一、樣品提取 

稱取 2±0.01 g 經(jīng)搗碎的豬肉樣品，于 50 mL 離心管中， 加 8 mL 乙酸鈉緩沖液 (0.2 mol/L，pH=5.2)，充分混勻， 再加 50 μL β- 葡萄糖醛苷酶 / 芳基硫酸酯酶，混勻后， 37℃水浴水解 12 h。振蕩提取 15 min，4000 r/min 離心 10 min，取上清液 4 mL 于 50 mL 離心管中，并加入 0.1  mol/L 高氯酸溶液 5 mL，混合均勻，用高氯酸調(diào)節(jié) pH 到 1±0.3。4000 r/min 離心 10 min 后將全部上清液轉(zhuǎn)移到 50 mL 離心管中，用 10 mol/L 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH=11。 加入 10 mL 飽和氯化鈉和 10 mL 異丙醇 - 乙酸乙酯 (6:4, v/v) 混合溶液，充分提取 5 min，在 4000 r/ min 離心 10  min。轉(zhuǎn)移全部有機(jī)相，在 40℃水浴下氮吹干。加入 5 mL 乙酸鈉緩沖液 (0.2 mol/L，pH=5.2)，超聲混勻，使殘?jiān)?nbsp;分溶解后備用。 

二、SPE 柱凈化（Copure? MCX，60 mg/3 mL） 

活化：MCX 柱依次用 3 mL 甲醇和 3 mL 水活化。 

上樣和洗脫：取上述殘?jiān)芤荷现?，控制流?0.5 mL/min。 后依次用 2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2 mL甲醇淋洗柱子并抽干， Z后用 2 mL 5% 氨化甲醇溶液洗脫柱子上的待測(cè)成分。 

重新溶解：收集洗脫液，于 40℃氮?dú)獯蹈?，?zhǔn)確加入 1.0 mL  5% 甲酸水溶液 ( 含 0.1% 甲酸 ) 溶液溶解殘余物，0.22 μm 濾 膜過濾，供高效液相色譜測(cè)定。 

三、儀器條件 

設(shè)備：Waters Alliance 2695 色譜柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測(cè)器：紫外檢測(cè)波長(zhǎng)：249 nm 熒光檢測(cè)波長(zhǎng)：激發(fā)波長(zhǎng)：226 nm   發(fā)射波長(zhǎng)：306 nm 流動(dòng)相：A：甲醇   B：0.1% 甲酸水溶液  洗脫方式：梯度洗脫，見表 1 

表 1 流動(dòng)相梯度洗脫程序

柱溫：30℃ 流速：1.0 mL/min 進(jìn)樣量：20 μL

 四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

表 2 添加水平為 1.0 mg/kg 豬肉基質(zhì)中 3 種 β- 受體激動(dòng)劑 的添加回收結(jié)果