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細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-02-04 00:00 253閱讀次數(shù)
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細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
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細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
- 細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-02-04 00:00
其它
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細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2015-08-25 00:00
課件
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細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2014-12-31 00:00
應(yīng)用文章
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細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
- 細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-19 00:00
安裝說(shuō)明
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植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
- 植物線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-14 00:00
應(yīng)用文章
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動(dòng)物硬組織線粒體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
- 主要用途動(dòng)物硬組織線粒體粗提分離試劑是一種旨在從動(dòng)物硬組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種動(dòng)物硬組織(心臟或肌肉)的線粒體的制備??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強(qiáng)化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升酶解液(ReagentF)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和酶解液(ReagentF)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,有效保證12月用戶自備15毫升錐形離心管:用于線粒體初步制備操作的容器1.5毫升離心管:用于保存線粒體的容器4℃臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī):用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細(xì)胞[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒
- 主要用途細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑是一種旨在從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出活性完整而高度純化的溶酶體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的溶酶體的制備。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度俱佳。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種普遍存在于真核細(xì)胞中的細(xì)胞器,含有酸性水解酶,例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等,分解各種細(xì)胞殘?jiān)蛷U棄物質(zhì),包括過(guò)多的或破損的其它細(xì)胞器、食物顆粒、吞噬的細(xì)菌和病毒等。其大小為0.5至1.5微米,球圓形,溶酶體內(nèi)pH為5.0左右。溶酶體功能異常會(huì)引起溶酶體貯積癥(1ysosomalstoragedisorders;LSDs),例如家族性白癡?。═ay-sachsdisease)和龐貝氏癥(Pompe’sdisease)。溶酶體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離溶酶體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得溶酶體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的溶酶體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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植物線粒體粗提分離試劑盒
- 主要用途植物線粒體粗提分離試劑是一種旨在從植物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于各種新鮮植物組織,包括葉片(leaf)、谷粒(grain)、種子(seed)、以及培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱國(guó)際同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線粒體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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動(dòng)物全血線粒體粗提分離試 劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
- 主要用途動(dòng)物全血線粒體粗提分離試劑是一種旨在通過(guò)化學(xué)溶解以純化血白細(xì)胞、物理或化學(xué)破膜及離心處理分離出完整而純化的線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物血細(xì)胞中的線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、能量代謝、蛋白組學(xué)和病理生理學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的研究是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)的Z重要的課題之一。線粒體成為生物衰老、古生物、細(xì)胞凋亡、腫瘤、HIV、老年癡呆癥、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要對(duì)象。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線粒體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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蛋白抽提試劑盒-I(實(shí)體組織和細(xì)胞蛋白抽提)
