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兔子線粒體膜通道孔(MPTP)elisa試劑盒試劑盒使用說明書
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本文由 上海士鋒生物科技有限公司 整理匯編
2014-02-24 00:00 369閱讀次數(shù)
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兔子線粒體膜通道孔(MPTP)elisa試劑盒試劑盒使用說明書
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兔子線粒體膜通道孔(MPTP)elisa試劑盒試劑盒使用說明書
- 兔子線粒體膜通道孔(MPTP)elisa試劑盒試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2014-02-24 00:00
選購指南
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒
- 主要用途純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑是一種旨在通過鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料,即刻發(fā)生熒光去除或淬滅,來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性(瞬時(shí)或長期開放狀態(tài))的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開放,顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM,又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作為熒光探針:**,適宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,幾乎不具有膜結(jié)合性;第三,不是線粒體酶的底物;第四,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后,被內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素,被線粒體俘獲。同時(shí)線粒體外的鈣黃綠素通過離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開放,鈣黃綠素釋放出線粒體外,由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓砻髂ねǖ揽椎拈_放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備黑色96孔板:用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管:用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片:用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于線粒體熒光定量分析實(shí)驗(yàn)步驟直接法準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管加入xx微升染色液(ReagentA),混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作:(A)使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):1)移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片2)激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(定量檢測):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)間接法實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作:使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片(每隔5分鐘檢測一次,持續(xù)30分鐘)2)激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(定量檢測):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀(每隔5分鐘檢測一次,持續(xù)30分鐘):激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑是一種旨在通過鈣黃綠素載入后離心處理或鈷淬滅技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,而存在于或由線粒體釋放到線粒體外的熒光染料,即刻發(fā)生熒光去除或淬滅,來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性(瞬時(shí)或長期開放狀態(tài))的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。膜通道孔的開放,顯著改變線粒體的通透性。鈣離子過度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。鈣黃綠素-AM,又稱雙甲亞胺二乙酸鈉熒光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作為熒光探針:**,適宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,幾乎不具有膜結(jié)合性;第三,不是線粒體酶的底物;第四,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。鈣黃綠素-AM進(jìn)入線粒體后,被內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生具有極性的熒光性強(qiáng)的鈣黃綠素,被線粒體俘獲。同時(shí)線粒體外的鈣黃綠素通過離心去除或受到其淬滅劑鈷離子的淬滅。一旦線粒體膜通道孔瞬時(shí)開放,鈣黃綠素釋放出線粒體外,由于離心處理或被鈷離子淬滅。線粒體內(nèi)鈣黃綠素?zé)晒獾淖兓?,表明膜通道孔的開放狀態(tài)。產(chǎn)品內(nèi)容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備黑色96孔板:用于線粒體熒光分析的容器1.5毫升離心管:用于線粒體染色的容器載波片/蓋玻片:用于線粒體樣品存放后熒光分析微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀線粒體培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于線粒體熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于線粒體熒光定量分析實(shí)驗(yàn)步驟直接法準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管加入xx微升染色液(ReagentA),混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃預(yù)熱的保存液(ReagentC),混勻顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作:(A)使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):1)移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片2)激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(定量檢測):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)間接法實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放進(jìn)37℃恒溫水槽里預(yù)熱。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升離心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混勻后,標(biāo)記為染色工作液,置入暗室里。然后進(jìn)行下列操作。