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• 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM，羅丹明123（rhodamine123）的衍生產(chǎn)物，一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光，Rhod-2-AM，進(jìn)入細(xì)胞受到酯酶解離，同時(shí)其正電荷特性，特異性地聚集在線粒體里，由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm，來(lái)定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）10毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀（22℃）：激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm測(cè)定開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板，標(biāo)記為：細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔（不含細(xì)胞）、Zda對(duì)照孔（含細(xì)胞）小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板，混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘，避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀：獲得相對(duì)熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【（樣品RFU－空白對(duì)照孔R(shí)FU）÷（Zda對(duì)照孔R(shí)FU－樣品RFU）】X570（納摩爾；解離常數(shù)）注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

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• 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定組織線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織（動(dòng)物、人體等）內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體純化。Rhod-2，羅丹明123（rhodamine123）的衍生產(chǎn)物，一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光，同時(shí)其正電荷特性，特異性地聚集在線粒體里，由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm，來(lái)定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀（22℃）：激發(fā)波長(zhǎng)550nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm準(zhǔn)備好純化的線粒體樣品，置于冰槽里融化測(cè)定開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板，標(biāo)記為：線粒體樣品孔、空白對(duì)照孔（不含線粒體）、Zda對(duì)照孔（不含線粒體）移取100微升純化線粒體樣品（100微克）到線粒體樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板，混勻室溫下（22℃），孵育30分鐘，避免光照放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘，避免光照即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀：獲得相對(duì)熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【（樣品RFU－空白對(duì)照孔R(shí)FU）÷（Zda對(duì)照孔R(shí)FU－樣品RFU）】X570（納摩爾；解離常數(shù)）=納摩爾/100微克線粒體注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí)，須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-19 10:00

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  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:46

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  細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2016-03-15 00:00

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• 植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)鈣離子特異性熒光探針Fluo-4，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織，包括種子（seed）、葉片（leaf）、根（root）、胚胎葉（cotyledon）、上胚軸（epicotyl）等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4，一種與鈣離子結(jié)合，其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針，可以敏感測(cè)定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)485nm，散發(fā)波長(zhǎng)520nm，來(lái)定量測(cè)定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）60毫升裂解液（ReagentB）20毫升反應(yīng)液（ReagentC）6毫升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；反應(yīng)液（ReagentC）避免光照；有效保證6月[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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  組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2014-12-29 00:00

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• 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2014-12-26 00:00

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• 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光（Fura-2）檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光（Fura-2）檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光（Fura-2）檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)線粒體鈣離子特異性熒光探針Fura-2-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下測(cè)量不同激發(fā)波長(zhǎng)下相對(duì)熒光峰值的比值，來(lái)測(cè)定細(xì)胞漿總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）或冰凍切片組織細(xì)胞漿鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中細(xì)胞漿鈣離子在調(diào)節(jié)鈣離子通道，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。細(xì)胞漿鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要線粒體、細(xì)胞漿分離。Fura-2AM（acetoxy-methylester），一種具有細(xì)胞膜通透性，與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光的染料，通過(guò)其不同激發(fā)波長(zhǎng)340nm/380nm產(chǎn)生的熒光信號(hào)比（散發(fā)波長(zhǎng)510nm）來(lái)極ng確測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子水平。產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介導(dǎo)液（ReagentC）600微升飽和液（ReagentD）2毫升陰性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介導(dǎo)液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱：用于染色孵育96孔培養(yǎng)板：用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀：用于熒光分析（共聚焦）熒光顯微鏡：用于熒光染色觀察實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀：激發(fā)波長(zhǎng)340nm和380nm，散發(fā)波長(zhǎng)510nm測(cè)定開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑盒中的染色液（ReagentB）室溫下融化，然后分別移出30微升介導(dǎo)液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升離心管，標(biāo)記為染色工作液，并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，標(biāo)記為：細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔（不含細(xì)胞）、Zda對(duì)照孔（含細(xì)胞）小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液（ReagentD）到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液（ReagentE）到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板，混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘，避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀：獲得相對(duì)熒光單位（relativefluorescenceunit；RFU）包括樣品RFU340nm、樣品RFU380nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm計(jì)算樣品細(xì)胞漿鈣離子濃度【（樣品RFU340nm/樣品RFU380nm）－（空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm/空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm）÷（Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm－樣品RFU340nm/樣品RFU380nm）】X（空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm）X140（納摩爾；解離常數(shù)）三、（共聚焦）或熒光顯微鏡檢測(cè)1．準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的細(xì)胞爬片樣品小心加上500微升清理液（ReagentA），覆蓋樣品表面小心移去樣品上的清理液（ReagentA）移取300微升清理液（ReagentA）到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液，混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到樣品上，覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘，避免光照小心移去樣品上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）小心移去清理液（ReagentA）小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液（ReagentA）蓋上蓋玻片即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察：激發(fā)波長(zhǎng)340至400nm，散發(fā)波長(zhǎng)510nm（細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光）四、冰凍切片檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的冰凍切片小心加上500微升清理液（ReagentA），覆蓋切片樣品表面小心移去樣品上的清理液（ReagentA）移取300微升清理液（ReagentA）到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液，混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片樣品上，覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘，避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）小心移去清理液（ReagentA）小心加上500微升新鮮的清理液（ReagentA）放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液（ReagentA）蓋上蓋玻片即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察：激發(fā)波長(zhǎng)340至400nm，散發(fā)波長(zhǎng)510nm（組織細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光）注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次（顯微鏡）或60次（酶標(biāo)板）操作操作時(shí)，須戴手套可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)如果細(xì)胞內(nèi)酯酶缺失，則建議使用微注射（microinjection）技術(shù)避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2024-09-16 01:24

