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細胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2024-09-16 01:24 326閱讀次數(shù)
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細胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書
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細胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書
- 細胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書[詳細]
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2024-09-16 01:24
操作手冊
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細胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細]
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2015-05-04 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細胞色素P450亞酶1A2,簡稱為CYP1A2,是肝細胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一,也是芳香族碳氫化合物加羥基酶(arylhydrocarbonhydrorylase;AHH)的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15%。與CYP1A1高度同源,特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個多態(tài)性變體,Z常見的是:1A和1F,與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥(porphyriacutaneatarda)相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation),以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳氫化合物誘導(dǎo)CYP1A2的表達。甲氧基異酚唑脫甲基酶(7-methoxyresorufin-O-demethylase;MROD)的活性是細胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記,其基于MROD選擇性催化細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑(7-methoxyresorufin)在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮(resorufin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長530nm,散發(fā)波長590nm),來定量測定細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升底物液(ReagentC)微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,底物液(ReagentC)和標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板:用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于熒光分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進行下列操作。一、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好待測樣品(例如細胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里2.設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長530nm,散發(fā)波長590nm,并置零3.準(zhǔn)備好5個1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號管4.加入xx微升緩沖液(ReagentA)到1號管5.分別加入xx微升緩沖液(ReagentA)到2至5號管6.移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到1號管,混勻7.小心移取xx微升1號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到2號管,混勻8.小心移取xx微升2號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到3號管,混勻9.小心移取xx微升3號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到4號管,混勻10.將1至5號管放進冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號緩沖液(ReagentA)標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號管納摩爾/升3微升微升2號管納摩爾/升4微升微升3號管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進熒光分光光度儀檢測獲得相對熒光讀數(shù)8.重復(fù)實驗步驟1至7四次9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為相對熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)三、樣品測定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升待測樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進熒光分光光度儀檢測:獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8.(選擇步驟)重復(fù)實驗步驟1至7,測讀新的樣品9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷10(分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品2.分別移取xx微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.分別加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)4.分別加入xx微升底物液(ReagentC)5.分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)6.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板7.在37℃溫度下孵育10分鐘8.即刻放進熒光酶標(biāo)儀檢測:獲得相對熒光讀數(shù)9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為相對熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)10.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11.活性計算:[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx(反應(yīng)時間;分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘注意事項1.本產(chǎn)品為25次(比色皿)或85次(酶標(biāo)板)操作,包括標(biāo)準(zhǔn)液2.操作時,須戴手套3.系統(tǒng)操作過程中,標(biāo)準(zhǔn)液測定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要(本公司提供細胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1)5.孵育反應(yīng)完成后即刻進行熒光測定6.如果酶活性過低,可以增加反應(yīng)時間至30分鐘7.熒光測定后,比色皿須清洗徹底8.建議待測樣本為微粒體,其蛋白濃度為20微克/100微升;待測樣本為細胞裂解懸液,其蛋白濃度為100至200微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)9.如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度通常人體細胞微粒體細胞色素P450亞酶1A2活性濃度為:200-600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11.細胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為:在37℃,pH7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個活性單位12.本公司提供系列毒理學(xué)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細胞色素P450酶系(CYP-ECOD)總活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)中乙氧基香豆素轉(zhuǎn)化為羥基香豆素后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶系活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細胞色素P450酶系的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細胞色素P450酶是肝細胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。乙氧基香豆素脫乙基酶(7-ethoxycoumarinO-deethylase;ECOD)的活性是細胞色素P450酶系的診斷標(biāo)記,其基于ECOD廣泛性催化細胞色素P450亞酶的活性。乙氧基香豆素(7-ethoxycoumarin)在乙氧基香豆素脫乙基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基香豆素(7-hydroxycoumarin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長368nm,散發(fā)波長456nm),來定量測定細胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒說明書
- 細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細胞色素P450亞酶1A2,簡稱為CYP1A2,是肝細胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一,也是芳香族碳氫化合物加羥基酶(arylhydrocarbonhydrorylase;AHH)的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15%。與CYP1A1高度同源,特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個多態(tài)性變體,Z常見的是:1A和1F,與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥(porphyriacutaneatarda)相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation),以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳氫化合物誘導(dǎo)CYP1A2的表達。甲氧基異酚唑脫甲基酶(7-methoxyresorufin-O-demethylase;MROD)的活性是細胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記,其基于MROD選擇性催化細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑(7-methoxyresorufin)在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮(resorufin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長530nm,散發(fā)波長590nm),來定量測定細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升底物液(ReagentC)微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,底物液(ReagentC)和標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板:用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于熒光分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進行下列操作。一、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好待測樣品(例如細胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里2.設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長530nm,散發(fā)波長590nm,并置零3.準(zhǔn)備好5個1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號管4.加入xx微升緩沖液(ReagentA)到1號管5.分別加入xx微升緩沖液(ReagentA)到2至5號管6.移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到1號管,混勻7.小心移取xx微升1號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到2號管,混勻8.小心移取xx微升2號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到3號管,混勻9.小心移取xx微升3號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到4號管,混勻10.將1至5號管放進冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號緩沖液(ReagentA)標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號管納摩爾/升3微升微升2號管納摩爾/升4微升微升3號管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進熒光分光光度儀檢測獲得相對熒光讀數(shù)8.重復(fù)實驗步驟1至7四次9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為相對熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)三、樣品測定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升待測樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進熒光分光光度儀檢測:獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8.(選擇步驟)重復(fù)實驗步驟1至7,測讀新的樣品9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷10(分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品2.分別移取xx微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.分別加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)4.分別加入xx微升底物液(ReagentC)5.分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)6.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板7.在37℃溫度下孵育10分鐘8.即刻放進熒光酶標(biāo)儀檢測:獲得相對熒光讀數(shù)9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為相對熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)10.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11.活性計算:[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx(反應(yīng)時間;分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘注意事項1.本產(chǎn)品為25次(比色皿)或85次(酶標(biāo)板)操作,包括標(biāo)準(zhǔn)液2.操作時,須戴手套3.系統(tǒng)操作過程中,標(biāo)準(zhǔn)液測定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要(本公司提供細胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1)5.孵育反應(yīng)完成后即刻進行熒光測定6.如果酶活性過低,可以增加反應(yīng)時間至30分鐘7.熒光測定后,比色皿須清洗徹底8.建議待測樣本為微粒體,其蛋白濃度為20微克/100微升;待測樣本為細胞裂解懸液,其蛋白濃度為100至200微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)9.如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度10.通常人體細胞微粒體細胞色素P450亞酶1A2活性濃度為:200-600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11.細胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為:在37℃,pH7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個活性單位12.本公司提供系列毒理學(xué)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-07 00:00
