和其它細(xì)胞成分,以及氧化產(chǎn)生能量。食品工業(yè)中,常用于食品發(fā)酵(rancidity),例如人造奶油(margarine)等。甚至用于廚房清潔劑和替代能源的生物催化作用。同時(shí)據(jù)此用以識(shí)別革藍(lán)氏陰性細(xì)菌,例如枯草芽孢桿菌(Bac.Subtilis)等。細(xì)菌脂肪酶在水分子的參與下,催化三丁酸二巰基丙醇(dimercaptopropanoltributyrate;DMPTB或BALB)的水解,產(chǎn)生二巰基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并釋放出巰基基團(tuán)(-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化(412nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)...
- 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測(cè)試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用比色法來(lái)測(cè)定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱(chēng)為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類(lèi)NAD(P)依賴(lài)性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類(lèi)底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類(lèi)、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過(guò)程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個(gè)氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進(jìn)入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線(xiàn)粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?;趤?lái)自于乙醇代謝產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升陰性液(ReagentF)毫升專(zhuān)性液(ReagentG)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存緩沖液(ReagentC)、反應(yīng)液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和專(zhuān)性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)含量分析試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)酶聯(lián)免疫試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T7μmol/L-260μmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中琥珀酸脫氫酶(SDH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)水平。用純化的小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入琥珀酸脫氫酶(SDH),再與HRP標(biāo)記的琥珀酸脫氫酶(SDH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的琥珀酸脫氫酶(SDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中小鼠琥珀酸脫氫酶(SDH)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(480μmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
期刊論文
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血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
安裝說(shuō)明
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細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2024-09-20 13:41
應(yīng)用文章
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-30 00:00
安裝說(shuō)明
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乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)乳酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)中反應(yīng)完成后還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用終點(diǎn)比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞和組織裂解萃取樣品(動(dòng)物、人體、植物、昆蟲(chóng)等)乳酸脫氫酶(LDH)的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乳酸脫氫酶是一種氧化還原酶,催化丙酮酸和乳酸的互相轉(zhuǎn)化反應(yīng)。乳酸脫氫酶由4個(gè)亞單位構(gòu)成,有兩種類(lèi)型:肌肉型和心肌型。根據(jù)其亞單位成分,分為5種同功酶。乳酸脫氫酶的活性檢測(cè)用來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞或組織的損害狀況?;诒幔╬yruvate)底物在乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)的催化下,轉(zhuǎn)化成乳酸(lactate),同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),完全反應(yīng)后,在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長(zhǎng))由此定量測(cè)定乳酸脫氫酶的活性。乳酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:lactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)菌丙酮酸激酶(PK)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 細(xì)菌丙酮酸激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途細(xì)菌丙酮酸激酶總活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法來(lái)測(cè)定細(xì)菌裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)菌細(xì)胞裂解萃取懸液樣品丙酮酸激酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶(PyruvateKinase;PK;EC2.7.1.40),全稱(chēng)為ATP-丙酮酸磷酸轉(zhuǎn)移酶(ATP:pyruvatephosphotransferase),是細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)酶,催化細(xì)胞糖酵解的Z后反應(yīng):將磷酸烯醇丙酮酸(phosphoenolpyruvate;PEP)轉(zhuǎn)化成丙酮酸(pyruvate),同時(shí)產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶在糖酵解中活性,而在葡糖生成過(guò)程中活性降低。細(xì)菌丙酮酸激酶為同源四聚體(homotetramer),240Kd分子量,分成兩種類(lèi)型:一種是誘導(dǎo)型(inducible),由果糖-2,6-二磷酸(Fructose-2,6-bisphosphate;F2,6BP)激活;一種是結(jié)構(gòu)型(constitutive),由AMP激活。基于磷酸烯醇丙酮酸轉(zhuǎn)化成丙酮酸后,通過(guò)乳酸脫氫酶系統(tǒng),測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的峰值變化(340nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升陰性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存裂解液(ReagentB)、反應(yīng)液(ReagentD)和底物液(ReagentE)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器超聲儀:用于細(xì)菌裂解(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作比色皿或96孔板:用于光度分析的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于光度分析[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
課件
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線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類(lèi)似物二氯酚靛酚,通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線(xiàn)粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。可用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱(chēng)為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-CoenzymeQReductase;SuccinateDehydrogenase),是線(xiàn)粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個(gè)亞單位,包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide;FAD)和三個(gè)鐵硫ZX(Fe-Sclusters),以及細(xì)胞色素b亞單位,其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線(xiàn)粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征?;阽晁岬孜?,通過(guò)琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時(shí)氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm波長(zhǎng)),由此定量測(cè)定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無(wú)色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD),避免光照,有效保證6月用戶(hù)自備比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;緩沖液(ReagentA)室溫預(yù)熱;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如純化線(xiàn)粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長(zhǎng)為600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測(cè),此為背景空對(duì)照:600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測(cè)定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測(cè)樣品(注意:10微克總線(xiàn)粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測(cè),此為樣品活性讀數(shù):600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X21.8(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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