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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
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2018-11-18 10:00 2269閱讀次數(shù)
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Fura-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下測(cè)量不同激發(fā)波長(zhǎng)下相對(duì)熒光峰值的比值,來測(cè)定細(xì)胞漿總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)或冰凍切片組織細(xì)胞漿鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中細(xì)胞漿鈣離子在調(diào)節(jié)鈣離子通道,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。細(xì)胞漿鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體、細(xì)胞漿分離。Fura-2AM(acetoxy-methylester),一種具有細(xì)胞膜通透性,與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光的染料,通過其不同激發(fā)波長(zhǎng)340nm/380nm產(chǎn)生的熒光信號(hào)比(散發(fā)波長(zhǎng)510nm)來極ng確測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子水平。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育96孔培養(yǎng)板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析(共聚焦)熒光顯微鏡:用于熒光染色觀察實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)340nm和380nm,散發(fā)波長(zhǎng)510nm測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,標(biāo)記為:細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔(不含細(xì)胞)、Zda對(duì)照孔(含細(xì)胞)小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板,混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)包括樣品RFU340nm、樣品RFU380nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm計(jì)算樣品細(xì)胞漿鈣離子濃度【(樣品RFU340nm/樣品RFU380nm)-(空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm/空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm-樣品RFU340nm/樣品RFU380nm)】X(空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm)X140(納摩爾;解離常數(shù))三、(共聚焦)或熒光顯微鏡檢測(cè)1.準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的細(xì)胞爬片樣品小心加上500微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面小心移去樣品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液,混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到樣品上,覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心移去樣品上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液(ReagentA)蓋上蓋玻片即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察:激發(fā)波長(zhǎng)340至400nm,散發(fā)波長(zhǎng)510nm(細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光)四、冰凍切片檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的冰凍切片小心加上500微升清理液(ReagentA),覆蓋切片樣品表面小心移去樣品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液,混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片樣品上,覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液(ReagentA)蓋上蓋玻片即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察:激發(fā)波長(zhǎng)340至400nm,散發(fā)波長(zhǎng)510nm(組織細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次(顯微鏡)或60次(酶標(biāo)板)操作操作時(shí),須戴手套可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)如果細(xì)胞內(nèi)酯酶缺失,則建議使用微注射(microinjection)技術(shù)避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光(Fura-2)檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Fura-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下測(cè)量不同激發(fā)波長(zhǎng)下相對(duì)熒光峰值的比值,來測(cè)定細(xì)胞漿總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)或冰凍切片組織細(xì)胞漿鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中細(xì)胞漿鈣離子在調(diào)節(jié)鈣離子通道,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。細(xì)胞漿鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體、細(xì)胞漿分離。Fura-2AM(acetoxy-methylester),一種具有細(xì)胞膜通透性,與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光的染料,通過其不同激發(fā)波長(zhǎng)340nm/380nm產(chǎn)生的熒光信號(hào)比(散發(fā)波長(zhǎng)510nm)來極ng確測(cè)定細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子水平。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育96孔培養(yǎng)板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析(共聚焦)熒光顯微鏡:用于熒光染色觀察實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)340nm和380nm,散發(fā)波長(zhǎng)510nm測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,標(biāo)記為:細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔(不含細(xì)胞)、Zda對(duì)照孔(含細(xì)胞)小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板,混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)包括樣品RFU340nm、樣品RFU380nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm、空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm、Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm計(jì)算樣品細(xì)胞漿鈣離子濃度【(樣品RFU340nm/樣品RFU380nm)-(空白對(duì)照孔R(shí)FU340nm/空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU340nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm-樣品RFU340nm/樣品RFU380nm)】X(空白對(duì)照孔R(shí)FU380nm/Zda對(duì)照孔R(shí)FU380nm)X140(納摩爾;解離常數(shù))三、(共聚焦)或熒光顯微鏡檢測(cè)1.準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的細(xì)胞爬片樣品小心加上500微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面小心移去樣品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液,混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到樣品上,覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心移去樣品上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液(ReagentA)蓋上蓋玻片即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察:激發(fā)波長(zhǎng)340至400nm,散發(fā)波長(zhǎng)510nm(細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光)四、冰凍切片檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)待測(cè)的冰凍切片小心加上500微升清理液(ReagentA),覆蓋切片樣品表面小心移去樣品上的清理液(ReagentA)移取300微升清理液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管加入30微升染色工作液,混勻小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片樣品上,覆蓋樣品表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)小心移去清理液(ReagentA)小心加上500微升新鮮的清理液(ReagentA)放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘小心移去清理液(ReagentA)蓋上蓋玻片即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察:激發(fā)波長(zhǎng)340至400nm,散發(fā)波長(zhǎng)510nm(組織細(xì)胞漿鈣離子呈現(xiàn)藍(lán)色熒光)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次(顯微鏡)或60次(酶標(biāo)板)操作操作時(shí),須戴手套可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)如果細(xì)胞內(nèi)酯酶缺失,則建議使用微注射(microinjection)技術(shù)避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-12-26 00:00
