1 樣品準備/提取 (1)稱取5 克樣品于塑料離心管中，加入20 mL Mcllvaine緩沖液； (2)渦旋混合2min，然后超聲 10min，4000 rpm下離心1 min，收集上清液； (3)將下層殘留物分別再用20mL、10mL Mcllvaine緩沖液再提取兩次，重復上述操作，將三次提取的上清液并入離心管中，4000rpm下，離心10min； (4)*將上清液用快速濾紙過濾，留下濾液，待凈化。 注：該步驟僅供參考，使用者可根據(jù)實驗室現(xiàn)有過濾設(shè)備進行調(diào)整。 2 SPE柱凈化——ProElut PLS 60mg/3mL（Cat.#68003） (1)活 化：依次加入3mL甲醇，3mL水，流出液棄去。 (2)上 樣：將待凈化的濾液加入柱中，流出液棄去。 (3)淋 洗：依次用3mL水，3mL5%的甲醇水溶液淋洗，流出液棄去，然后將PLS柱抽干。 (4)洗 脫：3mL甲醇洗脫，流出液收集。 (5)重新溶解：*將洗脫液在40℃減壓濃縮至近干，然后用流動相重新定容至1mL。

色譜柱： Spursil C18 150×4.6mm ID，5μm(Cat.#82001)?

流 速： 1.0 mL/min 檢測器： UV 365 nm 柱 溫： 30 ℃ 進樣量： 20 μL 流動相A： 0.01mol/L草酸水溶液 流動相B： 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 時間0min-10.0min 流動相B從30%到50%；10.0min~10.5min 流動相B從50%到30%；10.5min~20min流動相B為30%

適用于禽、畜、水產(chǎn)品組織中四環(huán)素類藥物的檢測。

1. 土霉素；2. 四環(huán)素；3. 金霉素