本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編

2015-04-08 00:00 243閱讀次數(shù)

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• 細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性熒光定量檢測試劑盒

  細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性熒光定量檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2015-04-08 00:00

  期刊論文

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• 細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測

  主要用途細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙?；痯53多肽底物，經(jīng)過SIRT1脫乙?；?，被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來測定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?；福╤istonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類共20多個(gè)蛋白：種類I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴氨酸脫乙?；福╨ysyl-deacetylase）。催化賴氨酸脫乙酰基反應(yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡?；谌斯ず铣傻囊阴；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來標(biāo)記乙酰化p53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙?；?，Z后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長405nm），由此來定量測定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑盒（中文版）

  細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量檢測試劑盒（中文版）[詳細(xì)]

  2015-04-08 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）ELISA試劑盒說明書

  小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）水平。用純化的小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1），再與HRP標(biāo)記的沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：900pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為600pg/mL，400pg/mL，200pg/mL，100pg/mL，50pg/mL）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：22pg/mL-800pg/mL保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）ELISA試劑盒使用說明書

  我司ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量保證，價(jià)格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）水平。用純化的小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1），再與HRP標(biāo)記的沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：900pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為600pg/mL，400pg/mL，200pg/mL，100pg/mL，50pg/mL）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：22pg/mL-800pg/mL保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1活性比色法定量檢測試劑盒

  主要用途組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1（SIRT1）活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過比色探針對(duì)硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙酰化p53多肽底物，經(jīng)過SIRT1脫乙?；?，被位點(diǎn)特異性氨基肽酶水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，即采用比色法來測定組織裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測，以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?；福╤istonedeacetylase；HDAC）家屬分成三類共20多個(gè)蛋白：種類I（classI）與酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于細(xì)胞核中；種類II（classII）與酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里；上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。種類III（classIII）為NAD+輔助因子必需，又稱為sirtuins，與酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，為曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型賴氨酸脫乙?；福╨ysyl-deacetylase）。催化賴氨酸脫乙?；磻?yīng)，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi)，與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡?；谌斯ず铣傻囊阴；痯53（379至382氨基酸位點(diǎn)）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切離的功能，首先使用比色染料對(duì)硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）來標(biāo)記乙?；痯53多肽底物，其次進(jìn)行脫乙?；?，Z后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解，釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對(duì)硝基苯胺（波長405nm），由此來定量測定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。用戶自備磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：用于清洗組織樣品15毫升錐形離心管：用于樣品處理的容器1.5毫升離心管：用于樣品操作和保存的容器（微型）臺(tái)式離心機(jī)：用于組織細(xì)胞預(yù)處理培養(yǎng)箱：用于反應(yīng)物孵育96孔板或100微升1厘米光徑比色皿：用于反應(yīng)和比色的容器酶標(biāo)儀或分光光度儀：用于比色分析注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為20次操作，包括背景對(duì)照2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過程中，背景測定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要5．樣品處理時(shí)，避免使用蛋白酶YZ劑、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行比色測定7．濾波器可以使用波長400nm替代405nm8．測定值由低到高變化；酶動(dòng)法測定可以持續(xù)60分鐘9．測定值吸光讀數(shù)越高，表明酶活性越高10．比色測定后，比色皿須清洗徹底11．待測樣本為核蛋白樣品，其蛋白濃度為50微克/20微升；待測樣本為組織裂解懸液，其蛋白濃度為200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）12．如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度13．沉默調(diào)節(jié)蛋白1單位活性定義為：在30℃，pH8.0條件下，每分鐘內(nèi)能夠釋放1微摩爾對(duì)硝基苯酚所需的酶量作為一個(gè)活性單位14．本公司提供系列組蛋白脫乙?；笝z測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2024-09-16 01:24

  操作手冊(cè)

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• 人沉默調(diào)節(jié)蛋白2(SIRT2)ELISA試劑盒

  人沉默調(diào)節(jié)蛋白2(SIRT2)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 21:25

  報(bào)價(jià)單

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• 人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)檢測試劑盒

