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• 純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

  主要用途純化線粒體呼吸控制率（RCR）定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)極譜法檢測(cè)系統(tǒng)（polarographicsystem）測(cè)定新鮮活體線粒體在ADP存在（III態(tài)呼吸）與否（IV態(tài)呼吸）的情況下溶解氧（dissolvedoxygen）的消耗差異，即呼吸控制率（RCR），以評(píng)價(jià)線粒體結(jié)構(gòu)和功能完整性以及氧化磷酸化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。可以被用于線粒體生理功能和藥物作用機(jī)制等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過(guò)質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體。線粒體結(jié)構(gòu)完整，功能正常，底物充分，電子傳遞形成的質(zhì)子梯度不斷被消耗，電子得以順暢傳遞，氧氣快速消耗，其耗氧率大，為III態(tài)呼吸。ADP耗竭，質(zhì)子梯度不能消耗，阻礙電子傳遞，氧氣消耗減少，為IV態(tài)呼吸。呼吸控制率（respiratorycontrolratio或respiratorycontrolindex；RCR），又稱呼吸調(diào)節(jié)比，是指III態(tài)（加入ADP）的呼吸速率與IV態(tài)（ADP耗竭）的呼吸速率之比。正常線粒體的RCR為3至10：RCR降低意味著線粒體ATP合成功能損傷，呼吸障礙；RCR意味著細(xì)胞活動(dòng)旺盛，代謝加快。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液（ReagentA）毫升態(tài)底物液（ReagentB）微升態(tài)底物液（ReagentC）微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀：用于測(cè)定溶解氧濃度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用；同時(shí)將－20℃冰箱里的試劑融化，并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進(jìn)行下列操作。1．加入xx毫升介質(zhì)液（ReagentA）到反應(yīng)玻璃槽2．使用微型磁力子攪拌，充分混勻3．密封反應(yīng)槽[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 純化線粒體磷氧比（ADP/O）定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品

  主要用途純化線粒體磷氧比（ADP/O）定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)極譜法檢測(cè)系統(tǒng)（polarographicsystem）測(cè)定新鮮活體線粒體在已知濃度ADP存在（III態(tài)呼吸）的情況下氧濃度的降低，來(lái)分析磷氧比（P：Oratio），以評(píng)價(jià)線粒體呼吸鏈和氧化磷酸化偶聯(lián)程度，即能量轉(zhuǎn)化效率的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的?？梢员挥糜诰€粒體生理功能和藥物作用機(jī)制等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的ZX。電子傳遞和ATP合成通過(guò)質(zhì)子梯度偶聯(lián)成一體，即線粒體的呼吸耗氧偶聯(lián)著ADP與Pi合成ATP的磷酸化反應(yīng)。線粒體每吸收一克原子氧的同時(shí)，生長(zhǎng)ATP（ADP磷酸化）的克分子數(shù)的比值，為ADP/O值。線粒體的磷氧比直接表征線粒體呼吸耗氧和ATP合成的關(guān)系。正常線粒體的ADP/O（P/O）為1.5：磷氧比降低意味著線粒體解偶聯(lián)；磷氧比意味著線粒體偶聯(lián)良好。其Zda值為3.3。產(chǎn)品內(nèi)容介質(zhì)液（ReagentA）xx毫升底物液（ReagentC）xx微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保證6月用戶自備CLARK氧電極儀：用于測(cè)定溶解氧濃度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，制備好新鮮的線粒體置于冰槽里備用；同時(shí)將－20℃冰箱里的試劑融化，并預(yù)熱氧電極儀到25℃。然后進(jìn)行下列操作。1．加入xx毫升介質(zhì)液（ReagentA）到反應(yīng)玻璃槽2．使用微型磁力子攪拌，充分混勻3．密封反應(yīng)槽4．開始記錄氧濃度：起始飽和氧濃度值為0.240微摩爾分子氧/毫升（25℃）5．持續(xù)記錄1分鐘后，注射加入20微升待測(cè)的線粒體（總量2毫克）（注意：氧濃度可能瞬時(shí)增加5％）[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物 II 活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書免費(fèi)下載，下載后方可查看??！[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:01

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

  主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I，通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分：含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH－輔酶Q還原酶（NADH:QReductase）。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?；谳o酶Q底物，在魚藤酮存在與否的情況下，通過(guò)NADH－輔酶Q還原酶的催化，轉(zhuǎn)化成還原型泛醌（CoQH2），同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化（340nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定NADH－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