- 訂購(gòu)熱線:021-54100800蛋白抽提試劑盒-I(實(shí)體組織和細(xì)胞蛋白抽提)本試劑盒為組織或培養(yǎng)細(xì)胞總蛋白提取提供完整的解決方案。用裂解-結(jié)合緩沖液勻漿裂解實(shí)體組織,或直接用裂解-結(jié)合緩沖液重懸培養(yǎng)細(xì)胞,然后加入抽提試劑去除非蛋白分,離心、干燥后即可得到總蛋白。SP1250100次提取480元×107全方位所獲得的總蛋白可進(jìn)行幾十到上百次分析如蛋白質(zhì)電泳,免疫印跡,免疫共沉淀,制備2-D膠樣品。適用:(1)各種原代和傳代細(xì)胞組成:(1)裂解-結(jié)合緩沖液100毫升;(2)抽提試劑100毫升。每毫升裂解緩沖液和抽提試劑可提取100毫克組織或1×107細(xì)胞儲(chǔ)存:室溫2年。部分發(fā)表論文:肖明杰,春暉王,智光金華張,李,趙許學(xué)強(qiáng),王志海秦,2009。IFNγ調(diào)節(jié)Th17細(xì)胞相關(guān)的炎癥,促進(jìn)乳頭狀瘤發(fā)展。癌癥研究,69(5):2010-2017。IF:8.234曹蕭蕭,李韶華,徐華,丁轟寐,黃艷萍,楊光,李婕,謝志剛,孟吁弘,李小兵,趙強(qiáng),沉倍奮,邵王寧生,2009。鑒定的適體針對(duì)核蛋白A1基于組織切片SELEX。雜志病理學(xué),218(3):327-336。IF:7.274演蘇果,段維松,仲要李,黃晶,殷云霞,昆西張,王茜,張脂肪粒,李春燕,2010。下降GLT-1和增加SOD1和HO-1表達(dá)在星形膠質(zhì)細(xì)胞有助于SOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠的腰椎脊髓的脆弱性。FEBS快報(bào),584(8):1615-1622。IF:3.601王麗娜,張香肩,劉靈靈的,崔哩縭,楊銳,李敏,杜巍,2010。丹參酮IIA下調(diào)HMGB1,RAGE,TLR4,NF-κB表達(dá),可改善血腦屏障通透性和內(nèi)皮細(xì)胞功能,對(duì)局灶性腦缺血大鼠腦保護(hù)。腦研究,1321:143-151。IF:2.622劉靈靈,張香肩,王麗娜,楊蕊,崔哩俚,李敏,杜巍,王山,2010年。丹參酮ⅡA的保護(hù)作用TORC1和TORC1,pCREB和BDNF的表達(dá)上調(diào)在缺血性中風(fēng)急性期伴有誘導(dǎo)核易位。腦研究通報(bào),82(3-4):228-233。IF:2.497韓信,陸明,汪收榆,呂李德成,劉嘿閏2012。靶向IKK/NF-κB信號(hào)通路減少炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和大鼠脊髓損傷后細(xì)胞凋亡。神經(jīng)科學(xué)快報(bào),511(1):28-32。IF:2.055王麗娜,張香肩,劉靈靈的,楊睿,崔哩犁,李敏,2010。阿托伐他汀對(duì)性局灶性腦缺血保護(hù)大鼠大腦下調(diào)HMGB1,HMGB1受體(RAGE和TLR4),NF-κB表達(dá)。神經(jīng)科學(xué)快報(bào),471(3):152-156。IF:2.055賈輝,苗江永,張香肩,杜圓圓,劉嘿超,李舒亞,黎哩饕,2012。刺猬信號(hào)YZGLI1,PTCH1SOD1表達(dá)在急性缺血性中風(fēng)下調(diào)加重腦損傷。神經(jīng)科學(xué)快報(bào),506(1):1-6。IF:2.055崔哩籬李敏,張香肩,楊銳,王麗娜,劉靈靈,杜煒,2011??鄥⑺卦谀X缺血/再灌注的神經(jīng)保護(hù)作用有關(guān)核因子紅2相關(guān)因子2(Nrf2的)介導(dǎo)的抗氧化反應(yīng):Nrf2的作用和血紅素氧合酶1的表達(dá)。生物醫(yī)藥通報(bào),34(5):595-601。IF:1.810方方,張淳,陳山,鄧炳清,王輝,邵寧,天秀娟,方湛,孫希峰,劉建社,朱忠華,孟西岸方,2011。CD2相關(guān)蛋白,白蛋白超載誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的作用。國(guó)際細(xì)胞生物學(xué),35:827-834。IF:1.746芳芳,陳山,王輝,邵寧,田秀娟,蔣華君,劉建設(shè),朱中華,孟現(xiàn)房,張淳,2011。CD2相關(guān)蛋白的調(diào)控影響足細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡誘導(dǎo)白蛋白超載。基因,484(1-2):18-25。IF:2.266,周香梅李強(qiáng),楊吳建民,曉敏賢,趙戴明,2008白宇林。p75NTR的PrP106-126誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中NF-κB的激活參與。神經(jīng)科學(xué)的研究,62(1):9-14。IF:2.095鄭曉科李,張,王威威:吳庸庸,張邱波,馮煒生,2011年。卷柏(Beauv.)春季高脂肪的飲食和低劑量STZ誘導(dǎo)大鼠總黃酮的抗糖尿病活性和潛在的機(jī)制。傳統(tǒng)藥物學(xué)雜志,137(1):662-668。IF:2.410趙力,他俊平,郭青云,文雪雪,張雪靜,董常生,2011。生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)及其受體在成年貓睪丸中的表達(dá)。文獻(xiàn)Histochemica,113(8):771-776。IF:1.735張X.-J.,他J.-P.,文,趙力,2011X.-X.。ImmunolocalisationSmad2和Smad4的蛋白在狗睪丸發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)。Andrologia,43(4):254-260。IF:1.244李舒雅,張香肩,王勇軍,姬輝,杜圓圓,劉嘿怊,2012。DAPT反對(duì)通過(guò)下調(diào)缺口1,核因子-κB表達(dá)的大鼠腦缺血保護(hù)腦。神經(jīng)科學(xué),DOI:10.1007/s10072-012-0948-6。IF:1.220崔麗麗,張香肩,楊蕊,王麗娜,劉靈靈,李敏,杜巍,2011。氧化苦參堿在大鼠腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制。神經(jīng)學(xué)研究,33(3):319-324。IF:2.095,李李C.C.,朱夏,王三,劉焯,李W.,陳露,周旭,2012。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及其受體在牛精子中的表達(dá)及推定作用。Theriogenology,77(3):636-643。IF:2.045姬輝,張香肩,杜圓圓,劉咳晁,李舒亞,黎哩韜,2012。普羅布考和阿托伐他汀結(jié)合保護(hù)大鼠腦缺血模型:,上調(diào),F(xiàn)oxO3a的Peroxiredoxin2和Nrf2的表達(dá)。神經(jīng)科學(xué)快報(bào),509(2):110-115。IF:2.055江青歌,梁梓良,吳民杰,馮林,劉麗麗,張建軍,2011。減少參與磨牙缺失SAMP8小鼠學(xué)習(xí)和記憶的赤字在皮層和海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的表達(dá)。中華醫(yī)學(xué)雜志,124(10):1540-1544。IF:0.9829米振國(guó),孫侯為貴,葉章群,施天亮,韓村咫,過(guò)蘇樘,2008年。LNCaP和DU145細(xì)胞之間的蛋白質(zhì)組學(xué)定量檢測(cè)和SELDI技術(shù)分析比較研究。[華中科技大學(xué)-醫(yī)學(xué)科學(xué),28(2):174-178。IF:0.4050段危忪,章蕤妍,郭艷俗,一方,黃艷麗,江紅,李春燕,2009。Nrf2的活動(dòng)失去了在脊髓和老年小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞。在體外培養(yǎng)細(xì)胞與發(fā)育生物學(xué)-動(dòng)物,45(7):388-397。IF:0.9139,康樂(lè),永豐孫Chun極n李易,城郊鄉(xiāng)李,朱曉玲,陳露,徐舟,2011年。牛的SRY基因的轉(zhuǎn)錄和蛋白的檢測(cè)精子。亞洲澳大拉西亞ZG動(dòng)物科學(xué),24(10):1358年至1364年。IF:0.4889實(shí)體組織和細(xì)胞蛋白抽提蛋白抽提試劑盒組織和細(xì)胞蛋白抽提組織和細(xì)胞蛋白抽提組織蛋白提取試劑盒細(xì)胞蛋白提取試劑盒[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