期刊論文
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,Rhod-2-AM,進(jìn)入細(xì)胞受到酯酶解離,同時(shí)其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)550nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm,來定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)10毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長(zhǎng)550nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板,標(biāo)記為:細(xì)胞樣品孔、空白對(duì)照孔(不含細(xì)胞)、Zda對(duì)照孔(含細(xì)胞)小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板,混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對(duì)照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對(duì)照孔R(shí)FU)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定組織線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織(動(dòng)物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,同時(shí)其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)550nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm,來定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長(zhǎng)550nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm準(zhǔn)備好純化的線粒體樣品,置于冰槽里融化測(cè)定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)準(zhǔn)備1個(gè)黑色96孔板,標(biāo)記為:線粒體樣品孔、空白對(duì)照孔(不含線粒體)、Zda對(duì)照孔(不含線粒體)移取100微升純化線粒體樣品(100微克)到線粒體樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對(duì)照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對(duì)照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動(dòng)黑色96孔板,混勻室溫下(22℃),孵育30分鐘,避免光照放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測(cè)讀:獲得相對(duì)熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計(jì)算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對(duì)照孔R(shí)FU)÷(Zda對(duì)照孔R(shí)FU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))=納摩爾/100微克線粒體注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測(cè)敏感度可達(dá)納摩爾級(jí)鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測(cè)本公司提供系列鈣生化檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:46
安裝說明
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2016-03-15 00:00
選購(gòu)指南
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植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過鈣離子特異性熒光探針Fluo-4,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4,一種與鈣離子結(jié)合,其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針,可以敏感測(cè)定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)485nm,散發(fā)波長(zhǎng)520nm,來定量測(cè)定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升反應(yīng)液(ReagentC)6毫升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentC)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說明書(中文版)
- 組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-29 00:00
報(bào)價(jià)單
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細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
操作手冊(cè)
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組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo--AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織(動(dòng)物、人體等)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號(hào)通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo--AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料,特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲,可以檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)490nm,散發(fā)波長(zhǎng)525nm,來定量測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人 (Human) 胞漿型磷脂酶A2 (cPLA2) ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書
- 人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:cPLA2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知cPLA2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將cPLA2和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中cPLA2的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:400U/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗cPLA2抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:400U/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200U/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100U/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50U/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25U/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5U/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0U/ml(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(U/ml)A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的cPLA2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的cPLA2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-400U/ml4、敏感度:1.0U/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人胞漿型磷脂酶A2ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果
- 人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:cPLA2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知cPLA2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將cPLA2和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中cPLA2的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:400U/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗cPLA2抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測(cè)試劑盒安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測(cè)試劑盒的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:400U/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200U/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100U/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50U/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25U/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5U/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0U/ml(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(U/ml)A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人(Human)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的cPLA2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的cPLA2含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-400U/ml4、敏感度:1.0U/ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)檢測(cè)試劑盒
