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細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒
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2018-11-18 10:00 751閱讀次數(shù)
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主要用途細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出活性完整而高度純化的溶酶體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的溶酶體的制備。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度俱佳。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種普遍存在于真核細(xì)胞中的細(xì)胞器,含有酸性水解酶,例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等,分解各種細(xì)胞殘渣和廢棄物質(zhì),包括過多的或破損的其它細(xì)胞器、食物顆粒、吞噬的細(xì)菌和病毒等。其大小為0.5至1.5微米,球圓形,溶酶體內(nèi)pH為5.0左右。溶酶體功能異常會引起溶酶體貯積癥(1ysosomalstoragedisorders;LSDs),例如家族性白癡?。═ay-sachsdisease)和龐貝氏癥(Pompe’sdisease)。溶酶體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離溶酶體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細(xì)胞器;第三,通過高速差速離心獲得溶酶體;甚至,第四,可以通過等密度離心獲得純度更高的溶酶體。
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細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒
- 主要用途細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出活性完整而高度純化的溶酶體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的溶酶體的制備。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度俱佳。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種普遍存在于真核細(xì)胞中的細(xì)胞器,含有酸性水解酶,例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等,分解各種細(xì)胞殘渣和廢棄物質(zhì),包括過多的或破損的其它細(xì)胞器、食物顆粒、吞噬的細(xì)菌和病毒等。其大小為0.5至1.5微米,球圓形,溶酶體內(nèi)pH為5.0左右。溶酶體功能異常會引起溶酶體貯積癥(1ysosomalstoragedisorders;LSDs),例如家族性白癡?。═ay-sachsdisease)和龐貝氏癥(Pompe’sdisease)。溶酶體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離溶酶體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細(xì)胞器;第三,通過高速差速離心獲得溶酶體;甚至,第四,可以通過等密度離心獲得純度更高的溶酶體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞/組織高質(zhì)純化溶酶體(lysosome)分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-19 00:00
安裝說明
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細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞/組織溶酶體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-02-04 00:00
其它
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糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒
- 糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途糞便DNA高質(zhì)純化試劑是一種旨在經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)分離法以后,由糞便(人體、動物等)中分離獲得的DNA,進(jìn)行二度親和純化,Zda限度地去除復(fù)雜又難以去除的蛋白、金屬成分、雜質(zhì)等非核酸類物質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其應(yīng)用于即時PCR、RLPF分析、測序、雜交、遺傳鑒定、突變分析、性別鑒定、司法鑒定等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡單,純度出色,重復(fù)性好,堪稱國際上同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景糞便中含有許多污染成分,降解DNA和YZPCR反應(yīng)。針對標(biāo)準(zhǔn)處理無法有效地去除頑固干擾因子的情況下,運用特殊親和技術(shù),達(dá)到高度純化的效果。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)2毫升親和液(ReagentJ)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于DNA純化操作的容器微型臺式離心機(jī)(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反應(yīng)物恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟1.準(zhǔn)備好從1克糞便樣品分離的DNA產(chǎn)物(100微克DNA總量)2.移入到1.5毫升離心管3.加入適量的緩沖液(ReagentA)到總?cè)萘繛?00微升4.加入100微升親和液(ReagentB)(注意:使用前,先搖勻沉淀的親和液(ReagentB))5.用手充分混勻6.放進(jìn)56℃恒溫水槽孵育30分鐘,期間用手混勻一次7.放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升離心管9.移出適量DNA溶液進(jìn)行后續(xù)PCR反應(yīng)或保存在-20℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為20次(1克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作或50次(200毫克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作2.操作時,須戴手套3.根據(jù)用戶樣品量大小,相應(yīng)調(diào)整試劑用量4.親和液(ReagentB)使用前,須搖勻5.建議使用糞便DNA分離試劑盒(HL20011.1)作為標(biāo)準(zhǔn)分離法操作6.本公司提供系列糞便核酸純化試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純度優(yōu)異[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書
