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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
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2018-11-18 10:00 1187閱讀次數(shù)
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主要用途純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料,即刻發(fā)生熒光去除或淬滅,來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性(瞬時(shí)或長(zhǎng)期開(kāi)放狀態(tài))的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開(kāi)放,顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM,又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作為熒光探針:**,適宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,幾乎不具有膜結(jié)合性;第三,不是線粒體酶的底物;第四,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后,被內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素,被線粒體俘獲。同時(shí)線粒體外的鈣黃綠素通過(guò)離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開(kāi)放,鈣黃綠素釋放出線粒體外,由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓砻髂ねǖ揽椎拈_(kāi)放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備黑色96孔板:用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管:用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片:用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于線粒體熒光定量分析實(shí)驗(yàn)步驟直接法準(zhǔn)備好待測(cè)的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管加入xx微升染色液(ReagentA),混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作:(A)使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):1)移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片2)激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)間接法實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測(cè)的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作:使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片(每隔5分鐘檢測(cè)一次,持續(xù)30分鐘)2)激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀(每隔5分鐘檢測(cè)一次,持續(xù)30分鐘):激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套染色前,所有試劑溶液,除染色液(ReagentA)外,需37℃預(yù)熱建議染色完成后,即刻進(jìn)行熒光檢測(cè)分析孵育時(shí),必須避免光照本產(chǎn)品友好使用于雙重染色或重疊染色如果不具備505nm散發(fā)波長(zhǎng)的濾波器,可以使用505nm至530nm中的任一波長(zhǎng)如果黑色96孔板的背景讀數(shù)過(guò)高,可以選擇530nm散發(fā)波長(zhǎng)如果膜通道孔為瞬時(shí)開(kāi)放(transient),則熒光緩慢且自發(fā)降低本公司提供膜通道孔YZ劑:D0.2毫摩爾環(huán)胞素A(cyclosporineA)-12226,維護(hù)熒光完整本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒
- 主要用途純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料,即刻發(fā)生熒光去除或淬滅,來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性(瞬時(shí)或長(zhǎng)期開(kāi)放狀態(tài))的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開(kāi)放,顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM,又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作為熒光探針:**,適宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,幾乎不具有膜結(jié)合性;第三,不是線粒體酶的底物;第四,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后,被內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素,被線粒體俘獲。同時(shí)線粒體外的鈣黃綠素通過(guò)離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開(kāi)放,鈣黃綠素釋放出線粒體外,由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓砻髂ねǖ揽椎拈_(kāi)放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備黑色96孔板:用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管:用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片:用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于線粒體熒光定量分析實(shí)驗(yàn)步驟直接法準(zhǔn)備好待測(cè)的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管加入xx微升染色液(ReagentA),混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作:(A)使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):1)移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片2)激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)間接法實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測(cè)的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作:使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片(每隔5分鐘檢測(cè)一次,持續(xù)30分鐘)2)激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀(每隔5分鐘檢測(cè)一次,持續(xù)30分鐘):激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料,即刻發(fā)生熒光去除或淬滅,來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性(瞬時(shí)或長(zhǎng)期開(kāi)放狀態(tài))的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開(kāi)放,顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM,又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作為熒光探針:**,適宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,幾乎不具有膜結(jié)合性;第三,不是線粒體酶的底物;第四,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后,被內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素,被線粒體俘獲。