課件
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細胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-07 00:00
產(chǎn)品樣冊
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體液尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒說明書
- 主要用途是一種旨在通過三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶的水解,釋放黃色對硝基苯胺,產(chǎn)生吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動物、人體等)尿激酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景尿激酶(urokinase;UK;EC3.4.21.73),又稱為尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(urokinase-typePlasminogenActivator;uPA),屬于絲氨酸蛋白酶,存在于血液、細胞外基質(zhì)和尿液中。尿激酶由411氨基酸構(gòu)成,分子量為54KD,有3個結(jié)構(gòu)域:絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域、kringle結(jié)構(gòu)域和生長因子結(jié)構(gòu)域。其主要的生理性底物為纖維蛋白溶酶原(Plasminogen),即纖維蛋白溶酶(plasmin)的酶原形式(zymogen),切離部位為Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切離后激活,纖維蛋白溶酶參與細胞蛋白水解過程,包括血栓溶解(thrombolysis)和細胞外基質(zhì)降解等。尿激酶與組織重構(gòu)、修復(fù)、血管形成(angiogenesis)性疾病和腫瘤擴散有關(guān)。尿激酶的YZ劑是絲氨酸蛋白酶YZ劑(serpins),即纖維蛋白溶酶原激活劑YZ劑(PlasminogenActivatorInhibitor;PAI)?;谌斯ず铣傻娜幕衔锏孜飌-EGR-pNA(pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nithoaniline;焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰對硝基苯胺)受到尿激酶的水解,釋放有色對硝基苯胺,在分光光度儀(405nm波長)下,測定吸光峰值的變化,來定量測定尿激酶的活性。尿激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升陰性液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;底物液(ReagentE)避免光照和反復(fù)凍融;有效保證6月用戶自備15[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 (SIRT1)活性熒光定量檢測試劑盒
- 細胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 (SIRT1)活性熒光定量檢測試劑盒[詳細]
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2015-04-08 00:00
期刊論文
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大鼠細胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 大鼠細胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-07 00:00
期刊論文
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組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-26 00:00
選購指南
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細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強度顯著增強,在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定細胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞(動物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細胞內(nèi),鈣離子主要儲存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達到細胞需求,維持細胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,Rhod-2-AM,進入細胞受到酯酶解離,同時其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm,來定量測定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)10毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實驗步驟測定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm測定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測準(zhǔn)備1個黑色96孔板,標(biāo)記為:細胞樣品孔、空白對照孔(不含細胞)、Zda對照孔(含細胞)小心抽去細胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動黑色96孔板,混勻放進37℃細胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照小心抽去細胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細胞樣品孔里重復(fù)實驗步驟9和10一次放進37℃細胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對照孔里放進37℃細胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進熒光酶標(biāo)儀測讀:獲得相對熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對照孔RFU)÷(Zda對照孔RFU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時,須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進行熒光測定如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測敏感度可達納摩爾級鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測本公司提供系列鈣生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性熒光定量檢測