- 糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途糞便DNA高質(zhì)純化試劑是一種旨在經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)分離法以后,由糞便(人體、動物等)中分離獲得的DNA,進(jìn)行二度親和純化,Zda限度地去除復(fù)雜又難以去除的蛋白、金屬成分、雜質(zhì)等非核酸類物質(zhì)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其應(yīng)用于即時PCR、RLPF分析、測序、雜交、遺傳鑒定、突變分析、性別鑒定、司法鑒定等。產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作簡單,純度出色,重復(fù)性好,堪稱國際上同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景糞便中含有許多污染成分,降解DNA和YZPCR反應(yīng)。針對標(biāo)準(zhǔn)處理無法有效地去除頑固干擾因子的情況下,運用特殊親和技術(shù),達(dá)到高度純化的效果。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)2毫升親和液(ReagentJ)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于DNA純化操作的容器微型臺式離心機(jī)(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反應(yīng)物恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物實驗步驟1.準(zhǔn)備好從1克糞便樣品分離的DNA產(chǎn)物(100微克DNA總量)2.移入到1.5毫升離心管3.加入適量的緩沖液(ReagentA)到總?cè)萘繛?00微升4.加入100微升親和液(ReagentB)(注意:使用前,先搖勻沉淀的親和液(ReagentB))5.用手充分混勻6.放進(jìn)56℃恒溫水槽孵育30分鐘,期間用手混勻一次7.放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升離心管9.移出適量DNA溶液進(jìn)行后續(xù)PCR反應(yīng)或保存在-20℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為20次(1克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作或50次(200毫克糞便樣品的DNA產(chǎn)物)操作2.操作時,須戴手套3.根據(jù)用戶樣品量大小,相應(yīng)調(diào)整試劑用量4.親和液(ReagentB)使用前,須搖勻5.建議使用糞便DNA分離試劑盒(HL20011.1)作為標(biāo)準(zhǔn)分離法操作6.本公司提供系列糞便核酸純化試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定純度優(yōu)異[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-08-25 00:00
課件
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細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2014-12-31 00:00
應(yīng)用文章
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純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒
- 主要用途純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑是一種旨在通過透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在線粒體氧化條件下,產(chǎn)生熒光,來定量檢測線粒體內(nèi)活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號傳遞、衰老、代謝和營養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡易,活體檢測,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester;CM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2,7-dichlorodihydrofluorescindiacetate;DCFH-DA)的升級產(chǎn)品,一種完全自由通過細(xì)胞膜,并在細(xì)胞內(nèi)長期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過氧化氫、羥自由基或氫氧基、過氧化基、次氯酸等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測定線粒體活性氧族的濃度。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升補充液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,染色液(ReagentC),嚴(yán)格避免光照;有效保證12月用戶自備培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察熒光線粒體熒光酶標(biāo)儀:用于測定線粒體熒光強(qiáng)度實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑放進(jìn)冰槽里融化,避免光照;同時從-80℃冰箱里取出待測的線粒體,[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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活體細(xì)胞溶酶體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒
- 主要用途活體細(xì)胞溶酶體形態(tài)/活性熒光染色試劑是一種旨在通過長波長的熒光染料特異性地聚集在溶酶體,并呈現(xiàn)紅色,用于分析和觀察溶酶體形態(tài)以及雙重染色或重疊染色定位的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種溶酶體(動物、人體、昆蟲等)的形態(tài)觀察、活性探測和定位標(biāo)記。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定,滯留持久。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種普遍存在于真核細(xì)胞中的細(xì)胞器,含有酸性水解酶,例如酯酶、淀粉酶、蛋白酶、核酶等,分解各種細(xì)胞殘渣和廢棄物質(zhì),包括過多的或破損的其它細(xì)胞器、食物顆粒、吞噬的細(xì)菌和病毒等。其大小為0.5至1.5微米,球圓形,溶酶體內(nèi)pH為5.0左右。溶酶體功能異常會引起溶酶體貯積癥(1ysosomalstoragedisorders;LSDs),例如家族性白癡?。═ay-sachsdisease)和龐貝氏癥(Pompe’sdisease)。溶酶體熒光探針LysoTrackerRED,是一種向酸性(acidotropic)探針,含有熒光基團(tuán)在弱堿上,高度選擇性地染色酸性細(xì)胞器溶酶體。探針自由通過細(xì)胞膜,選擇性地聚集在溶酶體內(nèi)。它可以對活細(xì)胞進(jìn)行直接染色,在590nm波長可以清晰看到被染成紅色的溶酶體。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測定試劑盒