同時(shí)線粒體外的鈣黃綠素通過(guò)離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開(kāi)放,鈣黃綠素釋放出線粒體外,由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓?,表明膜通道孔的開(kāi)放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備黑色96孔板:用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管:用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片:用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于線粒體熒光定量分析實(shí)驗(yàn)步驟直接法準(zhǔn)備好待測(cè)的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管加入xx微升染色液(ReagentA),混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作:(A)使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):1)移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片2)激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)間接法實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測(cè)的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作:使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)):1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片(每隔5分鐘檢測(cè)一次,持續(xù)30分鐘)2)激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀(每隔5分鐘檢測(cè)一次,持續(xù)30分鐘):激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套染色前,所有試劑溶液,除染色液(ReagentA)外,需37℃預(yù)熱建議染色完成后,即刻進(jìn)行熒光檢測(cè)分析孵育時(shí),必須避免光照本產(chǎn)品友好使用于雙重染色或重疊染色如果不具備505nm散發(fā)波長(zhǎng)的濾波器,可以使用505nm至530nm中的任一波長(zhǎng)如果黑色96孔板的背景讀數(shù)過(guò)高,可以選擇530nm散發(fā)波長(zhǎng)如果膜通道孔為瞬時(shí)開(kāi)放(transient),則熒光緩慢且自發(fā)降低本公司提供膜通道孔YZ劑:D0.2毫摩爾環(huán)胞素A(cyclosporineA)-12226,維護(hù)熒光完整本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2016-03-10 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2016-03-15 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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BEIZHUO 純化線粒體膜通道孔(MPTP)比色法檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- BEIZHUO純化線粒體膜通道孔(MPTP)比色法檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)比色法檢測(cè)線粒體的體積(膨脹性)變化,來(lái)實(shí)時(shí)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔子線粒體膜通道孔(MPTP)elisa試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 兔子線粒體膜通道孔(MPTP)elisa試劑盒試劑盒使用說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2014-02-24 00:00
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活體細(xì)胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測(cè)
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)四甲基羅丹明甲酯染料,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,一旦釋放到細(xì)胞漿,即刻發(fā)生熒光淬滅,來(lái)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞線粒體(動(dòng)物、人體、昆蟲(chóng)等)膜通道孔活性(開(kāi)放狀態(tài))的檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,活體檢測(cè),分辨率高,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過(guò)膜通道孔釋放到胞漿中。線粒體膜電位的去極化(depolarization),導(dǎo)致膜通道孔的開(kāi)放,顯著改變線粒體的通透性,使之線粒體膨脹(swel領(lǐng)),內(nèi)容物釋放。其中鈣離子過(guò)度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開(kāi)放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。四甲基羅丹明甲酯(tetramethylrhodaminemethylester;TMRM),為羅丹明衍生物陽(yáng)離子染料,作為電勢(shì)測(cè)定(potentiometric)熒光探針:**,具有親脂性的;第二,與線粒體內(nèi)膜負(fù)電極結(jié)合而聚集;第三,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。四甲基羅丹明甲酯進(jìn)入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生四甲基羅丹明。四甲基羅丹明進(jìn)入線粒體后,被線粒體俘獲,呈現(xiàn)強(qiáng)烈熒光。一旦線粒體膜通道孔開(kāi)放,四甲基羅丹明釋放出來(lái)而在胞漿重新分布,其熒光性顯著降低。線粒體內(nèi)熒光的變化,表明膜通道孔的開(kāi)放狀態(tài)。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子DNA吖啶橙熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途精子DNA吖啶橙(acridineorange)熒光檢測(cè)試劑是一種旨在使用吖啶橙染料使單鏈和雙鏈DNA呈現(xiàn)不同熒光,確定精子染色質(zhì)質(zhì)量或DNA損傷的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種動(dòng)物或人體精子細(xì)胞以及凍存精子細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景在男科學(xué)(Andrology)中,精子(spermatozoa)分析提供了精子生成(spermatogenesis)、精子壽命、以及生育能力的基礎(chǔ)信息。其中精子的活力(vitality)、運(yùn)動(dòng)能力(motility)、授精潛力(fertilizingpotential)、膜結(jié)構(gòu)或染色質(zhì)結(jié)構(gòu)完整性(integrity)、頂體反應(yīng)(acrosomalreaction)功能的評(píng)價(jià)是精子分析的重要指標(biāo),也是決定人工受孕或體外授精(invitrofertilization;IVF)的重要參數(shù)。精子DNA損傷或染色質(zhì)質(zhì)量是不育癥的主要因素之一。使用陽(yáng)離子三環(huán)胺熒光染料吖啶橙(Acridineorange;AO)染色技術(shù),是精子染色質(zhì)分析和授精效率評(píng)價(jià)的Z常用的方法。