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• 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2014-12-26 00:00

  期刊論文

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• 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光（Fura-2）檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光（Fura-2）檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光（Fura-2）檢測試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Fura-2-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下測量不同激發(fā)波長下相對熒光峰值的比值，來測定細(xì)胞漿總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）或冰凍切片組織細(xì)胞漿鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中細(xì)胞漿鈣離子在調(diào)節(jié)鈣離子通道，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。細(xì)胞漿鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體、細(xì)胞漿分離。Fura-2AM（acetoxy-methylester），一種具有細(xì)胞膜通透性，與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光的染料，通過其不同激發(fā)波長340nm/380nm產(chǎn)生的熒光信號比（散發(fā)波長510nm）來極ng確測定細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子水平。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育96孔培養(yǎng)板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析（共聚焦）熒光顯微鏡：用于熒光染色觀察實(shí)驗(yàn)步驟測定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀：激發(fā)波長340nm和380nm，散發(fā)波長510nm測定開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測準(zhǔn)備1個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，標(biāo)記為：細(xì)胞樣品孔、空白對照孔（不含細(xì)胞）、Zda對照孔（含細(xì)胞）小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板，混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘，避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda對照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測讀：獲得相對熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）包括樣品RFU340nm、樣品RFU380nm、空白對照孔RFU340nm、空白對照孔RFU380nm、Zda對照孔RFU340nm、Zda對照孔RFU380nm計(jì)算樣品細(xì)胞漿鈣離子濃度【（樣品RFU340nm/樣品RFU380nm）－（空白對照孔RFU340nm/空白對照孔RFU380nm）÷（Zda對照孔RFU340nm/Zda對照孔RFU380nm－樣品RFU340nm/樣品RFU380nm）】X（空白對照孔RFU380nm/Zda對照孔RFU380nm）X140（納摩爾；解離常數(shù)）三、（共聚焦）或熒光顯微鏡檢測1．準(zhǔn)備1個(gè)待測的細(xì)胞爬片樣品小心加上500微升清理液（ReagentA），覆蓋樣品表面小心移去樣品上的清理液（ReagentA）移取300微升清理液（ReagentA）到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液，混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到樣品上，覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘，避免光照小心移去樣品上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）小心移去清理液（ReagentA）小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液（ReagentA）蓋上蓋玻片即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察：激發(fā)波長340至400nm，散發(fā)波長510nm（細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光）四、冰凍切片檢測準(zhǔn)備1個(gè)待測的冰凍切片小心加上500微升清理液（ReagentA），覆蓋切片樣品表面小心移去樣品上的清理液（ReagentA）移取300微升清理液（ReagentA）到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液，混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片樣品上，覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘，避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）小心移去清理液（ReagentA）小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液（ReagentA）蓋上蓋玻片即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察：激發(fā)波長340至400nm，散發(fā)波長510nm（組織細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光）注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次（顯微鏡）或60次（酶標(biāo)板）操作操作時(shí)，須戴手套可以使用熒光分光光度儀檢測如果細(xì)胞內(nèi)酯酶缺失，則建議使用微注射（microinjection）技術(shù)避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度檢測敏感度可達(dá)納摩爾級鈣濃度范圍本公司提供系列鈣生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:46

  安裝說明

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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2016-03-15 00:00

  選購指南

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• 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

  操作手冊

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• 組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo--AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化，來測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織（動(dòng)物、人體等）內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo--AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料，特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲，可以檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長490nm，散發(fā)波長525nm，來定量測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒

  主要用途細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化，來測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo-AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料，特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲，可以檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長490nm，散發(fā)波長525nm，來定量測定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化，來測定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM，羅丹明123（rhodamine123）的衍生產(chǎn)物，一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光，Rhod-2-AM，進(jìn)入細(xì)胞受到酯酶解離，同時(shí)其正電荷特性，特異性地聚集在線粒體里，由此用于測定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長550nm，散發(fā)波長590nm，來定量測定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）10毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀（22℃）：激發(fā)波長550nm，散發(fā)波長590nm測定開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板，標(biāo)記為：細(xì)胞樣品孔、空白對照孔（不含細(xì)胞）、Zda對照孔（含細(xì)胞）小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板，混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘，避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda對照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測讀：獲得相對熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【（樣品RFU－空白對照孔RFU）÷（Zda對照孔RFU－樣品RFU）】X570（納摩爾；解離常數(shù)）注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度檢測敏感度可達(dá)納摩爾級鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測本公司提供系列鈣生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化，來測定組織線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織（動(dòng)物、人體等）內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體純化。Rhod-2，羅丹明123（rhodamine123）的衍生產(chǎn)物，一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光，同時(shí)其正電荷特性，特異性地聚集在線粒體里，由此用于測定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長550nm，散發(fā)波長590nm，來定量測定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀（22℃）：激發(fā)波長550nm，散發(fā)波長590nm準(zhǔn)備好純化的線粒體樣品，置于冰槽里融化測定開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板，標(biāo)記為：線粒體樣品孔、空白對照孔（不含線粒體）、Zda對照孔（不含線粒體）移取100微升純化線粒體樣品（100微克）到線粒體樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板，混勻室溫下（22℃），孵育30分鐘，避免光照放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘，避免光照即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測讀：獲得相對熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【（樣品RFU－空白對照孔RFU）÷（Zda對照孔RFU－樣品RFU）】X570（納摩爾；解離常數(shù)）=納摩爾/100微克線粒體注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度檢測敏感度可達(dá)納摩爾級鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測本公司提供系列鈣生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

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• 植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過鈣離子特異性熒光探針Fluo-4，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化，來測定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）、胚胎葉（cotyledon）、上胚軸（epicotyl）等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4，一種與鈣離子結(jié)合，其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針，可以敏感測定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長485nm，散發(fā)波長520nm，來定量測定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）60毫升裂解液（ReagentB）20毫升反應(yīng)液（ReagentC）6毫升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；反應(yīng)液（ReagentC）避免光照；有效保證6月[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 組織鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒 說明書（中文版）

  組織鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒 說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2014-12-29 00:00

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• 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒

  大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 14:56

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• 人 （Human） 胞漿型磷脂酶A2 （cPLA2） ELISA 檢測試劑盒說明書

  人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：cPLA2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知cPLA2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將cPLA2和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中cPLA2的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：400U/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗cPLA2抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：400U/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200U/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100U/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50U/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25U/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5U/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0U/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（U/ml）A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的cPLA2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的cPLA2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-400U/ml4、敏感度：1.0U/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

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• 人胞漿型磷脂酶A2ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果

  人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：cPLA2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知cPLA2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將cPLA2和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中cPLA2的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：400U/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗cPLA2抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測試劑盒安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測試劑盒的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：400U/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200U/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100U/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50U/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25U/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5U/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0U/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（U/ml）A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的cPLA2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的cPLA2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-400U/ml4、敏感度：1.0U/ml[詳細(xì)]

