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體液尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
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本文由 上海銘博生物科技有限公司 整理匯編
2018-11-08 10:00 461閱讀次數(shù)
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主要用途是一種旨在通過(guò)三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶的水解,釋放黃色對(duì)硝基苯胺,產(chǎn)生吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體等)尿激酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景尿激酶(urokinase;UK;EC3.4.21.73),又稱(chēng)為尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(urokinase-typePlasminogenActivator;uPA),屬于絲氨酸蛋白酶,存在于血液、細(xì)胞外基質(zhì)和尿液中。尿激酶由411氨基酸構(gòu)成,分子量為54KD,有3個(gè)結(jié)構(gòu)域:絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域、kringle結(jié)構(gòu)域和生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域。其主要的生理性底物為纖維蛋白溶酶原(Plasminogen),即纖維蛋白溶酶(plasmin)的酶原形式(zymogen),切離部位為Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切離后激活,纖維蛋白溶酶參與細(xì)胞蛋白水解過(guò)程,包括血栓溶解(thrombolysis)和細(xì)胞外基質(zhì)降解等。尿激酶與組織重構(gòu)、修復(fù)、血管形成(angiogenesis)性疾病和腫瘤擴(kuò)散有關(guān)。尿激酶的YZ劑是絲氨酸蛋白酶YZ劑(serpins),即纖維蛋白溶酶原激活劑YZ劑(PlasminogenActivatorInhibitor;PAI)?;谌斯ず铣傻娜幕衔锏孜飌-EGR-pNA(pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nithoaniline;焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰對(duì)硝基苯胺)受到尿激酶的水解,釋放有色對(duì)硝基苯胺,在分光光度儀(405nm波長(zhǎng))下,測(cè)定吸光峰值的變化,來(lái)定量測(cè)定尿激酶的活性。尿激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升陰性液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;底物液(ReagentE)避免光照和反復(fù)凍融;有效保證6月用戶(hù)自備15
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體液尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 主要用途是一種旨在通過(guò)三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶的水解,釋放黃色對(duì)硝基苯胺,產(chǎn)生吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體等)尿激酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景尿激酶(urokinase;UK;EC3.4.21.73),又稱(chēng)為尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(urokinase-typePlasminogenActivator;uPA),屬于絲氨酸蛋白酶,存在于血液、細(xì)胞外基質(zhì)和尿液中。尿激酶由411氨基酸構(gòu)成,分子量為54KD,有3個(gè)結(jié)構(gòu)域:絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域、kringle結(jié)構(gòu)域和生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域。其主要的生理性底物為纖維蛋白溶酶原(Plasminogen),即纖維蛋白溶酶(plasmin)的酶原形式(zymogen),切離部位為Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切離后激活,纖維蛋白溶酶參與細(xì)胞蛋白水解過(guò)程,包括血栓溶解(thrombolysis)和細(xì)胞外基質(zhì)降解等。尿激酶與組織重構(gòu)、修復(fù)、血管形成(angiogenesis)性疾病和腫瘤擴(kuò)散有關(guān)。尿激酶的YZ劑是絲氨酸蛋白酶YZ劑(serpins),即纖維蛋白溶酶原激活劑YZ劑(PlasminogenActivatorInhibitor;PAI)?;谌斯ず铣傻娜幕衔锏孜飌-EGR-pNA(pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nithoaniline;焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰對(duì)硝基苯胺)受到尿激酶的水解,釋放有色對(duì)硝基苯胺,在分光光度儀(405nm波長(zhǎng))下,測(cè)定吸光峰值的變化,來(lái)定量測(cè)定尿激酶的活性。尿激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升陰性液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;底物液(ReagentE)避免光照和反復(fù)凍融;有效保證6月用戶(hù)自備15[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-09-16 01:24
操作手冊(cè)
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解,釋放出巰基基團(tuán),使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心改良、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物和人體各種體液包括尿液、腦脊液、唾液、精液等樣品脂肪酶的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性糖蛋白分子,催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵(esterbond)的水解。在人體中,其來(lái)源于產(chǎn)生。在消化系統(tǒng)中,脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG),產(chǎn)生1個(gè)分子甘油(glycerol)和3個(gè)分子游離脂肪酸分子(fattyacid)。脂肪酶異常與炎、管阻塞、癌、腎病、唾液腺炎癥、腸道阻塞等相關(guān);異常降低則與中脂肪酶產(chǎn)生細(xì)胞的性損傷有關(guān)。脂肪酶的活性檢測(cè)是臨床診斷的指標(biāo)之一。基于脂肪酶在水分子的參與下,催化三丁酸二巰基丙醇(dimercaptopropanoltributyrate;DMPTB或BALB)的水解,產(chǎn)生二巰基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并釋放出巰基基團(tuán)(-SH),進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化(412nm波長(zhǎng)),來(lái)定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-03-30 00:00
安裝說(shuō)明
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組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-26 00:00
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細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化,即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2,簡(jiǎn)稱(chēng)為CYP1A2,是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一,也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶(arylhydrocarbonhydrorylase;AHH)的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15%。