- 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-23 22:25
課件
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細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子特異性熒光探針Mag-Fluo-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子儲(chǔ)存在控制細(xì)胞活化、調(diào)控信號(hào)通路、蛋白分子轉(zhuǎn)錄后修飾,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)純化。Mag-Fluo-AM染料是一種鈣離子低親和性的熒光標(biāo)記染料,特異性地由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)捕獲,可以檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的游離鈣離子濃度的變化。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)490nm,散發(fā)波長(zhǎng)525nm,來定量測(cè)定內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒
- 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 14:56
選購(gòu)指南
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FLIPR產(chǎn)品應(yīng)用(3)Fura-2 QBT試劑盒— — 新型均相Fura-2鈣流檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
- Fura-2 染料一直以來被認(rèn)為是在細(xì)胞成像、GPCR 介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣流、以及離子通道激活等實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)鈣動(dòng)員的重要工具。[詳細(xì)]
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2021-02-22 13:38
應(yīng)用文章
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大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit
- 大鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit[詳細(xì)]
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2015-10-10 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豬鈣離子(Ca2+)ELISA試劑盒使用說明書
- 南京森貝伽現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量保證,價(jià)格優(yōu)惠,試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定豬血清,血漿,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豬鈣離子(Ca2+)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬鈣離子(Ca2+)水平。用純化的豬鈣離子(Ca2+)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入鈣離子(Ca2+),再與HRP標(biāo)記的鈣離子(Ca2+)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鈣離子(Ca2+)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬鈣離子(Ca2+)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:36umol/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為24umol/ml,16umol/ml,8umol/ml,4umol/ml,2umol/ml)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:0.8umol/ml-30umol/ml保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊(cè)
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鈣離子復(fù)合電極說明書
- 復(fù)合離子電極使用說明書由上海恒磁電子科技有限公司提供,僅供參考地址:上海楊浦區(qū)延吉東路390號(hào)聯(lián)系人:郝先生電話:021-35304675手機(jī):1391684770218019187435傳真:021-35300952網(wǎng)址:www.hengci1718.com郵箱:www.hengci17@163.com公司QQ:1976289431[詳細(xì)]
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2018-10-02 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書
- 肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。肌漿球蛋白(Myo)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlABAb人抗腦組織抗體規(guī)格:48T/96TABAb人抗腦組織抗體規(guī)格:48T/96TIFA人抗內(nèi)因子抗體規(guī)格:48T/96TAECA人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TAGA人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體規(guī)格:48T/96TAGA人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體規(guī)格:48T/96TAOAb人抗卵巢抗體規(guī)格:48T/96TEHF人抗流行性出血熱病毒抗體IgM規(guī)格:48T/96TEHF人抗流行性出血熱病毒抗體IgM規(guī)格:48T/96TEHF人抗流行性出血熱病毒抗體IgG規(guī)格:48T/96TAPSA人抗磷脂酰絲氨酸抗體規(guī)格:48T/96TAPSA人抗磷脂酰絲氨酸抗體規(guī)格:48T/96TApl/APA人抗磷脂抗體規(guī)格:48T/96TTA人抗磷壁酸抗體規(guī)格:48T/96TTA人抗磷壁酸抗體規(guī)格:48T/96TALG人抗淋巴細(xì)胞球蛋白規(guī)格:48T/96TALA人抗淋巴細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TASO人抗鏈球菌溶血素O/抗O規(guī)格:48T/96TADH/VP/AVP人抗利尿激素/精氨酸加壓素規(guī)格:48T/96TSCA人抗類固醇細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TRANA人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體規(guī)格:48T/96TRANA人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體規(guī)格:48T/96Tanti-RV人抗狂犬病毒抗體規(guī)格:48T/96Tanti-RV人抗狂犬病毒抗體規(guī)格:48T/96TENA-Ab人抗可提取核抗原抗體規(guī)格:48T/96TSLA人抗可溶性肝抗原抗體規(guī)格:48T/96TAttacin人KJ肽規(guī)格:48T/96Tanti-CMVIgM人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM規(guī)格:48T/96Tanti-CMVIgM人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgM規(guī)格:48T/96Tanti-CMVIgG人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG規(guī)格:48T/96Tanti-macrophageAb人抗巨噬細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TTRACP-5b人抗酒石酸酸性磷酸酶5b規(guī)格:48T/96TAsAb人抗精子抗體規(guī)格:48T/96TAFA人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體規(guī)格:48T/96TAKA人抗角蛋白抗體規(guī)格:48T/96TCLA人抗膠原蛋白抗體規(guī)格:48T/96TATMA/TMAB人抗甲狀腺微粒體抗體規(guī)格:48T/96TATGA/TGAB人抗甲狀腺球蛋白抗體規(guī)格:48T/96TTPO-Ab人抗甲狀腺過氧化物酶抗體規(guī)格:48T/96Tanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgM抗體規(guī)格:48T/96Tanti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗體規(guī)格:48T/96TEMAIgA人抗肌內(nèi)膜抗體IgA規(guī)格:48T/96TTTN人抗肌聯(lián)蛋白抗體規(guī)格:48T/96TAAA人抗肌動(dòng)蛋白抗體規(guī)格:48T/96TCCP人抗環(huán)胍氨酸肽抗體規(guī)格:48T/96TRSV人抗呼吸道合胞病毒抗體規(guī)格:48T/96TRBC人抗紅細(xì)胞抗體規(guī)格:48T/96TAPF人抗核周因子抗體規(guī)格:48T/96TANF人抗核因子抗體規(guī)格:48T/96TAnuA-IgG人抗核小體抗體IgG規(guī)格:48T/96TARPA/Rib-P人抗核糖體P蛋白抗體規(guī)格:48T/96TRNP-Ab人抗核糖核蛋白抗體規(guī)格:48T/96TAFA/snoRNP/U3RNP人抗核仁纖維蛋白抗體規(guī)格:48T/96TANA人抗核仁抗體規(guī)格:48T/96Tgp210人抗核膜糖蛋白210抗體規(guī)格:48T/96TANA人抗核抗體規(guī)格:48T/96TASA人抗骨骼肌抗體規(guī)格:48T/96Tanti-toxIgM人抗弓形體IgM抗體規(guī)格:48T/96Tanti-toxIgG人抗弓形體IgG抗體規(guī)格:48T/96TAGAA人抗高爾基體抗體規(guī)格:48T/96TLMA人抗肝細(xì)胞膜抗體規(guī)格:48T/96TLC1人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體規(guī)格:48T/96TLSP人抗肝特異性脂蛋白抗體規(guī)格:48T/96TLSP人抗肝特異性脂蛋白抗體規(guī)格:48T/96TLKM人抗肝腎微粒體抗體規(guī)格:48T/96TCAM-ab人抗鈣調(diào)素特異抗體規(guī)格:48T/96TACAST-DⅣ人抗鈣蛋白酶抑素抗體規(guī)格:48T/96Tanti-PIVIgM人抗副流感病毒IgM抗體規(guī)格:48T/96Tanti-RVIgG人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體規(guī)格:48T/96TABM-Ab人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2018-10-09 10:00
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