基于正常精子細(xì)胞的染色質(zhì)完整性和DNA雙鏈特性,作為DNA染色劑之一的吖啶橙與正常非變性DNA,即雙鏈DNA嵌合(intercalate)時(shí),呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)530nm);而與變性DNA,即單鏈DNA結(jié)合時(shí),呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)630nm),以此定量分析精子質(zhì)量或DNA損傷。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升固著液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里;染色液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品操作血細(xì)胞計(jì)數(shù)器:用于細(xì)胞計(jì)數(shù)載玻片和蓋玻片:用于精子細(xì)胞爬片(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察染色的精子細(xì)胞細(xì)胞流式儀:用于分析染色的精子細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、細(xì)胞流式儀分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時(shí)內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù):1×107精子細(xì)胞/毫升6.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至7一次(不包括實(shí)驗(yàn)步驟5)9.加入xx微升染色液(ReagentB),混勻顆粒群10.室溫下孵育10分鐘,避免光照11.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g12.小心抽去上清液13.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群14.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g15.小心抽去上清液16.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13至15一次17.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群18.即刻進(jìn)行細(xì)胞流式儀雙通道分析:觀察10000個(gè)細(xì)胞以上,200細(xì)胞/秒;激發(fā)波長(zhǎng)200mW,散發(fā)波長(zhǎng)16mW激發(fā)波長(zhǎng)488nm488nm匹配熒光染料異硫氰酸熒光素(FITC)藻紅蛋白(phycoerythrin;PE)熒光顏色綠色紅色散發(fā)波長(zhǎng)530630流式儀通道FL1FL3熒光增強(qiáng)正常精子DNA異常精子DNA19.細(xì)胞流式儀檢測(cè)正常精子DNA(雙鏈DNA)參考圖像如下(X軸:FL3;Y軸:FL1;R1左下角為細(xì)胞碎屑;R2為正常精子細(xì)胞;R3為異常精子細(xì)胞;R4為未成熟精子細(xì)胞)二、熒光顯微鏡分析1.移取新鮮獲得的1毫升精液(30分鐘至1小時(shí)內(nèi))到1.5毫升離心管2.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g3.小心抽去上清液4.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群5.在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù):1×107精子細(xì)胞/毫升6.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為600g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟4至7一次(不包括實(shí)驗(yàn)步驟5)9.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻顆粒群10.即刻移取20微升到潔凈的載玻片一端11.用蓋玻片或另一個(gè)載玻片推片12.置于空氣中涼干13.加上x(chóng)x微升固著液(ReagentB),覆蓋樣品表面14.室溫下孵育2小時(shí)15.小心抽去固著液16.小心加上x(chóng)x微升染色液(ReagentC),覆蓋樣品表面17.室溫下孵育5分鐘,避免光照18.小心抽去染色液19.小心加上x(chóng)x微升清理液(ReagentA),覆蓋樣品表面20.小心抽去清理液21.蓋上蓋玻片22.即刻在(共聚焦)熒光顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)(注意:每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)精子)23.分析結(jié)果(參考圖)觀察紅色熒光:濾波器激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)630nm――可見(jiàn)黃色、桔紅色至紅色熒光,表明精子DNA損傷包括單鏈DNA觀察綠色熒光:濾波器激發(fā)波長(zhǎng)490nm,散發(fā)波長(zhǎng)530nm――可見(jiàn)綠色熒光,表明精子DNA正常注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為50次操作2.操作時(shí)須戴手套3.樣品檢測(cè)前,建議在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù)4.精子細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)乘上稀釋倍數(shù)104。標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞計(jì)數(shù)器(Hemocytometer)的計(jì)算方法是:1毫米方塊的細(xì)胞計(jì)數(shù)X104(稀釋倍數(shù))=實(shí)際細(xì)胞數(shù)/毫升5.染色完成后,即刻進(jìn)行檢測(cè)分析,否則由于其毒性導(dǎo)致精子DNA異常6.如果流式細(xì)胞儀出現(xiàn)干擾,建議使用630nm散發(fā)波長(zhǎng),或進(jìn)行補(bǔ)償處理,建議使用誘導(dǎo)處理樣品:10單位DNaseI/毫升37℃孵育10分鐘或直接70℃孵育30分鐘7.本產(chǎn)品常用于凍存精子細(xì)胞的檢測(cè)分析8.本產(chǎn)品可以用于精子染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析(SpermChromatinStructureAssay;SCSA),分析參數(shù)如下:%DFI%HDS名詞解釋DNA斷裂指數(shù)DNAFragmentationIndexDNA著色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN計(jì)算方法紅色熒光:紅色+綠色熒光之比高亮綠色熒光參考值正常人:小于15%正常人:小于10%閾值:小于30%閾值:小于15%高生育力:0-15%中等生育力:16-27%低或差生育力:27-30%參數(shù)意義DNA損傷程度精子成熟程度9.本公司提供系列發(fā)育生物學(xué)相關(guān)檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途糞便DNA高質(zhì)純化試劑是一種旨在經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)分離法以后,由糞便(人體、動(dòng)物等)中分離獲得的DNA,進(jìn)行二度親和純化,Zda限度地去除復(fù)雜又難以去除的蛋白、金屬成分、雜質(zhì)等非核酸類物質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其應(yīng)用于即時(shí)PCR、RLPF分析、測(cè)序、雜交、遺傳鑒定、突變分析、性別鑒定、司法鑒定等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡(jiǎn)單,純度出色,重復(fù)性好,堪稱國(guó)際上同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景糞便中含有許多污染成分,降解DNA和YZPCR反應(yīng)。針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)處理無(wú)法有效地去除頑固干擾因子的情況下,運(yùn)用特殊親和技術(shù),達(dá)到高度純化的效果。