- 呼吸鏈依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧高質(zhì)熒光測定試劑盒[詳細(xì)]
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2015-04-29 00:00
產(chǎn)品樣冊
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蛋白質(zhì)的分離純化
- 蛋白質(zhì)的分離純化[詳細(xì)]
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2013-03-31 00:00
專利
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活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)-完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒
- 活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑是一種旨在通過吖啶橙吸收和細(xì)胞內(nèi)再分布檢測技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,即存在于或由溶酶體釋放到細(xì)胞漿的熒光染料的不同熒光強(qiáng)度變化,來分析和觀察溶酶體膜通透性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細(xì)胞溶酶體(動物、人體、昆蟲等)膜通透性的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種動態(tài)性的、多態(tài)性的、含有水解酶的細(xì)胞器,具有接受和降解來自于分泌性、內(nèi)吞性(endocytic)、自噬性(autophagic)、吞噬性(phagocytic)膜運轉(zhuǎn)通路中的大分子。其功能是膜依賴性,具有和防御作用。溶酶體膜是溶酶體內(nèi)基質(zhì)和胞漿之間的生理屏障,為整合性糖蛋白,防止細(xì)胞自我降解。一旦溶酶體膜去穩(wěn)定(destabilization),例如堿性化或內(nèi)容物移位(translocation),將導(dǎo)致質(zhì)子和水解酶外漏,而造成細(xì)胞器功能異常,進(jìn)而產(chǎn)生細(xì)胞壞死、凋亡,以及病理癥狀,例如朊病毒腦?。╬rionencephalopathies)、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰質(zhì)炎病毒感染、補體激活型肺損傷(complementactivation-producedlunginjury)、急性組織損傷等疾病。其中膜通透性增加,是溶酶體膜去穩(wěn)定性或去完整性的標(biāo)志之一,溶酶體內(nèi)容物大量釋放到胞漿中,直接影響細(xì)胞的存活。吖啶橙(acridineorange;AO)是一種親溶酶體(lysomotropic)異染性(metachromatic)的熒光染料,在完整的溶酶體內(nèi),為質(zhì)子化(protonated)寡聚體(oligomeric)形式,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm),而在胞漿內(nèi),為單體去質(zhì)子化形式,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm)。吖啶橙進(jìn)入溶酶體后重新分布,即吸收和細(xì)胞內(nèi)再分布(uptakeandredistribution),用于分析溶酶體膜通透性狀況。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升染色液(ReagentB)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備24孔細(xì)胞培養(yǎng)板:用于貼壁細(xì)胞染色的容器1.5毫升離心管:用于細(xì)胞染色的容器微型臺式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于細(xì)胞熒光分析熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:用于細(xì)胞熒光定量分析細(xì)胞流式儀:用于細(xì)胞熒光分析實驗步驟貼壁細(xì)胞染色準(zhǔn)備1個細(xì)胞培養(yǎng)24孔板的待測細(xì)胞(注意:可以使用載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm培養(yǎng)皿,和其它培養(yǎng)孔板,見注意事項8)小心抽去細(xì)胞培養(yǎng)液小心沿著孔壁加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA)到1個細(xì)胞培養(yǎng)孔,覆蓋培養(yǎng)孔表面小心抽去清理液小心沿著孔壁加入xx微升染色液(ReagentB)到1個細(xì)胞培養(yǎng)孔,覆蓋培養(yǎng)孔表面放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照小心抽去染色液(ReagentB)小心沿著孔壁加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA)到細(xì)胞培養(yǎng)孔小心抽去清理液重復(fù)實驗步驟8和9一次小心沿著孔壁加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA)到細(xì)胞培養(yǎng)孔選擇下列方式之一進(jìn)行操作:(A)使用倒置熒光顯微鏡觀察(定性檢測):激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――綠色熒光增強(qiáng),表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――紅色熒光減弱,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(定量檢測):激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――RFU升高,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――RFU降低,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)懸浮細(xì)胞或脫離細(xì)胞染色將懸浮細(xì)胞或脫離細(xì)胞(1X106細(xì)胞)移入到1.5毫升離心管放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞顆粒群放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞顆粒群加入xx微升含有染色液(ReagentB),充分混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘,避免光照放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞顆粒群放進(jìn)微型臺式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g(或2000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液重復(fù)實驗步驟12至14一次加入xx微升37℃預(yù)熱的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞顆粒群選擇下列方式之一進(jìn)行操作:進(jìn)行細(xì)胞流式儀分析:FL1(激發(fā)波長488nm,散發(fā)波長528nm),或FL3(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm)觀察10000