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組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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2014-12-23 00:00 331閱讀次數(shù)
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組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2014-12-23 00:00
選購指南
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組織乙酰輔酶A羧化酶活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后,進而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測定產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測定其氧化后峰值的變化,以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或完全純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。技術(shù)背景乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又稱為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依賴性含生物素酶,參與脂肪酸生物合成。哺乳動物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225-250Kd,含有許多磷酸化位點,以及1個生物素輔基位點、2個催化位點和1個異構(gòu)(allosteric)位點。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基(prostheticgroup)的羧基化反應(yīng),然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上,產(chǎn)生丙二酰輔酶A(malonylCoA),成為長鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)調(diào)節(jié)該酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ該酶的活性?;诘孜镆阴]o酶A(acetylCoA)和碳酸氫鹽,在ATP的存在下,受到乙酰輔酶A羧化酶的催化,獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP,進而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的變化(340nm),來定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)20毫升酶促液(ReagentD)2毫升反應(yīng)液(ReagentE)2毫升底物液(ReagentF)2毫升陰性液(ReagentG)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器DOUNCE勻漿器:用于裂解組織(微型)臺式離心機:用于樣品預(yù)處理1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析操作的容器分光光度儀或酶標儀:用于樣品光度分析[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織乙酰輔酶A羧化酶
- 主要用途組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后,進而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測定產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測定其氧化后峰值的變化,以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或完全純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。技術(shù)背景乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又稱為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依賴性含生物素酶,參與脂肪酸生物合成。哺乳動物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225-250Kd,含有許多磷酸化位點,以及1個生物素輔基位點、2個催化位點和1個異構(gòu)(allosteric)位點。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基(prostheticgroup)的羧基化反應(yīng),然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上,產(chǎn)生丙二酰輔酶A(malonylCoA),成為長鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)調(diào)節(jié)該酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ該酶的活性?;诘孜镆阴]o酶A(acetylCoA)和碳酸氫鹽,在ATP的存在下,受到乙酰輔酶A羧化酶的催化,獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP,進而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的變化(340nm),來定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-28 00:00
標準
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-28 00:00
期刊論文
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2014-12-30 00:00
安裝說明
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后吸光峰值的,即采用光度法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體、昆蟲等)谷氨酰胺酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶(glutaminase;EC3.5.1.2)是一種氨基酸水解酶(amidohydrolase),將谷氨酰胺脫氨基(deaminating)轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性:其功能在肝細胞中產(chǎn)生的氨,用于合成尿素;在腎小管上皮細胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌,調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡;同時在膠質(zhì)細胞(glialcell)和腸細胞中也有表達。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛,例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等。基于底物谷氨酰胺在谷氨酰胺酶酶的作用下,轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣,進而在谷氨酸脫氫酶的催化下,伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD+)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm波長),來定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-15 00:00
其它
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乙酰輔酶 A羧化酶說明
- 乙酰輔酶A羧化酶說明實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)水平。用純化的魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乙酰輔酶A羧化酶(ACC),再與HRP標記的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)活性濃度。乙酰輔酶A羧化酶說明人普通急性淋巴細胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒2-氨基-4-吡啶羧酸甲酯,純度:98%人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)ELISA試劑盒大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒人淋巴細胞因子ELISA試劑盒人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒來氟米特,純度:AR人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒乙酰輔酶A羧化酶說明魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定魚血清,血漿及相關(guān)液體樣本中乙酰輔酶A羧化酶(ACC)的活性。乙酰輔酶A羧化酶說明[詳細]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測試劑盒
- 主要用途組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過檢測反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用光度法來測定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類NAD(P)依賴性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀。基于來自于乙醇代謝產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過測定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長),來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測定與ATP合成對應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動物、人體、酵母)以及細胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測??捎糜谛募?、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V,通常稱為ATP合成酶(ATPsynthase)、F型ATP酶(FtypeATPase)和F1F0ATP酶(F1F0ATPase),是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD,含有十六個亞單位,其中兩個:ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個結(jié)構(gòu)域:F0為質(zhì)子通道,由幾個膜蛋白構(gòu)成,包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP(oligomycinsensitiveconferringprotein)等;和F1催化活性結(jié)構(gòu)域,由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時,呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì),激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域,促使ATP合成。該酶異常會導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。基于ATP,在寡霉素參與下,受到F1F0ATP酶的水解,進而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm),來定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升專性液(ReagentE)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于光度分析的容器分光光度儀:用于光度分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentB)注意避光。然后進行下列操作。測定準備準備好待測樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為340nm,間隔30秒,讀數(shù)11次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentA)室溫下均衡溫度背景對照測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為背景空對照:340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品總活性讀數(shù):340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測定實驗開始前,移取100微升待測樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)到1.5毫升離心管,加入20微升專性液(ReagentE),混勻后,放進30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測樣品上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品非特異活性讀數(shù):340波長讀數(shù)0分鐘-340波長讀數(shù)1分鐘或5分鐘計算樣品活性1)樣品活性(總活性和非特異活性)【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾NADH/分鐘2)樣品特異活性樣品總活性-樣品非特異活性=樣品特異活性[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-21 00:00
