一、樣品提取 

準(zhǔn)確移取樣品 1.0 mL 血清樣品，備用。 

二、SPE 柱凈化（Copure? HLB，60 mg/3 mL） 

活化：HLB 固相萃取柱使用前用 1 mL 甲醇、1 mL 水活化。 

上樣和洗脫：在 HLB 固相萃取柱上加入 1 mL 血清樣品，棄去 流出液；用 1 mL 5%甲醇水溶液、淋洗，棄去淋洗液；抽干小柱； 用 2 mL 甲醇溶液洗脫，收集洗脫液（整個(gè)上樣、洗脫過(guò)程保 持流速 1mL/min）。 

重新溶解：50℃緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干，用 1 mL 甲醇 復(fù)溶。經(jīng) 0.22 μm 濾膜重新過(guò)濾，供高效液相色譜測(cè)定。 

三、儀器條件 設(shè) 備：Waters Alliance 2695 色譜柱 ：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測(cè)器 ：Waters 2475 熒光檢測(cè)器 檢測(cè)波長(zhǎng)：激發(fā)波長(zhǎng)：206 nm 發(fā)射波長(zhǎng)：226 nm 流動(dòng)相：A：乙腈 B：0.1% 甲酸水 洗脫方式：梯度洗脫，見表 1 

表 1 流動(dòng)相梯度洗脫條件