個細(xì)胞以上――FL1:波峰右移,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)FL3:波峰左移,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)或使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):1)移取10微升上述細(xì)胞懸液到載波片上,蓋上蓋玻片激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――綠色熒光增強(qiáng),表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――紅色熒光減弱,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)或使用熒光分光光度儀檢測(定量檢測):1)移取500微升上述細(xì)胞懸液到1毫升比色杯2)加入xx微升清理液(ReagentA)3)上下傾倒混勻數(shù)次4)放進(jìn)熒光分光光度儀:激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm――RFU升高,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm――RFU降低,表明膜通透性(LMP)增強(qiáng)注意事項本產(chǎn)品為20次(0.5毫升體系/次)操作操作時,須戴手套操作時,避免污染母液建議細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行熒光檢測分析孵育時,必須避免光照本產(chǎn)品適合各種規(guī)格的培養(yǎng)細(xì)胞:載玻片,載玻片培養(yǎng)皿,35mm培養(yǎng)皿,和各種培養(yǎng)孔板,須相應(yīng)調(diào)整處理液:操作容器建議操作體系載玻片100微升載玻片培養(yǎng)皿1毫升35mm培養(yǎng)皿1毫升96孔培養(yǎng)板100微升48孔培養(yǎng)板200微升24孔培養(yǎng)板500微升12孔培養(yǎng)板1毫升6孔培養(yǎng)板2毫升25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶3毫升可以使用綠色熒光中激發(fā)波長490nm±20,散發(fā)波長528±38;紅色熒光中激發(fā)波長555±28,散發(fā)波長617±50用戶可以持續(xù)讀數(shù)5分鐘,觀察熒光讀數(shù)的增強(qiáng)或減低,以表明熒光染料的移位變化本公司提供系列溶酶體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒
- 主要用途活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑是一種旨在通過吖啶橙吸收和細(xì)胞內(nèi)再分布檢測技術(shù),選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,即存在于或由溶酶體釋放到細(xì)胞漿的熒光染料的不同熒光強(qiáng)度變化,來分析和觀察溶酶體膜通透性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細(xì)胞溶酶體(動物、人體、昆蟲等)膜通透性的檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景溶酶體(lysosome)是一種動態(tài)性的、多態(tài)性的、含有水解酶的細(xì)胞器,具有接受和降解來自于分泌性、內(nèi)吞性(endocytic)、自噬性(autophagic)、吞噬性(phagocytic)膜運轉(zhuǎn)通路中的大分子。其功能是膜依賴性,具有和防御作用。溶酶體膜是溶酶體內(nèi)基質(zhì)和胞漿之間的生理屏障,為整合性糖蛋白,防止細(xì)胞自我降解。一旦溶酶體膜去穩(wěn)定(destabilization),例如堿性化或內(nèi)容物移位(translocation),將導(dǎo)致質(zhì)子和水解酶外漏,而造成細(xì)胞器功能異常,進(jìn)而產(chǎn)生細(xì)胞壞死、凋亡,以及病理癥狀,例如朊病毒腦?。╬rionencephalopathies)、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰質(zhì)炎病毒感染、補體激活型肺損傷(complementactivation-producedlunginjury)、急性組織損傷等疾病。其中膜通透性增加,是溶酶體膜去穩(wěn)定性或去完整性的標(biāo)志之一,溶酶體內(nèi)容物大量釋放到胞漿中,直接影響細(xì)胞的存活。吖啶橙(acridineorange;AO)是一種親溶酶體(lysomotropic)異染性(metachromatic)的熒光染料,在完整的溶酶體內(nèi),為質(zhì)子化(protonated)寡聚體(oligomeric)形式,呈現(xiàn)紅色熒光(激發(fā)波長555nm,散發(fā)波長617nm),而在胞漿內(nèi),為單體去質(zhì)子化形式,呈現(xiàn)綠色熒光(激發(fā)波長490nm,散發(fā)波長528nm)。吖啶橙進(jìn)入溶酶體后重新分布,即吸收和細(xì)胞內(nèi)再分布(uptakeandredistribution),用于分析溶酶體膜通透性狀況。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織DNA的提取和純化
- 組織DNA的提取和純化[詳細(xì)]
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2015-10-15 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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糖的分離純化解決方案
- 糖的分離純化解決方案[詳細(xì)]
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2024-09-14 16:37
課件
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PCR純化試劑盒/DNA純化試劑盒
- PCR純化試劑盒/DNA純化試劑盒[詳細(xì)]
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2015-09-11 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒
- PCR 純化試劑盒/DNA 純化試劑盒[詳細(xì)]
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2014-12-11 00:00
期刊論文
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活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 活體細(xì)胞溶酶體膜通透性(LMP)/完整性吖啶橙熒光檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-04-23 00:00
產(chǎn)品樣冊
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動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書