- 主要用途細胞色素P450亞酶CYP2D6(AMMC)活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過AMMC去甲基化酶反應(yīng)系統(tǒng)中AMMC轉(zhuǎn)化為AMHC后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細胞色素P450亞酶2D6的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細胞色素P450酶是肝細胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。AMMC羥基化酶(AMMC7-hydroxylase)的活性是細胞色素P450亞酶2D6的診斷標(biāo)記,其基于AMMC羥基化酶選擇性催化細胞色素P450亞酶2D6的活性。人體細胞色素P450亞酶2D6(CYP2D6;EC1.14.14.1),主要表達在肝、腎、胎盤、腦、乳腺、肺、和腸道組織中,是肝組織細胞色素P450酶總量的4%。CYP2D6是多態(tài)性酶,在80多個等位基因上,出現(xiàn)變異,具有個體和種族差異,與肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏癥等疾病發(fā)生,以及藥物代謝敏感性差異存在相關(guān)性。CYP2D6主要代謝三分之一的臨床藥物,尤其含有堿性氮原子(basicnitrogenatom)的藥物,包括異喹胍(debrisoquine)的4-羥基化、鷹爪豆堿(sparteine)的氧化、抗抑郁癥藥物、神經(jīng)松弛藥(neuroleptic),以及內(nèi)源性5-羥色胺(hydroxytryptamine)、神經(jīng)類固醇(neurosteroid)等。同時會產(chǎn)生肝毒性的乙酰苯醌亞胺(N-acetyl-p-benzyquinoneimine)?;谶x擇性底物AMMC(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-methoxy-4-methylcoumarin)在CYP2D6的去甲基化(o-demethylation)作用下,轉(zhuǎn)化為AMHC羥基香豆素(3(2(N,N-diethyl-N-methylammonium)-ethyl)7-hydroxy-4-methylcoumarin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長405nm,散發(fā)波長460nm),來定量測定細胞色素P450酶2D6的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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活化凝血因子5(FACTOR Va)活性熒光定量檢測試劑盒
- 用途主要活化凝血因子5(FACTORVa)活性熒光定量檢測試劑是一種旨在活化凝血因子X(FXa)及其輔因子活化凝血因子(FVa),激活凝血酶,進而水解多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg-AMC,釋放出熒光產(chǎn)物氨甲基香豆素,產(chǎn)生熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種血漿樣品(動物、人體等)活化凝血因子5的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景凝血因子5(FactorV)是維生素K非依賴性的不穩(wěn)定性單鏈糖蛋白,由肝組織、內(nèi)皮組織、巨核細胞、血小板等合成。血小板中含有20至25%凝血因子5。凝血因子5,作為活化凝血因子10的輔因子,成為凝血酶原復(fù)合物一員,包括活化凝血因子10、鈣離子和磷脂等,其功能在于轉(zhuǎn)化凝血酶原為凝血酶(THROMBIN;EC3.4.21.5),即活化凝血因子II(ActivatedFactorII;FactorIIa),構(gòu)成常見(common)凝血通路或機制。肝病、彌散性血管內(nèi)凝血(Disseminatedintravascularcoagulation;DIC)、原發(fā)性纖維蛋白溶解癥(primaryfibrinolysis)等引起凝血因子5減少或缺失。凝血因子5缺失將導(dǎo)致凝血酶原時間(prothrombintime;PT)和活化部分凝血活酶時間(activatedpartialthromboplastintime;APTT)延長,而出現(xiàn)出血體質(zhì)?;罨蜃覺(FXa)及其輔因子活化凝血因子(FVa)一起,在鈣離子和磷脂的參與下,使凝血酶原(prothrombin)轉(zhuǎn)化為凝血酶(thrombin)基于由此水解人工合成的多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg--7-amido-4-methylcoumarin(HD-苯丙氨酰-pipecolyl-精氨酰氨甲基香豆素),釋放出熒光7-氨基-4-甲基香豆素(7-amido-4-methylcoumarin;AMC;激發(fā)波長360nm;散發(fā)波長460nm),來定量測定活化凝血因子V的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-15 00:00
其它
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細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下,受到MMP2的水解,釋放出巰基,進而使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱,因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。其功能在于分解細胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)成分,同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissueresorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類:(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細胞并不儲備MMPs,當(dāng)需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成,合成的MMPs以無活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2,又稱明膠酶A(gelatinase-A)或IV型膠原酶(typeIVcollagenase),其前體分子量為72kDa,激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白(collagens)、纖維連接蛋白(fibronectin)、彈性纖維蛋白(elastin)、層粘連蛋白-5(laminin-5)、前體腫瘤壞死因子-α(pro-TNF-α)和神經(jīng)(蛋白)聚糖(neurocan)?;|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?;诤蚨嚯模╰hiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下,受到MMP2的水解,釋放出巰基(sulfhydrylgroup),進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量測定細胞基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?;|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細胞PTEN活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3),在PTEN去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后,采用比色法測定其峰值的變化,以此進行測算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細胞裂解懸液樣品的PTEN活性及其YZ劑的檢測。廣泛應(yīng)用于細胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景細胞張力蛋白同源在10號染色體缺失性磷酸酶(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen;PTEN;EC3.1.3.67),又稱為多發(fā)性晚期腫瘤突變基因1(mutatedinmultipleadvancedcancers1;MMAC1),是一個腫瘤YZ基因,位于染色體10q23.3,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物515kb,蛋白產(chǎn)物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個氨基酸左右的與骨架蛋白張力蛋白(tenasin)、輔助蛋白(auxilin)同源的區(qū)域,是一種雙重特異性磷酸酶,能使酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、磷酯酰肌醇(phosphoinositide)等去磷酸化。PTEN具有調(diào)節(jié)細胞周期、防止細胞過度生長和分開裂解、參與細胞凋亡、粘附、遷移、浸潤,控制細胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate;PIP3)水平,調(diào)控Akt/PKB信號通路等功能。