  動(dòng)物線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2024-09-17 19:14

  專利

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• 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

  純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶（SDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成電子受體染料，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定染料還原后峰值的降低，即采用比色法測(cè)算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測(cè)。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循環(huán)（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循環(huán)中與細(xì)胞線粒體膜相關(guān)的重要元素，位于線粒體內(nèi)膜，參與細(xì)胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個(gè)單體組成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反應(yīng)，產(chǎn)生延胡索酸（furmarate），通過(guò)黃素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）傳遞電子。基于琥珀酸脫氫酶的反應(yīng)原理，使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受來(lái)自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的電子，而被還原，在分光光度儀下，其吸光值（600nm波長(zhǎng)）的變化，來(lái)測(cè)算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升緩沖液（ReagentC）XX毫升反應(yīng)液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升陰性液（ReagentF）XX微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentD）含有毒性物質(zhì)，避免直接用手接觸；底物液（ReagentE），避免光照；有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管：用于樣品制備的容器1.5毫升離心管：用于樣品制備和保存的容器4℃（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品處理DOUNCE勻漿器：用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽：用于反應(yīng)物孵育比色皿：用于比色測(cè)定的容器分光光度儀：用于比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備手術(shù)取出動(dòng)物組織，并秤重以確定200毫克組織重量（選擇步驟）放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管（選擇步驟）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（選擇步驟）抽去清洗液移入到一個(gè)液氮凍存管即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜次日從液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎組織成粉末狀（注意：切莫使組織凍融）放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）渦旋震蕩5秒，充分混勻即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約20至40下）（注意：參見注意事項(xiàng)8）將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為1500g小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘，速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混勻顆粒群移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)（注意：建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1）放進(jìn)－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品，置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為25℃）：波長(zhǎng)600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentC）在室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取XX微升緩沖液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放進(jìn)25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-19 00:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

  MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測(cè)定與ATP合成對(duì)應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過(guò)程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測(cè)。可用于心肌、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V，通常稱為ATP合成酶（ATPsynthase）、F型ATP酶（FtypeATPase）和F1F0ATP酶（F1F0ATPase），是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD，含有十六個(gè)亞單位，其中兩個(gè)：ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：F0為質(zhì)子通道，由幾個(gè)膜蛋白構(gòu)成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycinsensitiveconferringprotein）等；和F1催化活性結(jié)構(gòu)域，由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細(xì)胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時(shí)，呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過(guò)F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì)，激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域，促使ATP合成。該酶異常會(huì)導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?；贏TP，在寡霉素參與下，受到F1F0ATP酶的水解，進(jìn)而通過(guò)丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenase；LDH）反應(yīng)系統(tǒng)中，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），產(chǎn)生的吸光峰值的變化（340nm），來(lái)定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升專性液（ReagentE）250微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于光度分析的容器分光光度儀：用于光度分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；反應(yīng)液（ReagentB）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為340nm，間隔30秒，讀數(shù)11次（共5分鐘），并置零緩沖液（ReagentA）室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品總活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)開始前，移取100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）到1.5毫升離心管，加入20微升專性液（ReagentE），混勻后，放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測(cè)樣品上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，此為樣品非特異活性讀數(shù)：340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性1）樣品活性（總活性和非特異活性）【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X6.22（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾NADH/分鐘2）樣品特異活性樣品總活性－樣品非特異活性＝樣品特異活性[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