與CYP1A1高度同源,特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個(gè)多態(tài)性變體,Z常見(jiàn)的是:1A和1F,與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥(porphyriacutaneatarda)相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation),以及脂類(lèi)合成包括膽固醇和類(lèi)固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶(7-methoxyresorufin-O-demethylase;MROD)的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記,其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑(7-methoxyresorufin)在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮(resorufin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長(zhǎng)530nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm),來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升底物液(ReagentC)微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在-20℃冰箱里,底物液(ReagentC)和標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)避免光照,有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板:用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里2.設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長(zhǎng)530nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm,并置零3.準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號(hào)管4.加入xx微升緩沖液(ReagentA)到1號(hào)管5.分別加入xx微升緩沖液(ReagentA)到2至5號(hào)管6.移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到1號(hào)管,混勻7.小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到2號(hào)管,混勻8.小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到3號(hào)管,混勻9.小心移取xx微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到4號(hào)管,混勻10.將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表管號(hào)緩沖液(ReagentA)標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號(hào)管納摩爾/升3微升微升2號(hào)管納摩爾/升4微升微升3號(hào)管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)測(cè)定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)獲得相對(duì)熒光讀數(shù)8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):縱座標(biāo)(Y軸)為相對(duì)熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)三、樣品測(cè)定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升待測(cè)樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè):獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8.(選擇步驟)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7,測(cè)讀新的樣品9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計(jì)算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷10(分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測(cè)定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)樣品2.分別移取xx微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.分別加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)4.分別加入xx微升底物液(ReagentC)5.分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測(cè)樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)6.輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板7.在37℃溫度下孵育10分鐘8.即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測(cè):獲得相對(duì)熒光讀數(shù)9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):縱座標(biāo)(Y軸)為相對(duì)熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)10.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11.活性計(jì)算:[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為25次(比色皿)或85次(酶標(biāo)板)操作,包括標(biāo)準(zhǔn)液2.操作時(shí),須戴手套3.系統(tǒng)操作過(guò)程中,標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要(本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1)5.孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定6.如果酶活性過(guò)低,可以增加反應(yīng)時(shí)間至30分鐘7.熒光測(cè)定后,比色皿須清洗徹底8.建議待測(cè)樣本為微粒體,其蛋白濃度為20微克/100微升;待測(cè)樣本為細(xì)胞裂解懸液,其蛋白濃度為100至200微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)9.如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低,可以調(diào)整樣品濃度10.通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為:200-600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11.細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為:在37℃,pH7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個(gè)活性單位12.本公司提供系列毒理學(xué)檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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活化凝血因子5(FACTOR Va)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
- 用途主要活化凝血因子5(FACTORVa)活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在活化凝血因子X(jué)(FXa)及其輔因子活化凝血因子(FVa),激活凝血酶,進(jìn)而水解多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg-AMC,釋放出熒光產(chǎn)物氨甲基香豆素,產(chǎn)生熒光峰值的變化,即采用熒光法來(lái)測(cè)定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種血漿樣品(動(dòng)物、人體等)活化凝血因子5的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景凝血因子5(FactorV)是維生素K非依賴(lài)性的不穩(wěn)定性單鏈糖蛋白,由肝組織、內(nèi)皮組織、巨核細(xì)胞、血小板等合成。血小板中含有20至25%凝血因子5。凝血因子5,作為活化凝血因子10的輔因子,成為凝血酶原復(fù)合物一員,包括活化凝血因子10、鈣離子和磷脂等,其功能在于轉(zhuǎn)化凝血酶原為凝血酶(THROMBIN;EC3.4.21.5),即活化凝血因子II(ActivatedFactorII;FactorIIa),構(gòu)成常見(jiàn)(common)凝血通路或機(jī)制。肝病、彌散性血管內(nèi)凝血(Disseminatedintravascularcoagulation;DIC)、原發(fā)性纖維蛋白溶解癥(primaryfibrinolysis)等引起凝血因子5減少或缺失。