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)2毫升親和液(ReagentJ)2毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于DNA純化操作的容器微型臺(tái)式離心機(jī)(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反應(yīng)物恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟1.準(zhǔn)備好從1克糞便樣品分離的DNA產(chǎn)物(100微克DNA總量)2.移入到1.5毫升離心管3.加入適量的緩沖液(ReagentA)到總?cè)萘繛?00微升4.加入100微升親和液(ReagentB)(注意:使用前,先搖勻沉淀的親和液(ReagentB))5.用手充分混勻6.放進(jìn)56℃恒溫水槽孵育30分鐘,期間用手混勻一次7.放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升離心管9.移出適量DNA溶液進(jìn)行后續(xù)PCR反應(yīng)或保存在-20℃冰箱里注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為20次(1克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作或50次(200毫克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作2.操作時(shí),須戴手套3.根據(jù)用戶樣品量大小,相應(yīng)調(diào)整試劑用量4.親和液(ReagentB)使用前,須搖勻5.建議使用糞便DNA分離試劑盒(HL20011.1)作為標(biāo)準(zhǔn)分離法操作6.本公司提供系列糞便核酸純化試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純度優(yōu)異[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 純化線粒體溶解試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:04
課件
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PCR產(chǎn)物純化試劑盒說(shuō)明書(shū)
- PCR產(chǎn)物純化試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2016-05-25 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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PCR純化試劑盒/DNA純化試劑盒
- PCR純化試劑盒/DNA純化試劑盒[詳細(xì)]
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2015-09-11 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒
- PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒[詳細(xì)]
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2014-12-11 00:00
期刊論文
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胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2014-12-26 00:00
期刊論文
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途細(xì)胞DNA損傷彗星(Comet)完全熒光檢測(cè)試劑是一種旨在采用動(dòng)物細(xì)胞堿性凝膠電泳,在電場(chǎng)環(huán)境下,損傷變性的DNA片段遷移形成特定的形態(tài),即DNA移動(dòng)尾巴,來(lái)進(jìn)行體外評(píng)價(jià)和半定量分析DNA損傷程度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于新鮮動(dòng)物細(xì)胞的DNA損傷研究,包括DNA鏈斷裂、氧化性堿基損傷、DNA剪切損傷、DNA交聯(lián)、DNA修復(fù)等,應(yīng)用于環(huán)境和藥物毒理學(xué)、放射學(xué)、氧化應(yīng)急反應(yīng)等研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡(jiǎn)便,重復(fù)一致。技術(shù)背景彗星檢測(cè)技術(shù)(Cometassay),又稱為單細(xì)胞凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)(singlecellgelelectrophoresisassay;SCGE)或微凝膠電泳檢測(cè)技術(shù)(microgelelectrophoresisassay),是基于變性切離的DNA片段,在電場(chǎng)的影響下,從細(xì)胞中移出的原理,而完整的超螺旋DNA仍然保持在細(xì)胞核內(nèi)。通過(guò)凝膠電泳,呈現(xiàn)出分子遷移圖形,形成彗星拖尾(comettail)現(xiàn)象,即完整DNA的細(xì)胞染色體為“頭",而松散和斷裂的DNA為“尾",以此評(píng)價(jià)DNA損傷程度。這是分析單一細(xì)胞DNA鏈斷裂的敏感方法之一。其技術(shù)方法的基本步驟是:**,細(xì)胞固定包埋在凝膠里;第二,細(xì)胞裂解處理;第三,DNA變性處理;第四,電泳遷移;第五,染色和圖像分析。由此觀察DNA遷移形態(tài),進(jìn)行體外檢測(cè),成為細(xì)胞DNA損傷研究的基本手段。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光檢測(cè)試劑是一種旨在使用透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在細(xì)胞氧化條件下,產(chǎn)生熒光,來(lái)定量檢測(cè)精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于動(dòng)物和人體精子細(xì)胞的活性氧族的檢測(cè)??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué),以及發(fā)育生物學(xué)(男性不育)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。其中精子細(xì)胞(spermatozoa)對(duì)于活性氧較為敏感:低濃度活性氧可以調(diào)節(jié)正常精子功能、精子獲能、頂體反應(yīng)、精卵融合等;高濃度活性氧則影響精子細(xì)胞的質(zhì)量和功能,因?yàn)榫蛹?xì)胞質(zhì)膜含有大量不飽和脂肪酸,胞漿含有少量的祛除活性氧的相關(guān)酶蛋白,由此活性氧容易造成精子質(zhì)膜的流動(dòng)性和DNA完整性受到損害,精子運(yùn)動(dòng)能力降低,不能參與授精活動(dòng),Z終導(dǎo)致特發(fā)性不育癥(idiopathicinfertility)。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester;CM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2′,7′-dichlorodihydrofluorescindiacetate;DCFH-DA)的升級(jí)產(chǎn)品,一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、過(guò)氧化基、過(guò)氧亞硝基陰離子等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:46
安裝說(shuō)明
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MAIIA Diagnostics EPO純化試劑盒 說(shuō)明書(shū)
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2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2016-03-15 00:00
選購(gòu)指南
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細(xì)胞DNA損傷彗星完全熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
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2015-05-12 00:00
選購(gòu)指南
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