準(zhǔn)備好待測的純化線粒體樣品移取100微升線粒體樣品(總量為0.2毫克)到1.5毫升離心管放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照選擇下列方式之一進(jìn)行操作:使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片(每隔5分鐘檢測一次,持續(xù)30分鐘)2)激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(定量檢測):1)移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀(每隔5分鐘檢測一次,持續(xù)30分鐘):激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強(qiáng)注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作操作時(shí),須戴手套染色前,所有試劑溶液,除染色液(ReagentA)外,需37℃預(yù)熱建議染色完成后,即刻進(jìn)行熒光檢測分析孵育時(shí),必須避免光照本產(chǎn)品友好使用于雙重染色或重疊染色如果不具備505nm散發(fā)波長的濾波器,可以使用505nm至530nm中的任一波長如果黑色96孔板的背景讀數(shù)過高,可以選擇530nm散發(fā)波長如果膜通道孔為瞬時(shí)開放(transient),則熒光緩慢且自發(fā)降低本公司提供膜通道孔YZ劑:D0.2毫摩爾環(huán)胞素A(cyclosporineA)-12226,維護(hù)熒光完整本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 純化線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2016-03-10 00:00
產(chǎn)品樣冊
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冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 冰凍切片組織線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2016-03-15 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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BEIZHUO 純化線粒體膜通道孔(MPTP)比色法檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- BEIZHUO純化線粒體膜通道孔(MPTP)比色法檢測試劑是一種旨在通過比色法檢測線粒體的體積(膨脹性)變化,來實(shí)時(shí)分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種純化線粒體膜通道孔活性的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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活體細(xì)胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測
- 主要用途活體細(xì)胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測試劑是一種旨在通過四甲基羅丹明甲酯染料,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,一旦釋放到細(xì)胞漿,即刻發(fā)生熒光淬滅,來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞線粒體(動(dòng)物、人體、昆蟲等)膜通道孔活性(開放狀態(tài))的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景線粒體膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構(gòu)成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細(xì)胞凋亡或壞死時(shí),線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。線粒體膜電位的去極化(depolarization),導(dǎo)致膜通道孔的開放,顯著改變線粒體的通透性,使之線粒體膨脹(swel領(lǐng)),內(nèi)容物釋放。其中鈣離子過度進(jìn)入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導(dǎo)致膜通道孔的持續(xù)開放,而造成細(xì)胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。四甲基羅丹明甲酯(tetramethylrhodaminemethylester;TMRM),為羅丹明衍生物陽離子染料,作為電勢測定(potentiometric)熒光探針:**,具有親脂性的;第二,與線粒體內(nèi)膜負(fù)電極結(jié)合而聚集;第三,容易進(jìn)入細(xì)胞及其線粒體。四甲基羅丹明甲酯進(jìn)入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生四甲基羅丹明。四甲基羅丹明進(jìn)入線粒體后,被線粒體俘獲,呈現(xiàn)強(qiáng)烈熒光。一旦線粒體膜通道孔開放,四甲基羅丹明釋放出來而在胞漿重新分布,其熒光性顯著降低。線粒體內(nèi)熒光的變化,表明膜通道孔的開放狀態(tài)。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒使用說明書
- 我司ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量保證,價(jià)格優(yōu)惠,試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定兔子血清,血漿及相關(guān)液體樣本中兔糖胺聚糖(GAG)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔子糖胺聚糖(GAG)水平。用純化的兔子糖胺聚糖(GAG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糖胺聚糖(GAG),再與HRP標(biāo)記的糖胺聚糖(GAG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的糖胺聚糖(GAG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔子糖胺聚糖(GAG)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:2700μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800μg/L,1200μg/L,600μg/L,300μg/L,150μg/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:100μg/L-2000μg/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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2024-10-08 05:27
操作手冊
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兔子弓形蟲(Tox)ELISA試劑盒說明書
- 兔子弓形蟲(Tox)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于檢測兔子血清,血漿中兔弓形蟲(Tox)水平。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中兔子弓形蟲(Tox)。用純化的兔子弓形蟲(Tox)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中弓形蟲(Tox)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的弓形蟲(Tox)抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中兔子弓形蟲(Tox)的存在與否。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存陰性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存陽性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。