PTEN基因突變和缺失將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移,以及多發(fā)性錯構(gòu)瘤綜合征(Cowdensyndrome)等?;诘孜锪字<〈?3,4,5-三磷酸,在PTEN的催化下,水解產(chǎn)生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2),同時釋放出游離磷酸根,進而與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)產(chǎn)生其峰值的變化(660nm波長),以此測算PTEN的活性。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)120毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)1毫升陰性液(ReagentD)1毫升反應(yīng)液(ReagentE)200微升終止液(ReagentF)1毫升顯色液(ReagentG)4毫升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentH)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存裂解液(ReagentB)、緩沖液(ReagentC)、反應(yīng)液(ReagentE)和顯色液(ReagentG)在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;其余的保存在4℃冰箱里;終止液(ReagentF)和顯色液(ReagentG)具有腐蝕性,避免直接用手接觸;顯色液(ReagentG)避免光照,有效保證6月用戶自備15毫升離心管:用于樣品處理的容器1.5毫升離心管:用于樣品處理和保存的容器細胞刮脫棒:用于貼壁細胞脫離(微型)臺式離心機:用于樣品收集培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進冰槽里融化。然后進行下列操作。樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細胞培養(yǎng)瓶或60mm細胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細胞(5X106細胞)小心加入3毫升預(yù)冷的清理液(ReagentA),覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細胞刮脫棒輕柔刮脫細胞加入3毫升清理液(ReagentA),混勻細胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細胞從這一步驟開始)放進4℃臺式離心機離心5分鐘,速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液(ReagentB),充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取2微升進行蛋白定量測定(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作二、測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如細胞裂解萃取液等),置于冰槽里(注意:樣品須澄清)設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長為660nm,并置零準(zhǔn)備好5個1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號管按下表分別加入陰性液(ReagentD)和標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentH)到每個離心管,混勻?qū)?至5號管放進冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號陰性液(ReagentD)標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentH)測定體系標(biāo)準(zhǔn)磷濃度10100微升20微摩爾/升225微升75微升15微摩爾/升350微升50微升10微摩爾/升475微升25微升5微摩爾/升5100微升00標(biāo)準(zhǔn)曲線測定移取20微升陰性液(ReagentD)到新的比色皿加入5微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液(ReagentF),混勻加入100微升顯色液(ReagentG),混勻室溫下靜置15分鐘,避免光照即刻放進分光光度儀檢測:獲得吸光讀數(shù)重復(fù)實驗步驟1至7四次構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為吸光單位(A);橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度(微摩爾/升)樣品背景測定移取20微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入5微升待測樣品(總量100微克細胞裂解萃取液蛋白)在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液(ReagentF),混勻加入100微升顯色液(ReagentG),混勻室溫下靜置15分鐘,避免光照即刻放進分光光度儀檢測:獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對應(yīng)磷濃度樣品活性測定移取10微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入5微升待測樣品(總量100微克細胞裂解萃取液蛋白)在37℃溫度下孵育2分鐘加入10微升反應(yīng)液(ReagentE)在37℃溫度下孵育10分鐘加入8微升終止液(ReagentF),混勻加入100微升顯色液(ReagentG),混勻室溫下靜置15分鐘,避免光照即刻放進分光光度儀檢測:獲得吸光讀數(shù)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對應(yīng)磷濃度計算樣品活性{[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品活性對應(yīng)磷濃度(微摩爾/升)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品背景對應(yīng)磷濃度(微摩爾/升)]X5(體系倍數(shù))X樣品稀釋倍數(shù)}÷10(反應(yīng)時間;分鐘)=納摩爾磷/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=納摩爾磷/毫克/分鐘注意事項本產(chǎn)品為25次操作,包括5次標(biāo)準(zhǔn)測定操作時,避免污染母液操作時,須戴手套終止液(ReagentF)和顯色液(ReagentG)具有腐蝕性,避免直接用手接觸樣品切忌使用磷酸緩沖液和脫氧膽酸納處理比色測定后,比色皿須清洗徹底如果用戶沒有660nm波長,可以使用600至660nm的任一波長替代顯示綠色表明具有較強酶活性空白對照讀數(shù)應(yīng)小于0.2建議待測樣本蛋白濃度為100微克/5微升;如果樣本酶活性過低或過高,則可以增加或降低樣本量;(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶活性單位濃度定義:在37℃溫度下,pH8.0的情況下,每單位酶在單位時間內(nèi)(每分鐘)釋放1微摩爾的磷本公司提供系列磷酸化酶檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測準(zhǔn)確[詳細]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-01-07 00:00
實驗操作
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細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2024-09-20 13:41
應(yīng)用文章
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植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過鈣離子特異性熒光探針Fluo-4,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強度顯著增強,在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4,一種與鈣離子結(jié)合,其熒光強度迅速增強100倍的熒光探針,可以敏感測定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長485nm,散發(fā)波長520nm,來定量測定植物組織細胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升反應(yīng)液(ReagentC)6毫升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentC)避免光照;有效保證6月[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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