凝血因子5缺失將導(dǎo)致凝血酶原時(shí)間(prothrombintime;PT)和活化部分凝血活酶時(shí)間(activatedpartialthromboplastintime;APTT)延長(zhǎng),而出現(xiàn)出血體質(zhì)?;罨蜃覺(jué)(FXa)及其輔因子活化凝血因子(FVa)一起,在鈣離子和磷脂的參與下,使凝血酶原(prothrombin)轉(zhuǎn)化為凝血酶(thrombin)基于由此水解人工合成的多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg--7-amido-4-methylcoumarin(HD-苯丙氨酰-pipecolyl-精氨酰氨甲基香豆素),釋放出熒光7-氨基-4-甲基香豆素(7-amido-4-methylcoumarin;AMC;激發(fā)波長(zhǎng)360nm;散發(fā)波長(zhǎng)460nm),來(lái)定量測(cè)定活化凝血因子V的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2015-05-04 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化,即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2,簡(jiǎn)稱(chēng)為CYP1A2,是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一,也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶(arylhydrocarbonhydrorylase;AHH)的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15%。與CYP1A1高度同源,特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個(gè)多態(tài)性變體,Z常見(jiàn)的是:1A和1F,與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥(porphyriacutaneatarda)相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation),以及脂類(lèi)合成包括膽固醇和類(lèi)固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶(7-methoxyresorufin-O-demethylase;MROD)的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記,其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑(7-methoxyresorufin)在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮(resorufin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長(zhǎng)530nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm),來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升底物液(ReagentC)微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)微升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存在-20℃冰箱里,底物液(ReagentC)和標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)避免光照,有效保證6月用戶(hù)自備1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板:用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里2.設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長(zhǎng)530nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm,并置零3.準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號(hào)管4.加入xx微升緩沖液(ReagentA)到1號(hào)管5.分別加入xx微升緩沖液(ReagentA)到2至5號(hào)管6.移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到1號(hào)管,混勻7.小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到2號(hào)管,混勻8.小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到3號(hào)管,混勻9.小心移取xx微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到4號(hào)管,混勻10.將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見(jiàn)下表管號(hào)緩沖液(ReagentA)標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號(hào)管納摩爾/升3微升微升2號(hào)管納摩爾/升4微升微升3號(hào)管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)測(cè)定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè)獲得相對(duì)熒光讀數(shù)8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):縱座標(biāo)(Y軸)為相對(duì)熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)三、樣品測(cè)定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升待測(cè)樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測(cè):獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8.(選擇步驟)重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7,測(cè)讀新的樣品9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計(jì)算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷10(分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測(cè)定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測(cè)樣品2.分別移取xx微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.分別加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)4.分別加入xx微升底物液(ReagentC)5.分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測(cè)樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)6.輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板7.在37℃溫度下孵育10分鐘8.即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測(cè):獲得相對(duì)熒光讀數(shù)9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):縱座標(biāo)(Y軸)為相對(duì)熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)10.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11.活性計(jì)算:[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘注意事項(xiàng)1.本產(chǎn)品為25次(比色皿)或85次(酶標(biāo)板)操作,包括標(biāo)準(zhǔn)液2.操作時(shí),須戴手套3.系統(tǒng)操作過(guò)程中,標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要(本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1)5.孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測(cè)定6.如果酶活性過(guò)低,可以增加反應(yīng)時(shí)間至30分鐘7.熒光測(cè)定后,比色皿須清洗徹底8.建議待測(cè)樣本為微粒體,其蛋白濃度為20微克/100微升;待測(cè)樣本為細(xì)胞裂解懸液,其蛋白濃度為100至200微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)9.如果待測(cè)樣品濃度過(guò)高或過(guò)低,可以調(diào)整樣品濃度通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為:200-600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11.細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為:在37℃,pH7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個(gè)活性單位12.本公司提供系列毒理學(xué)檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