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動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書主要用途動(dòng)物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過(guò)機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過(guò)低速差速離心去除殘?jiān)樾己途薮蠹?xì)胞器;第三,通過(guò)高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過(guò)等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強(qiáng)化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液(12028)或PBS緩沖溶液(12033):用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液(12052):用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管:用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管:用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管:用于保存線粒體4℃臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī):用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟一、動(dòng)物軟組織線粒體分離(組織勻漿法)實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí))2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎組織5.放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管6.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7.渦旋震蕩5秒,充分混勻8.即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化組織(約80下)(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)8)9.將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管,10.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g11.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g16.(選擇步驟)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻18.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里二、動(dòng)物軟組織線粒體分離(化學(xué)處理法)實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實(shí)驗(yàn)前**使動(dòng)物空腹12至24小時(shí))2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一個(gè)液氮凍存管5.即刻放進(jìn)液氮罐過(guò)夜6.次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎組織(注意:切莫使組織凍融)7.放進(jìn)一個(gè)15毫升錐形離心管8.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9.渦旋震蕩5秒,充分混勻10.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)12.渦旋震蕩5秒,充分混勻13.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)9)14.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻15.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g16.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g21.(選擇步驟)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻23.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里三、動(dòng)物細(xì)胞線粒體分離(細(xì)胞勻漿法)實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次5.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面6.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7.手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落8.分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9.全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管10.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞13.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g14.小心抽去上清液15.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16.渦旋震蕩5秒,充分混勻細(xì)胞顆粒群17.即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞(約80下)(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)8)18.將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g20.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g25.(選擇步驟)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻27.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里四、動(dòng)物細(xì)胞線粒體分離(化學(xué)處理法)實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長(zhǎng)鋪滿整個(gè)培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面28.小心抽去清洗液3.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟2至3一次4.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個(gè)培養(yǎng)平面5.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6.手擊震動(dòng)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落7.分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8.全部移入到一個(gè)50毫升錐形離心管9.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)12.