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動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途動物細(xì)胞/組織活性線粒體分離試劑是一種旨在從動物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的活性線粒體細(xì)胞器的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。適合于動物軟組織(肝或腦組織)和培養(yǎng)細(xì)胞的活性線粒體的制備。其制備物產(chǎn)量高,活性保證,可以被用于線粒體酶活性、細(xì)胞凋亡、信號傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白水解酶和核酶,即到即用,性能穩(wěn)定,分離產(chǎn)量和純度堪稱同類產(chǎn)品**。技術(shù)背景線粒體細(xì)胞器的分離是現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)研究的Z常用的手段之一。從任何組織或細(xì)胞分離線粒體的技術(shù)方法基本上采用:**,通過機(jī)械或化學(xué)方法破裂細(xì)胞;第二,通過低速差速離心去除殘渣碎屑和巨大細(xì)胞器;第三,通過高速差速離心獲得線粒體;甚至,第四,可以通過等密度離心獲得純度更高的線粒體。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升凈化液(ReagentC)毫升強(qiáng)化液(ReagentD)毫升保存液(ReagentE)毫升活性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存凈化液(ReagentC)和活性液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備HANK平衡鹽緩沖溶液(12028)或PBS緩沖溶液(12033):用于清理細(xì)胞胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于細(xì)胞脫離完全細(xì)胞培養(yǎng)液(12052):用于中和胰蛋白酶的細(xì)胞培養(yǎng)基15毫升錐形離心管:用于線粒體初步制備物的存放50毫升錐形離心管:用于細(xì)胞或組織收集后離心或清洗1.5毫升離心管:用于保存線粒體4℃臺式離心機(jī):用于沉淀細(xì)胞4℃超速離心機(jī):用于分離細(xì)胞器成分DOUNCE勻漿器:用于裂解細(xì)胞實驗步驟一、動物軟組織線粒體分離(組織勻漿法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和4毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實驗前**使動物空腹12至24小時)2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.即刻用刀片切碎組織5.放進(jìn)一個預(yù)冷的15毫升錐形離心管6.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液7.渦旋震蕩5秒,充分混勻8.即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化組織(約80下)(注意:參見注意事項8)9.將所有組織勻漿物移入15毫升錐形離心管,10.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g11.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞12.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g13.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物14.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)15.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g16.(選擇步驟)小心抽去上清液17.加xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻18.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里二、動物軟組織線粒體分離(化學(xué)處理法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定組織重量(注意:實驗前**使動物空腹12至24小時)2.(選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的50毫升錐形離心管3.(選擇步驟)加入適量的(1克組織需要xx毫升)清理液(ReagentA)清洗1次4.移入一個液氮凍存管5.即刻放進(jìn)液氮罐過夜6.次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)碾碎組織(注意:切莫使組織凍融)7.放進(jìn)一個15毫升錐形離心管8.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液9.渦旋震蕩5秒,充分混勻10.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒11.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)12.渦旋震蕩5秒,充分混勻13.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見注意事項9)14.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻15.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g16.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞17.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g18.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物19.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)20.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g21.(選擇步驟)小心抽去上清液22.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻23.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里三、動物細(xì)胞線粒體分離(細(xì)胞勻漿法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到每個細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面,3.小心抽去清洗液4.重復(fù)實驗步驟2至3一次5.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面6.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種7.手擊震動培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落8.分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液9.全部移入到一個50毫升錐形離心管10.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g11.小心抽去上清液12.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞13.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g14.小心抽去上清液15.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液16.渦旋震蕩5秒,充分混勻細(xì)胞顆粒群17.