凈化：ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#68005)

1、提取 5 g 樣品與20 mL 90% 乙腈水溶液混合，10000 rpm 下均質(zhì)2 min，4000 rpm 下離心5 min，收集上清液，向沉淀加入10 mL 90% 乙腈水溶液重復(fù)提取一次，合并提取液。35 oC 下減壓蒸餾除去提取液中的乙腈，然后向剩余的水相中加入20 mL 磷酸鹽緩沖液*，并用0.1 mol/L NaOH 溶液調(diào)節(jié)pH 8.5， 混勻，待凈化。

注：0.05 mol/L 磷酸氫二鉀溶液，pH 8.5

2、凈化

a 活化： 將6 mL 甲醇、6 mL 水依次加入ProElut PLS 500 mg/6 mL (Cat.#68005)，流出液棄去；

b 上樣： 將待凈化的樣品液加入柱中*，流出液棄去；

c 淋洗： 依次用3 mL 磷酸鹽緩沖液*、3 mL 水淋洗，淋洗液棄去，并將PLS 柱抽干；

d 洗脫： 用6 mL 乙腈洗脫，收集洗脫液；

e 重新溶解：35 oC 下將洗脫液用氮氣吹干，然后用磷酸鹽緩沖溶液* 定容至1 mL，微孔濾膜過濾后，LC-MS/MS 分析

注： 由于樣品量較大，需分次加樣或在小柱上連接60 mL 儲液管 (Cat.#4811)，適配器 (Cat.#4803) c 中使用的磷酸緩沖溶液為0.05 mol/L 磷酸氫二鉀溶液，pH 8.5， e 中使用的磷酸緩沖鹽為0.05 mol/L 磷酸氫二鉀溶液，pH 7.0

流動相：緩沖溶液+ 乙腈，梯度 流速：1.0 mL/min 進(jìn)樣量：20 μL 柱溫：30 oC 檢測器：串聯(lián)質(zhì)譜，ESI+，MRM 模式監(jiān)測

適用于禽類、畜類組織和內(nèi)臟中青霉素類藥檢測

1. 羥氨芐青霉素； 2. 氨芐青霉素； 3. 甲氧苯青霉素； 4. 芐青霉素； 5. 苯氧甲基青霉素； 6. 苯唑青霉素； 7. 苯氧乙基青霉素； 8. 鄰氯青霉素； 9. 乙氧萘青霉素