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g13.小心抽去上清液14.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15.渦旋震蕩5秒,充分混勻16.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)18.渦旋震蕩5秒,充分混勻19.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見(jiàn)注意事項(xiàng)9)20.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻21.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g22.小心移出上清液到另一個(gè)新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g27.(選擇步驟)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻29.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為10次(1克動(dòng)物組織或5X107細(xì)胞)或50次(200毫克動(dòng)物組織或1X107細(xì)胞)操作2.實(shí)際操作的動(dòng)物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動(dòng)物組織:試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3.所有操作均須在4℃或以下?tīng)顟B(tài)進(jìn)行4.操作時(shí),須戴手套5.操作時(shí),須無(wú)菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建議使用足夠的樣品量7.建議嚴(yán)格控制操作時(shí)間8.通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會(huì)存在差異。用戶可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)9.通常孵育5分鐘達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會(huì)存在差異。用戶可以通過(guò)顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數(shù)10.對(duì)于難以裂解的細(xì)胞,例如HeLa細(xì)胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11.通常5X107細(xì)胞或1克動(dòng)物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12.如果需要計(jì)量線粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線粒體將分解13.本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過(guò)調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14.如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動(dòng)物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒-10006.315.線粒體正?;钚詼y(cè)定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16.線粒體內(nèi)外膜完整測(cè)定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17.本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18.本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長(zhǎng)期穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正?;钚?.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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紅細(xì)胞可溶性膜蛋白(純提)制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
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2015-01-29 00:00
安裝說(shuō)明
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細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
- 主要用途細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑是一種旨在使用化學(xué)方法快速充分裂解細(xì)胞,并在蛋白酶YZ混合劑的幫助下,通過(guò)超速離心,收集所有細(xì)胞內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞(動(dòng)物、人體)等樣品??芍苯佑糜诤怂岬鞍捉Y(jié)合凝膠遷移電泳分析(EMSA)、DNA足跡法檢測(cè)、特定蛋白后續(xù)純化、蛋白一維或二維電泳、西方雜交、免疫抗體和質(zhì)譜分析等等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作便捷,收集效果好。技術(shù)背景通過(guò)特殊裂解液和蛋白酶YZ混合劑可以防止裂解后細(xì)胞內(nèi)各種活性蛋白成分遭到活化的內(nèi)源性蛋白酶的破壞,充分保留細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的免疫和生物學(xué)活性。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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2024-09-28 00:08
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2015-04-23 00:00
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2014-12-29 00:00
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2016-03-17 00:00
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2015-05-19 00:00
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動(dòng)物細(xì)胞高純高爾基體分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
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2015-03-30 00:00
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動(dòng)物細(xì)胞高純內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分離試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)
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2015-03-30 00:00
報(bào)價(jià)單
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