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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒
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2018-11-18 10:00 820閱讀次數(shù)
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主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步。基于輔酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長),由此定量測定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-19 00:00
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物 II 活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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2018-10-01 10:01
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動物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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2024-09-17 19:14
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化,即采用比色法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測??捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II,通常稱為琥珀酸-輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶(Succinate-CoenzymeQReductase;SuccinateDehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體:含有四個亞單位,包括共價結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸(flavinadeninedinucleotide;FAD)和三個鐵硫ZX(Fe-Sclusters),以及細胞色素b亞單位,其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸-輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸(succinate)被氧化為富馬酸(fumarate),線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),進行呼吸鏈傳遞。該酶異常會導(dǎo)致嗜鉻細胞瘤(paraganglioma)、腎上腺嗜鉻細胞瘤(pheochromocytoma)和Leigh綜合征。基于琥珀酸底物,通過琥珀酸-輔酶Q還原酶的催化,氧化為富馬酸,同時氧化型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIP)轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚(dichlorophenal-indophenol;DCPIPH2),在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化(600nm波長),由此定量測定琥珀酸-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍色無色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;緩沖液(ReagentA)室溫預(yù)熱;反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentD)注意避光。然后進行下列操作。測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零背景對照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為背景空對照:600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)上下傾倒數(shù)次,混勻放進30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放入分光光度儀檢測,此為樣品活性讀數(shù):600波長讀數(shù)0分鐘-600波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計算樣品活性【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X21.8(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2018-11-08 10:00
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CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書
- CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說明書[詳細]
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2018-11-08 10:00
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純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個單體組成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升緩沖液(ReagentC)XX毫升反應(yīng)液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升陰性液(ReagentF)XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentD)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸;底物液(ReagentE),避免光照;有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器4℃(微型)臺式離心機:用于樣品處理DOUNCE勻漿器:用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)物孵育比色皿:用于比色測定的容器分光光度儀:用于比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后進行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定200毫克組織重量(選擇步驟)放進預(yù)冷的15毫升錐形離心管(選擇步驟)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(選擇步驟)抽去清洗液移入到一個液氮凍存管即刻放進液氮罐過夜次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融)放進一個15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)渦旋震蕩5秒,充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約20至40下)(注意:參見注意事項8)將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混勻顆粒群移取10微升進行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1)放進-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品,置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentC)在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放進25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)試劑盒使用說明書
- 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II(琥珀酸-輔酶Q還原酶)試劑盒使用說明書[詳細]
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2014-09-01 00:00