  操作手冊(cè)

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• 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-03-30 00:00

  操作手冊(cè)

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• 組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）主要用途組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo--AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織（動(dòng)物、人體等）內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號(hào)通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo--AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料，特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲，可以檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)490nm，散發(fā)波長(zhǎng)525nm，來(lái)定量測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2015-05-04 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化，即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2，簡(jiǎn)稱(chēng)為CYP1A2，是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一，也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15％。與CYP1A1高度同源，特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個(gè)多態(tài)性變體，Z常見(jiàn)的是：1A和1F，與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥（porphyriacutaneatarda）相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）,以及脂類(lèi)合成包括膽固醇和類(lèi)固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記，其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下，轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮（resorufin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長(zhǎng)530nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm），來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板：用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測(cè)定準(zhǔn)備1．準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等），置于冰槽里2．設(shè)定好熒光分光光度儀（溫度為37℃）：激發(fā)波長(zhǎng)530nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm，并置零3．準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管4．加入xx微升緩沖液（ReagentA）到1號(hào)管5．分別加入xx微升緩沖液（ReagentA）到2至5號(hào)管6．移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到1號(hào)管，混勻7．小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到2號(hào)管，混勻8．小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到3號(hào)管，混勻9．小心移取xx微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到4號(hào)管，混勻10．將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表管號(hào)緩沖液（ReagentA）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號(hào)管納摩爾/升3微升微升2號(hào)管納摩爾/升4微升微升3號(hào)管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)獲得相對(duì)熒光讀數(shù)8．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）三、樣品測(cè)定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待測(cè)樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)：獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8．（選擇步驟）重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7，測(cè)讀新的樣品9．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計(jì)算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷10（分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)樣品2．分別移取xx微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．分別加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）4．分別加入xx微升底物液（ReagentC）5．分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測(cè)樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）6．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板7．在37℃溫度下孵育10分鐘8．即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)：獲得相對(duì)熒光讀數(shù)9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）10．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11．活性計(jì)算：[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為25次（比色皿）或85次（酶標(biāo)板）操作，包括標(biāo)準(zhǔn)液2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過(guò)程中，標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要（本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1）5．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定6．如果酶活性過(guò)低，可以增加反應(yīng)時(shí)間至30分鐘7．熒光測(cè)定后，比色皿須清洗徹底8．建議待測(cè)樣本為微粒體，其蛋白濃度為20微克/100微升；待測(cè)樣本為細(xì)胞裂解懸液，其蛋白濃度為100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）9．如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為：200－600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11．細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為：在37℃，pH7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個(gè)活性單位12．本公司提供系列毒理學(xué)檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  主要用途細(xì)胞色素P450酶系（CYP-ECOD）總活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)中乙氧基香豆素轉(zhuǎn)化為羥基香豆素后熒光峰值的變化，即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶系活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450酶系的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱(chēng)。其分成五十多個(gè)亞酶：CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）。乙氧基香豆素脫乙基酶（7-ethoxycoumarinO-deethylase；ECOD）的活性是細(xì)胞色素P450酶系的診斷標(biāo)記，其基于ECOD廣泛性催化細(xì)胞色素P450亞酶的活性。乙氧基香豆素（7-ethoxycoumarin）在乙氧基香豆素脫乙基酶的催化下，轉(zhuǎn)化為羥基香豆素（7-hydroxycoumarin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長(zhǎng)368nm，散發(fā)波長(zhǎng)456nm），來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒

  主要用途細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo-AM，與鈣離子結(jié)合后，其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)，在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化，來(lái)測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞（動(dòng)物、人體等）內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì)，占1150克。其中99％的鈣以氟磷灰石鈣（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式：一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣，其構(gòu)成約40％至50％的血清中的總鈣含量；另一種為彌散型游離鈣，其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣（complexedcalcium）和離子鈣（ionizedcalcium）。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi)，鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號(hào)通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾，維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技術(shù)，但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾，或者受限于儀器的特殊的要求，以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo-AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料，特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲，可以檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下，激發(fā)波長(zhǎng)490nm，散發(fā)波長(zhǎng)525nm，來(lái)定量測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

  細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化，即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2，簡(jiǎn)稱(chēng)為CYP1A2，是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一，也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15％。與CYP1A1高度同源，特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個(gè)多態(tài)性變體，Z常見(jiàn)的是：1A和1F，與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥（porphyriacutaneatarda）相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）,以及脂類(lèi)合成包括膽固醇和類(lèi)固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記，其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下，轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮（resorufin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長(zhǎng)530nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm），來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板：用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測(cè)定準(zhǔn)備1．準(zhǔn)備好待測(cè)樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等），置于冰槽里2．設(shè)定好熒光分光光度儀（溫度為37℃）：激發(fā)波長(zhǎng)530nm，散發(fā)波長(zhǎng)590nm，并置零3．準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管4．加入xx微升緩沖液（ReagentA）到1號(hào)管5．分別加入xx微升緩沖液（ReagentA）到2至5號(hào)管6．移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到1號(hào)管，混勻7．小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到2號(hào)管，混勻8．小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到3號(hào)管，混勻9．小心移取xx微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到4號(hào)管，混勻10．將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表管號(hào)緩沖液（ReagentA）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號(hào)管納摩爾/升3微升微升2號(hào)管納摩爾/升4微升微升3號(hào)管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)獲得相對(duì)熒光讀數(shù)8．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）三、樣品測(cè)定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待測(cè)樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)：獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8．（選擇步驟）重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7，測(cè)讀新的樣品9．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計(jì)算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷10（分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測(cè)定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)樣品2．分別移取xx微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．分別加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）4．分別加入xx微升底物液（ReagentC）5．分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測(cè)樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）6．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板7．在37℃溫度下孵育10分鐘8．即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)：獲得相對(duì)熒光讀數(shù)9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）10．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11．活性計(jì)算：[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為25次（比色皿）或85次（酶標(biāo)板）操作，包括標(biāo)準(zhǔn)液2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過(guò)程中，標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要（本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1）5．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定6．如果酶活性過(guò)低，可以增加反應(yīng)時(shí)間至30分鐘7．熒光測(cè)定后，比色皿須清洗徹底8．建議待測(cè)樣本為微粒體，其蛋白濃度為20微克/100微升；待測(cè)樣本為細(xì)胞裂解懸液，其蛋白濃度為100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）9．如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低，可以調(diào)整樣品濃度10.通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為：200－600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11．細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為：在37℃，pH7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個(gè)活性單位12．本公司提供系列毒理學(xué)檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-07 00:00

  課件

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• 細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-07 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 大鼠細(xì)胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

  大鼠細(xì)胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-07 00:00

  期刊論文

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• 真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

  真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]

  2015-05-04 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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