  2018-09-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)檢測試劑盒

  人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-23 22:25

  課件

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• 精子DNA吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  精子DNA吖啶橙（acridineorange）熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途精子DNA吖啶橙（acridineorange）熒光檢測試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光，確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種動(dòng)物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡便，性能穩(wěn)定，熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)（Andrology）中，精子（spermatozoa）分析提供了精子生成（spermatogenesis）、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力（vitality）、運(yùn)動(dòng)能力（motility）、授精潛力（fertilizingpotential）、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性（integrity）、頂體反應(yīng)（acrosomalreaction）功能的評價(jià)是精子分析的重要指標(biāo)，也是決定人工受孕或體外授精（invitrofertilization；IVF）的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙（Acridineorange；AO）染色技術(shù)，是精子染色質(zhì)分析和授精效率評價(jià)的Z常用的方法?；谡＞蛹?xì)胞的染色質(zhì)完整性和DNA雙鏈特性，作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA，即雙鏈DNA嵌合（intercalate）時(shí)，呈現(xiàn)綠色熒光（激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長530nm）；而與變性DNA，即單鏈DNA結(jié)合時(shí)，呈現(xiàn)紅色熒光（激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長630nm），以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升固著液（ReagentB）毫升染色液（ReagentC）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里；染色液（ReagentC）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)：用于樣品操作血細(xì)胞計(jì)數(shù)器：用于細(xì)胞計(jì)數(shù)載玻片和蓋玻片：用于精子細(xì)胞爬片（共聚焦）熒光顯微鏡：用于觀察染色的精子細(xì)胞細(xì)胞流式儀：用于分析染色的精子細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、細(xì)胞流式儀分析1．移取新鮮獲得的1毫升精液（30分鐘至1小時(shí)內(nèi)）到1.5毫升離心管2．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群5．在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù)：1×107精子細(xì)胞/毫升6．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為600g7．小心抽去上清液8．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至7一次（不包括實(shí)驗(yàn)步驟5）9．加入xx微升染色液（ReagentB），混勻顆粒群10．室溫下孵育10分鐘，避免光照11．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為600g12．小心抽去上清液13．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群14．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為600g15．小心抽去上清液16．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13至15一次17．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群18．即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀雙通道分析：觀察10000個(gè)細(xì)胞以上，200細(xì)胞/秒；激發(fā)波長200mW，散發(fā)波長16mW激發(fā)波長488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素（FITC）藻紅蛋白（phycoerythrin；PE）熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長530630流式儀通道FL1FL3熒光增強(qiáng)正常精子DNA異常精子DNA19．細(xì)胞流式儀檢測正常精子DNA（雙鏈DNA）參考圖像如下（X軸：FL3；Y軸：FL1；R1左下角為細(xì)胞碎屑；R2為正常精子細(xì)胞；R3為異常精子細(xì)胞；R4為未成熟精子細(xì)胞）二、熒光顯微鏡分析1．移取新鮮獲得的1毫升精液（30分鐘至1小時(shí)內(nèi)）到1.5毫升離心管2．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群5．在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù)：1×107精子細(xì)胞/毫升6．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為600g7．小心抽去上清液8．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至7一次（不包括實(shí)驗(yàn)步驟5）9．加入xx毫升清理液（ReagentA），混勻顆粒群10．即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11．用蓋玻片或另一個(gè)載玻片推片12．置于空氣中涼干13．加上xx微升固著液（ReagentB），覆蓋樣品表面14．室溫下孵育2小時(shí)15．小心抽去固著液16．小心加上xx微升染色液（ReagentC），覆蓋樣品表面17．室溫下孵育5分鐘，避免光照18．小心抽去染色液19．小心加上xx微升清理液（ReagentA），覆蓋樣品表面20．小心抽去清理液21．蓋上蓋玻片22．即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)（注意：每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)精子）23．分析結(jié)果（參考圖）觀察紅色熒光：濾波器激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長630nm――可見黃色、桔紅色至紅色熒光，表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光：濾波器激發(fā)波長490nm，散發(fā)波長530nm――可見綠色熒光，表明精子DNA正常注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為50次操作2．操作時(shí)須戴手套3．樣品檢測前，建議在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù)4．精子細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)乘上稀釋倍數(shù)104。標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計(jì)數(shù)器（Hemocytometer）的計(jì)算方法是：1毫米方塊的細(xì)胞計(jì)數(shù)X104（稀釋倍數(shù)）＝實(shí)際細(xì)胞數(shù)/毫升5．染色完成后，即刻進(jìn)行檢測分析，否則由于其毒性導(dǎo)致精子DNA異常6．如果流式細(xì)胞儀出現(xiàn)干擾，建議使用630nm散發(fā)波長，或進(jìn)行補(bǔ)償處理，建議使用誘導(dǎo)處理樣品：10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7．本產(chǎn)品常用于凍存精子細(xì)胞的檢測分析8．本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析（SpermChromatinStructureAssay；SCSA），分析參數(shù)如下：%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計(jì)算方法紅色熒光：紅色＋綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人：小于15％正常人：小于10％閾值：小于30％閾值：小于15％高生育力：0－15％中等生育力：16－27％低或差生育力：27－30％參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9．本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit

  大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit[詳細(xì)]

  2015-10-10 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 豬鈣離子（Ca2+）ELISA試劑盒使用說明書

  南京森貝伽現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量保證，價(jià)格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定豬血清，血漿，細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬鈣離子（Ca2+）的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬鈣離子（Ca2+）水平。用純化的豬鈣離子（Ca2+）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入鈣離子（Ca2+），再與HRP標(biāo)記的鈣離子（Ca2+）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鈣離子（Ca2+）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬鈣離子（Ca2+）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：36umol/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為24umol/ml，16umol/ml，8umol/ml，4umol/ml，2umol/ml）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：0.8umol/ml-30umol/ml保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