- 主要用途細(xì)胞色素P450酶系(CYP-ECOD)總活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)中乙氧基香豆素轉(zhuǎn)化為羥基香豆素后熒光峰值的變化,即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶系活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450酶系的總活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱(chēng)。其分成五十多個(gè)亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。乙氧基香豆素脫乙基酶(7-ethoxycoumarinO-deethylase;ECOD)的活性是細(xì)胞色素P450酶系的診斷標(biāo)記,其基于ECOD廣泛性催化細(xì)胞色素P450亞酶的活性。乙氧基香豆素(7-ethoxycoumarin)在乙氧基香豆素脫乙基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基香豆素(7-hydroxycoumarin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長(zhǎng)368nm,散發(fā)波長(zhǎng)456nm),來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 (SIRT1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
- 細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 (SIRT1)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-04-08 00:00
期刊論文
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細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
課件
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細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠細(xì)胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 大鼠細(xì)胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
期刊論文
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組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 組織鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒 說(shuō)明書(shū)(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-29 00:00
報(bào)價(jià)單
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逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 乙醛脫氫酶(ALDH)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)Elisakit規(guī)格:48孔配置/96孔配置標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶酶標(biāo)試劑:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)【大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒】本試劑僅供研究使用計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。試劑盒組成:封板膜:2片(48)/2片(96)說(shuō)明書(shū):1份密封袋:1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品:2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)包被板:1×481×962-8℃保存樣品稀釋液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠血血管生成素2(ANG-2)水平。用純化的大鼠血血管生成素2(ANG-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A),再與HRP標(biāo)記的抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠血血管生成素2(ANG-2)濃度。目的:本試劑盒用于測(cè)大鼠血血清,血漿及相關(guān)液體樣本中抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)的含量。服務(wù)承諾:供貨期:款到發(fā)貨。工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)的技術(shù)咨詢(xún)和指導(dǎo)。為客戶(hù)提供來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),Zda限度實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性(免費(fèi)代測(cè))。保存條件及有效期:試劑盒保存:2-8℃|有效期:6個(gè)月【大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒】樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L,150ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行?!敬笫竽蚣っ福║K)ELISA試劑盒】注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。試劑盒性能:1.樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:0.2IU/L-6IU/[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性熒光定量檢測(cè)
- 主要用途細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)AMMC去甲基化酶反應(yīng)系統(tǒng)中AMMC轉(zhuǎn)化為AMHC后熒光峰值的變化,即采用熒光法來(lái)測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱(chēng)。其分成五十多個(gè)亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。AMMC羥基化酶(AMMC7-hydroxylase)的活性是細(xì)胞色素P450亞酶2D6的診斷標(biāo)記,其基于AMMC羥基化酶選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性。人體細(xì)胞色素P450亞酶2D6(CYP2D6;EC1.14.14.1),主要表達(dá)在肝、腎、胎盤(pán)、腦、乳腺、肺、和腸道組織中,是肝組織細(xì)胞色素P450酶總量的4%。CYP2D6是多態(tài)性酶,在80多個(gè)等位基因上,出現(xiàn)變異,具有個(gè)體和種族差異,與肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏癥等疾病發(fā)生,以及藥物代謝敏感性差異存在相關(guān)性。CYP2D6主要代謝三分之一的臨床藥物,尤其含有堿性氮原子(basicnitrogenatom)的藥物,包括異喹胍(debrisoquine)的4-羥基化、鷹爪豆堿(sparteine)的氧化、抗抑郁癥藥物、神經(jīng)松弛藥(neuroleptic),以及內(nèi)源性5-羥色胺(hydroxytryptamine)、神經(jīng)類(lèi)固醇(neurosteroid)等。同時(shí)會(huì)產(chǎn)生肝毒性的乙酰苯醌亞胺(N-acetyl-p-benzyquinoneimine)?;谶x擇性底物AMMC(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-methoxy-4-methylcoumarin)在CYP2D6的去甲基化(o-demethylation)作用下,轉(zhuǎn)化為AMHC羥基香豆素(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-hydroxy-4-methylcoumarin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長(zhǎng)405nm,散發(fā)波長(zhǎng)460nm),來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞色素P450酶2D6的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)
- 植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版)主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)鈣離子特異性熒光探針Fluo-4,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀(guān)察相對(duì)熒光峰值的變化,來(lái)測(cè)定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4,一種與鈣離子結(jié)合,其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針,可以敏感測(cè)定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)485nm,散發(fā)波長(zhǎng)520nm,來(lái)定量測(cè)定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升反應(yīng)液(ReagentC)6毫升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentC)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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