即刻放進(jìn)預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用研磨棒勻化細(xì)胞(約80下)(注意:參見注意事項8)18.將所有細(xì)胞勻漿物移入15毫升錐形離心管19.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g20.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞21.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g22.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物23.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)24.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g25.(選擇步驟)小心抽去上清液26.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻27.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里四、動物細(xì)胞線粒體分離(化學(xué)處理法)實驗開始前,將試劑盒里的活性液(ReagentF)凍融,然后移出xx微升活性液(ReagentF)、xx毫升凈化液(ReagentC)和xx毫升的裂解液(ReagentB)到15毫升錐形離心管里,混勻后,標(biāo)記為裂解工作液,放進(jìn)冰槽里備用。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備5至10瓶75cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶的細(xì)胞(5X107),直至細(xì)胞生長鋪滿整個培養(yǎng)表面2.分別加入10毫升用戶自備的HANK平衡鹽溶液或PBS溶液到每個細(xì)胞培養(yǎng)瓶,覆蓋培養(yǎng)瓶表面28.小心抽去清洗液3.重復(fù)實驗步驟2至3一次4.加入3毫升用戶自備的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,鋪滿整個培養(yǎng)平面5.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育3分種6.手擊震動培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫落7.分別加入10毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液8.全部移入到一個50毫升錐形離心管9.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為200g10.小心抽去上清液11.加入xx毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA)12.放進(jìn)臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為300g13.小心抽去上清液14.加入預(yù)冷的xx毫升裂解工作液15.渦旋震蕩5秒,充分混勻16.在冰槽里孵育2分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒17.加入預(yù)冷的xx微升強(qiáng)化液(ReagentD)18.渦旋震蕩5秒,充分混勻19.在冰槽里孵育5分鐘,其中每間隔一分鐘渦旋震蕩5秒(注意:參見注意事項9)20.加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE),用手混勻21.放進(jìn)4℃臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為1500g22.小心移出上清液到另一個新的預(yù)冷的15毫升錐形離心管此步驟去除細(xì)胞核和未溶解的細(xì)胞23.放進(jìn)4℃超速離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g24.小心抽去上清液,保留沉淀顆粒此步驟獲得線粒體沉淀物25.(選擇步驟)加入預(yù)冷的xx毫升保存液(ReagentE)26.(選擇步驟)放進(jìn)4℃超速離心機(jī)再次離心5分鐘,速度為10000g27.(選擇步驟)小心抽去上清液28.加入xx毫升保存液(ReagentE),充分混勻29.即刻移入1.5毫升離心管,放進(jìn)-70℃冰箱里注意事項1.本產(chǎn)品為10次(1克動物組織或5X107細(xì)胞)或50次(200毫克動物組織或1X107細(xì)胞)操作2.實際操作的動物組織重量或細(xì)胞量與試劑使用量按比例調(diào)整:例如200毫克動物組織:試劑用量是標(biāo)準(zhǔn)用量的五分之一3.所有操作均須在4℃或以下狀態(tài)進(jìn)行4.操作時,須戴手套5.操作時,須無菌操作,避免污染母液,尤其是裂解液(ReagentB)和保存液(ReagentE)6.建議使用足夠的樣品量7.建議嚴(yán)格控制操作時間8.通常勻化次數(shù)為80下達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升勻漿物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加勻化次數(shù)9.通常孵育5分鐘達(dá)到80%的細(xì)胞裂解為理想狀態(tài),但不同的組織或細(xì)胞類型會存在差異。用戶可以通過顯微鏡觀察3微升裂解物的細(xì)胞裂解程度:完整細(xì)胞呈現(xiàn)發(fā)亮的圓環(huán)。低于50%可以增加孵育時間和渦旋震蕩次數(shù)10.對于難以裂解的細(xì)胞,例如HeLa細(xì)胞,采用物理勻漿法是優(yōu)先推薦的技術(shù)處理11.通常5X107細(xì)胞或1克動物組織的線粒體含量為50微克以上線粒體蛋白12.如果需要計量線粒體,稀釋后數(shù)分鐘內(nèi)完成,否則線粒體將分解13.本產(chǎn)品所獲得的線粒體純度和產(chǎn)量Z為理想。通過調(diào)整10000g離心速度到3000至8000g,可以提高粗提的線粒體純化程度,但線粒體產(chǎn)量相應(yīng)減少14.如果需要獲得99%以上純度的線粒體,使用動物細(xì)胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試劑盒-10006.315.線粒體正?;钚詼y定方法是:CITRATESYNTHASE活性、氧化磷酸化、細(xì)胞色素吸收峰譜等16.線粒體內(nèi)外膜完整測定方法是:CYTOCHROMECOXIDASE活性和熒光JC染色17.本公司提供線粒體套餐:ROS、NAO、MitoTRACK、JGB、線粒體溶解等18.本公司提供系列線粒體分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能長期穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體內(nèi)外膜完整3.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定分離的線粒體維持正常活性4.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定不含污染性蛋白酶和核酶[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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荷葉提取物的分離和純化
- 荷葉提取物的分離和純化[詳細(xì)]
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2007-01-18 00:00
其它
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