結(jié)果判定:試驗(yàn)有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計(jì)算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為弓形蟲(Tox)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為弓形蟲(Tox)陽性注意事項(xiàng)1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時(shí),參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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兔子高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)ELISA試劑盒使用說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。ELISA試劑盒檢測范圍:96T2ng/L-50ng/L使用目的:本試劑盒用于測定兔子血清、血漿及相關(guān)液體樣本中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔子高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平。用純化的兔子高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),再與HRP標(biāo)記的高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔子高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(96ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。ELISA試劑盒操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。48ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液32ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液16ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.ELISA試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 檢測范圍:96T0-20ng/L兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的:本試劑盒用于測定兔子血清、血漿及相關(guān)液體樣本中堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)水平。用純化的兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF),再與HRP標(biāo)記的堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)濃度。兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書
- 兔子γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2016-09-12 00:00
產(chǎn)品樣冊
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兔子白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒說明書
- 兔子白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定兔子血清,血漿,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中兔白細(xì)胞介素4(IL-4)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔子白細(xì)胞介素4(IL-4)水平。用純化的兔子白細(xì)胞介素4抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素4,再與HRP標(biāo)記的IL-4抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的IL-4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔子白細(xì)胞介素4(IL-4)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:135ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L,7.5ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:5ng/L-100ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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兔子白介素1(IL-1)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書
- 兔子白介素1(IL-1)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2024-09-29 07:07
標(biāo)準(zhǔn)
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2024-09-29 05:15
安裝說明
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小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒elisa試劑盒使用說明書
- 上海一基實(shí)業(yè)有限公司主要生產(chǎn)經(jīng)營標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品,實(shí)驗(yàn)室耗材等。同時(shí)代理美國、日本、英國,德國等國家的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)樣品。本著標(biāo)準(zhǔn)**、質(zhì)量**,服務(wù)**,信譽(yù)**的宗旨,為客戶提供售前.售中.售后的優(yōu)質(zhì)服務(wù)。我公司全體工作人員真誠的歡迎國內(nèi)外客戶的大力支持與合作。業(yè)務(wù)范圍:a,銷售中檢所、自制標(biāo)準(zhǔn)品/對照品及進(jìn)口試劑b,承接克級至公斤級高純度單體的定制業(yè)務(wù)c,承接中藥單體/標(biāo)準(zhǔn)品新品研發(fā)業(yè)務(wù)上海一基實(shí)業(yè)有限公司是國內(nèi)生物試劑權(quán)威的供應(yīng)商之一,專業(yè)經(jīng)銷生物科學(xué)領(lǐng)域的知名品牌。自公司成立以來,本著始終擁有的創(chuàng)業(yè)激情,公司的銷售額保持高速增長,企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大,生產(chǎn)加工和銷售的產(chǎn)品包括各種化學(xué)試劑、生化試劑、培養(yǎng)基、實(shí)驗(yàn)室儀器及耗材等5萬余種類。產(chǎn)品銷往全國各地,客戶遍布國內(nèi)廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位。以真誠、主動(dòng)、周到、規(guī)范、熱情的服務(wù)很快得到廣大客戶的一致好評。我們的目標(biāo)是建成集生產(chǎn)加工和銷售于一體的yi流的化學(xué)品生產(chǎn)銷售企業(yè)。我們將充分發(fā)揮我們的技術(shù)、設(shè)備、人才的優(yōu)勢。公司秉承“適應(yīng)多樣化的需求,提供專業(yè)化的服務(wù)”的經(jīng)營理念,為客戶提供全方位的服務(wù)。歡迎社會(huì)各界朋友前來洽談業(yè)務(wù),共創(chuàng)輝煌!企業(yè)目標(biāo)----建成集生產(chǎn)加工和銷售于一體的國內(nèi)外知名的yi流的大型生產(chǎn)銷售企業(yè)!企業(yè)價(jià)值觀----超越自我,追求zhuo越。員工行為準(zhǔn)則----真誠、主動(dòng)、周到、規(guī)范、熱情。[詳細(xì)]
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2018-09-25 10:08
產(chǎn)品樣冊
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兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒
- 兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 10:33
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