  線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物二氯酚靛酚，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中二氯酚靛酚還原后吸光峰值的變化，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)?？捎糜谒ダ?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物II，通常稱為琥珀酸－輔酶Q還原酶或琥珀酸脫氫酶（Succinate-CoenzymeQReductase；SuccinateDehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈與三羧酸循環(huán)鏈接的載體：含有四個(gè)亞單位，包括共價(jià)結(jié)合的輔基黃素腺嘌呤二核苷酸（flavinadeninedinucleotide；FAD）和三個(gè)鐵硫ZX（Fe-Sclusters），以及細(xì)胞色素b亞單位，其Z特征性的酶活性是丙二酸鈉敏感的琥珀酸－輔酶Q還原酶。復(fù)合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化為富馬酸（fumarate），線粒體內(nèi)電子由供體FAD傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，進(jìn)行呼吸鏈傳遞。該酶異常會(huì)導(dǎo)致嗜鉻細(xì)胞瘤（paraganglioma）、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh綜合征?；阽晁岬孜铮ㄟ^(guò)琥珀酸－輔酶Q還原酶的催化，氧化為富馬酸，同時(shí)氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）轉(zhuǎn)化為還原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度儀下產(chǎn)生吸光峰值的變化（600nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定琥珀酸－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2藍(lán)色無(wú)色↑Abs600nm↓Abs600nm產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）20毫升反應(yīng)液（ReagentB）2.5毫升陰性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD），避免光照，有效保證6月用戶自備比色皿：用于比色的容器分光光度儀：用于比色分析培養(yǎng)箱：用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化；緩沖液（ReagentA）室溫預(yù)熱；反應(yīng)液（ReagentB）和底物液（ReagentD）注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如純化線粒體樣品等），置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀（溫度為30℃）：波長(zhǎng)為600nm，間隔60秒，讀數(shù)6次（共5分鐘），并置零背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升陰性液（ReagentC）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測(cè)，此為背景空對(duì)照：600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品活性測(cè)定移取780微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下傾倒數(shù)次，混勻放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘加入100微升待測(cè)樣品（注意：10微克總線粒體蛋白）上下傾倒數(shù)次，混勻（限定在3秒之內(nèi)）即刻放入分光光度儀檢測(cè)，此為樣品活性讀數(shù)：600波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘－600波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性【（樣品讀數(shù)－背景讀數(shù)）X1（體系容量；毫升）X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1（樣品容量；毫升）X21.8（毫摩爾吸光系數(shù)X1或5（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）】＝單位/毫升÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝單位/毫克單位＝微摩爾二氯酚靛酚/分鐘[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I（NADH－輔酶Q還原酶）活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑，通過(guò)反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品（動(dòng)物、人體、酵母）以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I，通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分：含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH－輔酶Q還原酶（NADH:QReductase）。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體（泛醌；ubiquinone）的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng)，為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?；谳o酶Q底物，在魚藤酮存在與否的情況下，通過(guò)NADH－輔酶Q還原酶的催化，轉(zhuǎn)化成還原型泛醌（CoQH2），同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化（340nm波長(zhǎng)），由此定量測(cè)定NADH－輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒

  主要用途純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)自由基探針魯米諾和強(qiáng)化劑的參與下，線粒體樣品中的活性氧族使發(fā)光物氧化降解并發(fā)光，在化學(xué)發(fā)光儀（Luminometer）的幫助下定量檢測(cè)樣品中活性氧族（過(guò)氧化氫）的生成和數(shù)量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種生物體線粒體組分的活性氧族的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景超氧自由基陰離子（superoxideradical；O2-）、過(guò)氧化氫（hydrogenperoxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxylradical；OH-）、過(guò)氧化基（peroxylradical；ROO-）、氫過(guò)氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、過(guò)氧亞硝基陰離子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、單線態(tài)氧氣（singletoxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的產(chǎn)生和增多，甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。線粒體是真核細(xì)胞的膜性細(xì)胞器，是產(chǎn)生活性氧、進(jìn)行氧化還原反應(yīng)的重要場(chǎng)所。魯米諾（luminol），又稱氨基鄰苯二甲酰肼（luminol；3-aminophthalichydrazide5-amino-2,3-dihvdro-1,4-phthalazinedione），是一種脂溶性的發(fā)光劑，氧化后生成魯米諾自由基而化學(xué)發(fā)光，具有460nm左右峰值的帶狀光譜，肉眼可觀察到鮮明的紫藍(lán)色。魯米諾以單價(jià)氧化形式與超氧自由基陰離子反應(yīng)，產(chǎn)生不穩(wěn)定性內(nèi)過(guò)氧化物或二氧環(huán)丁烷（Dioxetane），由此分解成電激發(fā)狀態(tài)，通過(guò)釋放光子，回復(fù)到基態(tài)。魯米諾作為探針，可以檢測(cè)線粒體中過(guò)氧化氫、超氧自由基陰離子和羥自由基，其中過(guò)氧化氫Z強(qiáng)，其發(fā)光強(qiáng)度與過(guò)氧化氫水平成正相關(guān)。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升強(qiáng)化液（ReagentB）毫升發(fā)光液（ReagentC）毫升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存強(qiáng)化液（ReagentB）和發(fā)光液（ReagentC）在－20℃冰箱里，嚴(yán)格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器恒溫水槽：用于樣品孵育微型臺(tái)式離心機(jī)：用于去除樣品雜質(zhì)測(cè)試管或黑色96孔板：用于發(fā)光檢測(cè)用的容器化學(xué)發(fā)光儀：用于檢測(cè)化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)步驟樣品預(yù)處理移取100微升新鮮制備（2小時(shí)內(nèi)）的純化線粒體（400微克線粒體蛋白）到預(yù)冷的1.5毫升離心管，置于冰槽里加入xx微升清理液（ReagentA），輕輕混勻線粒體放進(jìn)37℃恒溫水槽孵育10分鐘加入10微升用戶自備的待測(cè)藥品即刻進(jìn)入下列測(cè)讀操作測(cè)讀測(cè)讀開始前，打開化學(xué)發(fā)光儀，設(shè)定儀器內(nèi)溫度為37℃預(yù)熱和整合測(cè)讀10秒或15分鐘；然后關(guān)掉實(shí)驗(yàn)室的燈光。將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化，嚴(yán)格置于暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好測(cè)試管，做好標(biāo)記：陰性對(duì)照、樣品本底和樣品活性移取xx微升清理液（ReagentA）到陰性對(duì)照測(cè)試管移取400微升上述預(yù)處理的待測(cè)線粒體到樣品本底測(cè)試管移取400微升上述預(yù)處理的待測(cè)線粒體到樣品活性測(cè)試管分別加入xx微升強(qiáng)化液（ReagentB）到上述測(cè)試管，除樣品本底測(cè)試管外分別加入xx微升發(fā)光液（ReagentC）到上述測(cè)試管，除樣品本底測(cè)試管外輕輕渦旋混勻即刻放進(jìn)37℃化學(xué)發(fā)光儀里測(cè)讀整合測(cè)讀10秒，獲得相對(duì)發(fā)光單位（relativelightunit；RLU）或者整合測(cè)讀15分鐘，獲得光電子讀數(shù)：X106CPM（countedphotonperminute）（注意：可以使用液體閃爍儀替代）計(jì)算ROS水平：注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為50次操作操作時(shí)，須戴手套測(cè)試前，線粒體分離后2小時(shí)內(nèi)為**線粒體懸液須在4℃溫度下保存?zhèn)溆萌绻麥y(cè)定體系變化，則試劑用量相應(yīng)變化系統(tǒng)操作過(guò)程中，陰性對(duì)照只需測(cè)定一次測(cè)讀的所有步驟均須在暗室里進(jìn)行如果是注射式化學(xué)發(fā)光儀，建議測(cè)試前后使用無(wú)離子水沖洗化學(xué)發(fā)光儀注射（injector）管道本公司提供系列活性氧分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

  呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2015-04-29 00:00

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• 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

  純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:04

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• 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒

  呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒[詳細(xì)]

  2015-04-29 00:00

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• 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒

  主要用途呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）初級(jí)熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑二氯熒光乙酰乙酸鹽，在線粒體氧化條件下，選擇性阻止膜電位，所產(chǎn)生的熒光，來(lái)定量檢測(cè)線粒體內(nèi)膜電位依賴性活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的?？梢员挥糜诰€粒體功能、氧化激發(fā)和YZ機(jī)理等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子（superoxideradical；O2-）、過(guò)氧化氫（hydrogenperoxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxylradical；OH-）、過(guò)氧化基（peroxylradical；ROO-）、氫過(guò)氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、過(guò)氧亞硝基陰離子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、單線態(tài)氧氣（singletoxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的產(chǎn)生和增多，將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。2',7'-二氯熒光乙酰乙酸鹽（2',7'-dichlorofluoresceindiacetate，DCFH-DA）一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、過(guò)氧化基、過(guò)氧亞硝基陰離子等氧化，便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定線粒體活性氧族的濃度。三氟甲氧基苯腙羧基氰化物（carbonylcyanide4－rifluoromethoxyhenylhydrazone；FCCP）使線粒體膜化學(xué)離子梯度消失。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒

  主要用途純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）光澤精化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)使用自由基探針光澤精，捕獲線粒體中的活性氧族，使發(fā)光物氧化降解并發(fā)光，在化學(xué)發(fā)光儀（Luminometer）的幫助下定量檢測(cè)純化線粒體活性氧族（超氧自由基陰離子）的生成和數(shù)量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種生物體線粒體組分的活性氧族的檢測(cè)。可以被用于細(xì)胞凋亡、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景超氧自由基陰離子（superoxideradical；O2-）、過(guò)氧化氫（hydrogenperoxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxylradical；OH-）、過(guò)氧化基（peroxylradical；ROO-）、氫過(guò)氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、過(guò)氧亞硝基陰離子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、單線態(tài)氧氣（singletoxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的產(chǎn)生和增多，甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。線粒體是真核細(xì)胞的膜性細(xì)胞器，是產(chǎn)生活性氧、進(jìn)行氧化還原反應(yīng)的重要場(chǎng)所。光澤精（lucigenin），又稱硝酸雙-N-甲基吖啶翁（bis-N-methylacridiniumnitrate），是一種帶正電荷的發(fā)光劑，單價(jià)還原后生成光澤精自由基，再與超氧自由基陰離子反應(yīng)生成不穩(wěn)定的中間物光澤精二惡二酮，由此分解成電激發(fā)狀態(tài)（N－甲基丫啶酮），通過(guò)釋放光子，回復(fù)到基態(tài)。光澤精作為探針，其正電荷與線粒體內(nèi)膜上的負(fù)電荷作用，可以特異性檢測(cè)線粒體超氧自由基陰離子，其發(fā)光強(qiáng)度與超氧自由基陰離子水平成正相關(guān)。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）毫升發(fā)光液（ReagentB）毫升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，發(fā)光液（ReagentB）嚴(yán)格避免光照；有效保證6月[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV（MRCC-IV）說(shuō)明書

  CK-E植物線粒體呼吸鏈復(fù)合物IV(MRCC-IV)說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸-輔酶Q還原酶）試劑盒使用說(shuō)明書

  兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合物II（琥珀酸-輔酶Q還原酶）試劑盒使用說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2014-09-01 00:00

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• 純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒

  主要用途純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧（ROS）高質(zhì)熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯，在線粒體氧化條件下，產(chǎn)生熒光，來(lái)定量檢測(cè)線粒體內(nèi)活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的?？梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)易，活體檢測(cè)，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子（superoxideradical；O2-）、過(guò)氧化氫（hydrogenperoxide；H2O2）、羥自由基或氫氧基（hydroxylradical；OH-）、過(guò)氧化基（peroxylradical；ROO-）、氫過(guò)氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、過(guò)氧亞硝基陰離子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、單線態(tài)氧氣（singletoxygen）等細(xì)胞內(nèi)活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的產(chǎn)生和增多，將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester；CM－H2DCFDA）是取代二氯二氫熒光素二乙酯（2,7-dichlorodihydrofluorescindiacetate；DCFH-DA）的升級(jí)產(chǎn)品，一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜，并在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、羥自由基或氫氧基、過(guò)氧化基、次氯酸等氧化，便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定線粒體活性氧族的濃度。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）毫升補(bǔ)充液（ReagentB）毫升染色液（ReagentC）微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，染色液（ReagentC），嚴(yán)格避免光照；有效保證12月用戶自備培養(yǎng)箱：用于染色孵育（共聚焦）熒光顯微鏡：用于觀察熒光線粒體熒光酶標(biāo)儀：用于測(cè)定線粒體熒光強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑放進(jìn)冰槽里融化，避免光照；同時(shí)從－80℃冰箱里取出待測(cè)的線粒體，[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書主要用途細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM，羅丹明123（rhodamine123）的衍生產(chǎn)物，一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光，Rhod-2-AM，進(jìn)入細(xì)胞受到酯酶解離，同時(shí)其正電荷特性，特異性地聚集在線粒體里，由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm，來(lái)定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）10毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀（22℃）：激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm測(cè)定開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板，標(biāo)記為：細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔（不含細(xì)胞）、Zda對(duì)照孔（含細(xì)胞）小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板，混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘，避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀：獲得相對(duì)熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【（樣品RFU－空白對(duì)照孔R(shí)FU）÷（Zda對(duì)照孔R(shí)FU－樣品RFU）】X570（納摩爾；解離常數(shù)）注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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