一、樣品提取 

準(zhǔn)確稱取均質(zhì)后的豬肉 3.0 g 于 50 mL 離心管中，加入 0.1  mol/L 的 EDTA-Mcllvaine 溶液 15 mL，漩渦搖勻 1 min，冰水浴 超聲 10 min，控制樣品溫度 <15℃；5000 r/min 離心 8 min。取 上清液，重復(fù)提取一次，合并清液、快速濾紙過濾，備用。 

二、SPE 柱凈化（Copure? HLB，60 mg/3 mL） 

活化：HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 

上樣和洗脫：在 HLB 固相萃取柱上加入 10 mL 備用樣液，棄 去流出液，用 3 mL 5%甲醇水溶液淋洗，棄去淋洗液，抽干小柱； 用 8 mL甲醇 -乙酸乙酯溶液（1:9, v/v）洗脫，收集洗脫液（整 個(gè)上樣、洗脫過程保持流速 2 mL/min）。 

重新溶解：洗脫液 40℃氮吹吹干，1 mL 甲醇定容，過 0.45  μm 濾膜，上機(jī)測試。 

三、儀器條件

設(shè) 備：Waters Alliance 2695 色譜柱 ：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器 檢測波長：270 nm 流動(dòng)相 ：A：乙腈   B：0.1% 甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫，見表 1 

表 1 流動(dòng)相梯度洗脫條件