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細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性熒光定量檢測

本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編

2018-11-18 10:00 1010閱讀次數(shù)

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主要用途細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過AMMC去甲基化酶反應(yīng)系統(tǒng)中AMMC轉(zhuǎn)化為AMHC后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。AMMC羥基化酶(AMMC7-hydroxylase)的活性是細(xì)胞色素P450亞酶2D6的診斷標(biāo)記,其基于AMMC羥基化酶選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性。人體細(xì)胞色素P450亞酶2D6(CYP2D6;EC1.14.14.1),主要表達(dá)在肝、腎、胎盤、腦、乳腺、肺、和腸道組織中,是肝組織細(xì)胞色素P450酶總量的4%。CYP2D6是多態(tài)性酶,在80多個等位基因上,出現(xiàn)變異,具有個體和種族差異,與肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏癥等疾病發(fā)生,以及藥物代謝敏感性差異存在相關(guān)性。CYP2D6主要代謝三分之一的臨床藥物,尤其含有堿性氮原子(basicnitrogenatom)的藥物,包括異喹胍(debrisoquine)的4-羥基化、鷹爪豆堿(sparteine)的氧化、抗抑郁癥藥物、神經(jīng)松弛藥(neuroleptic),以及內(nèi)源性5-羥色胺(hydroxytryptamine)、神經(jīng)類固醇(neurosteroid)等。同時會產(chǎn)生肝毒性的乙酰苯醌亞胺(N-acetyl-p-benzyquinoneimine)?;谶x擇性底物AMMC(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-methoxy-4-methylcoumarin)在CYP2D6的去甲基化(o-demethylation)作用下,轉(zhuǎn)化為AMHC羥基香豆素(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-hydroxy-4-methylcoumarin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長405nm,散發(fā)波長460nm),來定量測定細(xì)胞色素P450酶2D6的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:

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