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• 純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途純化線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測試劑是一種旨在通過鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù)，選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色，而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料，即刻發(fā)生熒光去除或淬滅，來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性（瞬時(shí)或長期開放狀態(tài)）的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，活體檢測，分辨率高，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔（mitochondrialpermeabilitytransitionpore；MPTP）是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí)，線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開放，顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放，而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM，又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素－乙酰氧基甲基酯【bis（bis-carboxymethylaminomethylfluorescein）-acetoxymethylester】，作為熒光探針：**，適宜的分子量622kd，小于1.5kd；第二，幾乎不具有膜結(jié)合性；第三，不是線粒體酶的底物；第四，容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后，被內(nèi)酯酶切離，產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素，被線粒體俘獲。同時(shí)線粒體外的鈣黃綠素通過離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開放，鈣黃綠素釋放出線粒體外，由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓砻髂ねǖ揽椎拈_放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液（ReagentA）微升中和液（ReagentB）毫升保存液（ReagentC）毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液（ReagentA）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備黑色96孔板：用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管：用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片：用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱：用于染色孵育（共聚焦）熒光顯微鏡：用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：用于線粒體熒光定量分析實(shí)驗(yàn)步驟直接法準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品（總量為0.2毫克）到1.5毫升離心管加入xx微升染色液（ReagentA），混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘，避免光照放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液（ReagentC），混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去保存液（ReagentC）小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液（ReagentC），混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作：（A）使用（共聚焦）熒光顯微鏡觀察（定性檢測）：1）移取10微升上述懸液到載波片上，蓋上蓋玻片2）激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測（定量檢測）：1）移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀：激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增強(qiáng)間接法實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentA）置入冰槽里融化，中和液（ReagentB）放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液（ReagentA）到新的1.5毫升離心管，加入xx微升中和液（ReagentB），混勻后，標(biāo)記為染色工作液，置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品（總量為0.2毫克）到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升含有染色液（ReagentA）和中和液（ReagentB）的染色工作液，充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘，避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作：使用（共聚焦）熒光顯微鏡觀察（定性檢測）：1）移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上，蓋上蓋玻片（每隔5分鐘檢測一次，持續(xù)30分鐘）2）激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測（定量檢測）：1）移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀（每隔5分鐘檢測一次，持續(xù)30分鐘）：激發(fā)波長488nm，散發(fā)波長505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增強(qiáng)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套染色前，所有試劑溶液，除染色液（ReagentA）外，需37℃預(yù)熱建議染色完成后，即刻進(jìn)行熒光檢測分析孵育時(shí)，必須避免光照本產(chǎn)品友好使用于雙重染色或重疊染色如果不具備505nm散發(fā)波長的濾波器，可以使用505nm至530nm中的任一波長如果黑色96孔板的背景讀數(shù)過高，可以選擇530nm散發(fā)波長如果膜通道孔為瞬時(shí)開放（transient），則熒光緩慢且自發(fā)降低本公司提供膜通道孔YZ劑：D0.2毫摩爾環(huán)胞素A（cyclosporineA）－12226，維護(hù)熒光完整本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細(xì)胞DNA損傷彗星（Comet）完全熒光檢測試劑是一種旨在采用動(dòng)物細(xì)胞堿性凝膠電泳，在電場環(huán)境下，損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài)，即DNA移動(dòng)尾巴，來進(jìn)行體外評價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞的DNA損傷研究，包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等，應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，性能穩(wěn)定，操作簡便，重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測技術(shù)（Cometassay），又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測技術(shù)（singlecellgelelectrophoresisassay；SCGE）或微凝膠電泳檢測技術(shù)（microgelelectrophoresisassay），是基于變性切離的DNA片段，在電場的影響下，從細(xì)胞中移出的原理，而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過凝膠電泳，呈現(xiàn)出分子遷移圖形，形成彗星拖尾（comettail）現(xiàn)象，即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭"，而松散和斷裂的DNA為“尾"，以此評價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是：**，細(xì)胞固定包埋在凝膠里；第二，細(xì)胞裂解處理；第三，DNA變性處理；第四，電泳遷移；第五，染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài)，進(jìn)行體外檢測，成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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