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植物α-淀粉酶(α-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途植物α-淀粉酶(α-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸與受到α-淀粉酶中性環(huán)境下水解產(chǎn)生的還原基團分子反應(yīng),生成強烈吸光的3-氨基-5-硝基水楊酸,即采用比色法測定其還原后峰值的升高變化,以此測定樣品中α-淀粉酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種新鮮植物組織,包括葉片(leaf)、谷粒(grain)、種子(seed)等裂解萃取液樣品α-淀粉酶的活性檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景淀粉酶(AMYLASE)屬于糖苷水解酶類(glycosidehydrolase)。淀粉酶通過水解方式,分解淀粉的α-1,4鏈接,釋放出葡萄糖、麥芽糖(maltose)、麥芽三糖(maltotriose)、糊精(dextrin)等簡單糖分子。淀粉酶分成三類:α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶(EC3.2.1.1),又稱為α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶(α-1,4-glucan4-glucanohydrolase)或糖原酶(glycogenase),是鈣離子依賴性鈣金屬蛋白酶(calciummetalloenzyme),分解淀粉為葡萄糖、麥芽糖(maltose)、麥芽三糖(maltotriose)、糊精(dextrin)等,為主要的消化酶,尤其在人體中,例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶(EC3.2.1.2),又稱為α-1,4-葡聚糖麥芽糖水解酶(1,4-α-D-glucanmaltohydrolase)或糖基淀粉酶(saccharogenamylase),分解淀粉為葡萄糖等。植物、真菌、細菌等均能產(chǎn)生,而人體組織不含有。γ-淀粉酶(EC3.2.1.2),又稱為α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶(Glucan1,4-α-glucosidase)或溶酶體α-葡萄糖苷酶(lysosomalα-glucosidase),在酸性環(huán)境下分解淀粉為葡萄糖。淀粉是一種復(fù)雜分子,由多聚糖直鏈淀粉(amylose)和支鏈淀粉(amylopectin)構(gòu)成。植物和細菌產(chǎn)生大多數(shù)淀粉。在淀粉酶的催化作用下,分解產(chǎn)生簡單糖分子,作為能源儲存,植物用于光合作用。植物和細菌性淀粉酶常用于工業(yè),包括烘培食物和乳制品的制造,以及酒精和紙材的生產(chǎn)?;诘矸郏谥行原h(huán)境下,通過α-淀粉酶的水解,釋放出麥芽糖等含有游離的還原性基團(例如酮基等),進一步使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸(3,5-Dinitrosalicylicacid;DNS)與之反應(yīng),產(chǎn)生紅棕色的3-氨基-5-硝基水楊酸(3-amino-5-nitrosalicylicacid),在分光光度儀(540nm波長)下測定,以定量分析α-淀粉酶的活性。其反應(yīng)方式為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解,釋放出巰基基團,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種細菌細胞裂解液樣品脂肪酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性酶蛋白分子,催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵(esterbond)的水解。許多細菌產(chǎn)生細胞外酶(exoenzyme),稱為水解酶(hydrolase),在水分子的參與下,催化底物的水解,成為細菌生理特征之一。其中脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG)、脂肪、油等,產(chǎn)生1個分子甘油(glycerol)和3個分子脂肪酸分子(fattyacid),由此用于合成細菌脂質(zhì)和其它細胞成分,以及氧化產(chǎn)生能量。食品工業(yè)中,常用于食品發(fā)酵(rancidity),例如人造奶油(margarine)等。甚至用于廚房清潔劑和替代能源的生物催化作用。同時據(jù)此用以識別革藍氏陰性細菌,例如枯草芽孢桿菌(Bac.Subtilis)等。細菌脂肪酶在水分子的參與下,催化三丁酸二巰基丙醇(dimercaptopropanoltributyrate;DMPTB或BALB)的水解,產(chǎn)生二巰基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并釋放出巰基基團(-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物組織,尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細胞(melanocyte)或色素細胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?;诘孜锢野彼?,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物細胞,尤其是黑色素細胞和黑色素瘤細胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細胞(melanocyte)或色素細胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化病(oculocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細菌異檸檬酸脫氫酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)還原后峰值的變化,即采用比色法來測定細菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌細胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循環(huán)(citricacidcycle)或克雷布斯循環(huán)(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物體內(nèi)。細菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶:同源雙體,40至45Kd分子量;單體,80至100Kd分子量。在細菌體內(nèi),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子(Mn)的推動,脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳(氧化性脫羧基作用),轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同時生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中,以及有限的葡萄糖條件下,異檸檬酸脫氫酶則失活,從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之間碳的流動?;诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴性,和作用后所產(chǎn)生的NADPH,通過分光光度儀的峰值變化(340nm波長),來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、發(fā)酵分析等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細胞呼吸鏈。細菌琥珀酸脫氫酶,又稱為SdhCDAB,為膜結(jié)合性蛋白,分為周邊(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成:SdhA亞體含有黃素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有鐵硫蛋白(iron-sulfurprotein),進行電子傳遞;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成:SdhC含有亞鐵血紅素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)結(jié)合部位(Q部位)。其作用在于參與三羧酸循環(huán)(TCAcycle)和呼吸鏈活動。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取懸液樣品(動物、人體、植物、昆蟲等)丙酮酸激酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶(PyruvateKinase;PK)是細胞代謝的調(diào)節(jié)酶,催化細胞糖酵解的Z后反應(yīng):將磷酸烯醇丙酮酸(phosphoenolpyruvate;PEP)轉(zhuǎn)化成丙酮酸(pyruvate),同時產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶由4個相同的亞單位構(gòu)成,在肝組織、肌肉組織和紅細胞中有不同類型的異構(gòu)體。果糖-2,6-二磷酸(Fructose-2,6-bisphosphate;F2,6BP)是該酶的激活劑,而ATP、蛋氨酸(alanine)、乙酰輔酶A(Acetyl-CoA)是該酶的YZ劑。丙酮酸激酶的活性檢測用來評價細胞或組織,包括紅細胞的損害狀況。