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【概述】
人參皂苷(Ginsenoside)是一類(lèi)固醇類(lèi)化合物,又稱(chēng)三萜皂苷。主要存在于人參屬藥材中。人參皂苷被視為是人參中的活性成分,具有增加白細(xì)胞數(shù)量、提高人體免疫力、促進(jìn)物質(zhì)代謝、抗疲勞、 抗衰老等作用,因而成為研究的目標(biāo)。本方法可用于檢測(cè)人參、西洋參、花旗參等參類(lèi)及其制品中的人參皂苷,方法簡(jiǎn)單,易于操作。
【實(shí)驗(yàn)/設(shè)備條件】
儀器:液相色譜儀,ThermoFisher U3000
色譜柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)
流動(dòng)相:A:水 B:乙腈
洗脫方式:梯度洗脫,見(jiàn)表1
流速:1.0 mL/min
柱溫:35℃
進(jìn)樣量:20 μL
檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器
檢測(cè)波長(zhǎng):203 nm
【樣品提取】
稱(chēng)取1 g人參樣品,加水50 mL,超聲20 min,取出,離心后取上清液于另一干凈試管,重復(fù)提取一遍,合并提取液,搖勻,取10 mL,待凈化。
備注:加標(biāo)樣品為經(jīng)預(yù)處理不含本底的空白樣品。
【實(shí)驗(yàn)/操作方法】
活化:向大孔樹(shù)脂凈化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔樹(shù)脂凈化柱。
上樣和洗脫:將待凈化液的樣品加入已經(jīng)活化好的大孔樹(shù)脂凈化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔樹(shù)脂凈化柱,棄去淋洗液。用25 mL 70%甲醇水溶液洗脫大孔樹(shù)脂凈化柱,
,收集洗脫液,水浴蒸干,殘?jiān)约状既芤憾ㄈ?,過(guò)PTFE濾膜,上機(jī)。
表1 梯度洗脫程序
時(shí)間/min | A/% | B/% |
0.0 | 82 | 18 |
40.0 | 79 | 21 |
42.0 | 74 | 26 |
46.0 | 68 | 32 |
55.0 | 60 | 40 |
65.0 | 60 | 40 |
75.0 | 0 | 100 |
80.0 | 82 | 18 |
90.0 | 82 | 18 |
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果/結(jié)論】
一、
(1)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表2 三種人參皂苷的加標(biāo)回收結(jié)果
目標(biāo)物 | 加標(biāo)濃度 (mg/kg) | 回收率(%) | 平均回收率(%) | RSD(%,n=3) | ||
RG1 | 500 | 89.34 | 87.03 | 85.74 | 87.37 | 2.09 |
RE | 500 | 98.38 | 106.0 | 103.4 | 102.6 | 3.79 |
RB1 | 500 | 95.17 | 90.86 | 92.19 | 92.74 | 2.38 |
(2)三種人參皂苷色譜圖

圖1 三種人參皂苷的色譜圖
【儀器/耗材清單】
貨號(hào) | 描述 | 包裝 |
COD101124000 | Copure?D101大孔樹(shù)脂凈化柱,4g/12mL | 50支/盒 |
BN24 | biocomma? 智能水浴氮吹儀 | 1臺(tái)/箱 |
SF130-22-PTFE | PTFE針式過(guò)濾器,直徑13 mm,孔徑0.22 μm,有機(jī)系 | 100個(gè)/盒 |
SC2-1 | 2 mL藍(lán)色聚丙烯蓋,白色PTFE/紅色硅膠墊,9-425 | 100個(gè)/盒 |
V2-AL | 2 mL螺紋棕色樣品瓶,帶書(shū)寫(xiě)處11.6*32 mm,9-425 | 100個(gè)/盒 |
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