選購指南
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豬磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒
- 豬磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-08-12 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒
- 大鼠磷酸化乙酰輔酶A羧化酶(pACCase)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:51
選購指南
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特價植物乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA 試劑盒使用說明書
- 特價植物乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA 試劑盒使用說明書[詳細]
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2015-03-25 00:00
課件
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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-19 00:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒
- 主要用途細胞谷氨酰胺酶(glutaminase)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后吸光峰值的,即采用光度法來測定細胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解懸液樣品(動物、人體、昆蟲等)谷氨酰胺酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶(glutaminase;EC3.5.1.2)是一種氨基酸水解酶(amidohydrolase),將谷氨酰胺脫氨基(deaminating)轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性:其功能在肝細胞中產(chǎn)生的氨,用于合成尿素;在腎小管上皮細胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌,調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡;同時在膠質(zhì)細胞(glialcell)和腸細胞中也有表達。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛,例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等?;诘孜锕劝滨0吩诠劝滨0访该傅淖饔孟?,轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣,進而在谷氨酸脫氫酶的催化下,伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD+)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm波長),來定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞長鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞長鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞長鏈脂酰輔酶A合成酶(LONG-CHAINACYLCOASYNTHETASE;LACS)活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測試劑是一種旨在通過肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法來測定細胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解懸液樣品(動物、人體等)長鏈脂酰輔酶A合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及Z后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O,并釋放能量等四個階段。脂酰輔酶A合成酶(acylcoAsynthetase;EC.6.2.1.3),又稱為脂肪酸硫激酶(fattyacidthiokinase)或脂酰輔酶A連接酶(acylcoAligase),是脂肪酸進入β-氧化前的活化所必需:在ATP、CoA-SH、Mg2+存在下,催化飽和或不飽和直鏈脂肪酸分子(C4)連接輔酶A合成相應(yīng)的脂酰輔酶A。其為一高能化合物,水溶性增強,提高代謝活性。當脂肪酸進入細胞后,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上先被活化,形成脂酰輔酶A衍生物,然后再進入線粒體內(nèi)氧化。脂酰輔酶A合成酶分成三種底物特異性的種類:小于4個碳(C4)的短鏈脂酰輔酶A合成酶(acetyl-CoAsynthetase),介于4至12個碳(C4-C12)的中鏈脂酰輔酶A合成酶(butyryl-CoAsynthetase),和大于12個碳(C12)的長鏈脂酰輔酶A合成酶(palmitoylCoAsynthetase)?;陂L鏈脂肪酸棕櫚酸(palmitate)和輔酶A在長鏈脂酰輔酶A合成酶的作用下,產(chǎn)生棕櫚酰輔酶A(palmitoyl-CoA)后,通過肌激酶(myokinase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase)和乳酸脫氫酶(lacticdehydrogenase)系統(tǒng),測定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的變化(340nm波長),來定量分析長鏈脂酰輔酶A合成酶的活性。長鏈脂酰輔酶A合成酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)為:Long-chainacylcoAsynthetasepalmitate+CoA+ATP→palmitoyl-CoA+AMP+PPimyokinaseAMP+ATP→2ADPpyruvatekinase2ADP+2phosphoenolpyruvate→2ATP+2pyruvatelacticdehydrogenase2pyruvate+2β-NADH→2lactate+2β-NAD+產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)120毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)5毫升反應(yīng)液(ReagentD)500微升酶促液(ReagentE)250微升底色液(ReagentF)250微升陰性液(ReagentG)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentD)、酶促液(ReagentE)和底色液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照;有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器細胞刮脫棒:用于脫離貼壁細胞(微型)臺式離心機:用于樣品制備200微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析的容器分光光度儀或酶標儀:用于光度分析實驗步驟樣品準備準備好25cm2細胞培養(yǎng)瓶或60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞(1至5X106細胞)小心加入3毫升清理液(ReagentA),覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞(注意:可以使用胰酶消化)加入3毫升清理液(ReagentA),混勻細胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細胞從這一步驟開始)放進4℃臺式離心機離心5分鐘,速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液(ReagentB),充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測定準備開啟并設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長340nm,間隔5分鐘,讀數(shù)3次(共15分鐘),并置零從-20℃冰箱里取出試劑,置于冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照緩沖液(ReagentC)室溫下均衡溫度背景對照測定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升陰性液(ReagentG)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為背景空對照(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))樣品測定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升待測樣品(20微克蛋白)(注意:樣品須清澈)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品讀數(shù)(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))五、計算樣品活性[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X0.25(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X15(反應(yīng)時間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘酶標儀測定在96孔板上做好相應(yīng)標記:背景對照和樣品分別移取195微升緩沖液(ReagentC)到96孔板里分別加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)分別加入12.5微升酶促液(ReagentE)分別加入12.5微升底色液(ReagentF)輕輕搖動96孔板在25℃溫度下孵育3分鐘分別加入5微升陰性液(ReagentG)或待測樣品(20微克蛋白)到相應(yīng)孔里(注意:樣品須清澈)輕輕搖動96孔板即刻放進酶標儀檢測:0分鐘讀數(shù)和15分鐘讀數(shù)活性計算:[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X樣品稀釋倍數(shù)X0.25(體系容量;毫升)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X0.6(光徑距離;厘米)X15(反應(yīng)時間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘注意事項本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對照操作時,須戴手套系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次建議使用比色皿測定樣品須澄清,至關(guān)重要加樣后3秒內(nèi)光度測定測定值由高到低變化;測定可持續(xù)15分鐘光度測定后,比色皿須清洗徹底樣本測定0分鐘讀數(shù)高于15分鐘讀數(shù)表明具有酶活性建議待測樣本蛋白濃度為20微克/5微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度長鏈脂酰輔酶A合成酶單位活性定義為:在25℃,pH8.1條件下,每分鐘內(nèi)能夠合成1微摩爾棕櫚酰輔酶A所需的酶量作為一個活性單位本公司提供系列脂肪酸代謝檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標準本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-26 00:00
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組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書...
- 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過檢測反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用比色法來測定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類NAD(P)依賴性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?;趤碜杂谝掖即x產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過測定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長),來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升陰性液(ReagentF)毫升專性液(ReagentG)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存緩沖液(ReagentC)、反應(yīng)液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和專性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保證6月[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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