基于磷酸烯醇丙酮酸轉(zhuǎn)化成丙酮酸后,通過乳酸脫氫酶系統(tǒng),測定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的峰值變化(340nm波長),來定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解,釋放出巰基基團,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種動物和人體各種體液包括尿液、腦脊液、唾液、精液等樣品脂肪酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性糖蛋白分子,催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵(esterbond)的水解。在人體中,其來源于產(chǎn)生。在消化系統(tǒng)中,脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG),產(chǎn)生1個分子甘油(glycerol)和3個分子游離脂肪酸分子(fattyacid)。脂肪酶異常與炎、管阻塞、癌、腎病、唾液腺炎癥、腸道阻塞等相關(guān);異常降低則與中脂肪酶產(chǎn)生細胞的性損傷有關(guān)。脂肪酶的活性檢測是臨床診斷的指標(biāo)之一。基于脂肪酶在水分子的參與下,催化三丁酸二巰基丙醇(dimercaptopropanoltributyrate;DMPTB或BALB)的水解,產(chǎn)生二巰基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并釋放出巰基基團(-SH),進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
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細菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒說明書
- 細菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解,產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種細菌細胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶(protease)又稱為肽酶(peptidase)或蛋白質(zhì)酶(proteinase),是一類蛋白水解的酶,屬于水解酶(hydrolase)家屬中一員,存在于所有生物體內(nèi)。通過肽鍵的水解,進行蛋白質(zhì)的分解代謝,參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補體系統(tǒng)、凋亡、細胞生長和分化等一系列生理活動。蛋白酶基本分成6類,包括絲氨酸(serine)、蘇氨酸(threonine)、半胱氨酸(cysteine)、谷氨酸(glutamate)、天冬氨酸(aspartate)、金屬(metalloprotease)蛋白酶等;也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等;還可以分成內(nèi)切肽酶,例如胰蛋白酶(trypsin),和外切肽酶,例如羧基肽酶A(carboxypeptidase)。細菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān);作為外毒素(exotoxin),也是細菌致病的毒力(virulence)因子;同時細菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時據(jù)此用以識別革藍氏陰性細菌,例如枯草芽孢桿菌(Bac.Subtilis)等?;诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein),在細菌蛋白酶的催化水解下,產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物,通過其吸收峰值的變化(440nm波長),來定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容裂解液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升終止液(ReagentC)毫升中和液(ReagentD)毫升陰性液(ReagentE)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;終止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺式離心機:用于樣品制備恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析實驗步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測細菌(OD600=0.4至0.8,即1至2X107細胞/毫升)轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘,速度為1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF5415)小心抽去上清液加入xx微升裂解液(ReagentA),充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-30030.1)即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如細菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm,并置零實驗開始前,將反應(yīng)液(ReagentB)置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測定移取xx微升反應(yīng)液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液(ReagentE)上下傾倒數(shù)次,混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液(ReagentC)渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液(ReagentD),混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進分光光度儀檢測,此為背景空對照樣品活性測定移取xx微升反應(yīng)液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管加入100微升待測樣品(蛋白總量100微克)(注意:樣品需澄清)上下傾倒數(shù)次,混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液(ReagentC)渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管(注意:沉淀物為橘紅色)加入xx微升中和液(ReagentD),混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品讀數(shù)計算樣品活性注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時,須戴手套終止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蝕性,注意操作安全系統(tǒng)檢測時,背景測定只需一次樣品須澄清,至關(guān)重要比色測定后,比色皿須清洗徹底建議待測樣本的蛋白濃度為100微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義:在37℃下,pH7.5的情況下,每單位酶在單位時間內(nèi)(每分鐘)產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細菌生理生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細胞等,本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機,方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標(biāo)準(zhǔn)品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機:用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一:血漿樣品1.準(zhǔn)備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲存管2.抽取2毫升血液,置于儲存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對照,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進酶標(biāo)儀,置零8.取出酶標(biāo)板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動酶標(biāo)板10.即刻放進酶標(biāo)儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊
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