  人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-22 18:46

  課件

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒說明書

  細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2，簡稱為CYP1A2，是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一，也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15％。與CYP1A1高度同源，特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個(gè)多態(tài)性變體，Z常見的是：1A和1F，與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥（porphyriacutaneatarda）相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）,以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記，其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下，轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮（resorufin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長530nm，散發(fā)波長590nm），來定量測定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板：用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測定準(zhǔn)備1．準(zhǔn)備好待測樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等），置于冰槽里2．設(shè)定好熒光分光光度儀（溫度為37℃）：激發(fā)波長530nm，散發(fā)波長590nm，并置零3．準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管4．加入xx微升緩沖液（ReagentA）到1號(hào)管5．分別加入xx微升緩沖液（ReagentA）到2至5號(hào)管6．移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到1號(hào)管，混勻7．小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到2號(hào)管，混勻8．小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到3號(hào)管，混勻9．小心移取xx微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到4號(hào)管，混勻10．將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號(hào)緩沖液（ReagentA）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號(hào)管納摩爾/升3微升微升2號(hào)管納摩爾/升4微升微升3號(hào)管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測獲得相對(duì)熒光讀數(shù)8．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）三、樣品測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測：獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8．（選擇步驟）重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7，測讀新的樣品9．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計(jì)算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷10（分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品2．分別移取xx微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．分別加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）4．分別加入xx微升底物液（ReagentC）5．分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）6．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板7．在37℃溫度下孵育10分鐘8．即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測：獲得相對(duì)熒光讀數(shù)9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）10．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11．活性計(jì)算：[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為25次（比色皿）或85次（酶標(biāo)板）操作，包括標(biāo)準(zhǔn)液2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過程中，標(biāo)準(zhǔn)液測定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要（本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1）5．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定6．如果酶活性過低，可以增加反應(yīng)時(shí)間至30分鐘7．熒光測定后，比色皿須清洗徹底8．建議待測樣本為微粒體，其蛋白濃度為20微克/100微升；待測樣本為細(xì)胞裂解懸液，其蛋白濃度為100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）9．如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度10.通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為：200－600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11．細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為：在37℃，pH7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個(gè)活性單位12．本公司提供系列毒理學(xué)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測

  要用途細(xì)胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ劑存在下，受到PP1去磷酸化后，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，采用比色法測定其峰值的變化，以此進(jìn)行測算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復(fù)合物和粗提或部分純化酶樣品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ劑的檢測。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶，嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，反應(yīng)優(yōu)化，檢測敏感。技術(shù)背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又稱為1型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶，是7個(gè)主要絲/蘇氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成員之一，從酵母到人類高度進(jìn)化保留。其參與調(diào)節(jié)多種重要的細(xì)胞生理功能，包括糖原代謝、細(xì)胞分裂、肌肉收縮、信號(hào)傳導(dǎo)、神經(jīng)元功能、轉(zhuǎn)錄、翻譯等，以及與HIV-1轉(zhuǎn)錄過程的調(diào)節(jié)，并且與老年性癡呆等多種疾病密切相關(guān)。PP1分子結(jié)構(gòu)表面的3個(gè)凹槽及β12-β13Loop環(huán)結(jié)構(gòu)，是底物與YZ劑的結(jié)合部位；其催化亞體為37kd，調(diào)節(jié)亞體有2種：目標(biāo)亞體和YZ亞體。基于特異性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ劑福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情況下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，釋放出游離磷酸根，與孔雀綠（malachitegreen）染料發(fā)生顯色反應(yīng)后，在分光光度儀下（660nm波長）產(chǎn)生峰值的變化，由此測定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特異活性。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]

  2015-05-04 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2，簡稱為CYP1A2，是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一，也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15％。與CYP1A1高度同源，特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個(gè)多態(tài)性變體，Z常見的是：1A和1F，與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥（porphyriacutaneatarda）相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）,以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記，其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下，轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮（resorufin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長530nm，散發(fā)波長590nm），來定量測定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液（ReagentA）毫升反應(yīng)液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽：用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板：用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀：用于熒光分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前，將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測定準(zhǔn)備1．準(zhǔn)備好待測樣品（例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等），置于冰槽里2．設(shè)定好熒光分光光度儀（溫度為37℃）：激發(fā)波長530nm，散發(fā)波長590nm，并置零3．準(zhǔn)備好5個(gè)1.5毫升離心管，標(biāo)記為1至5號(hào)管4．加入xx微升緩沖液（ReagentA）到1號(hào)管5．分別加入xx微升緩沖液（ReagentA）到2至5號(hào)管6．移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到1號(hào)管，混勻7．小心移取xx微升1號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到2號(hào)管，混勻8．小心移取xx微升2號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到3號(hào)管，混勻9．小心移取xx微升3號(hào)管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）到4號(hào)管，混勻10．將1至5號(hào)管放進(jìn)冰槽里備用，避免光照；標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號(hào)緩沖液（ReagentA）標(biāo)準(zhǔn)液（ReagentD）標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號(hào)管納摩爾/升3微升微升2號(hào)管納摩爾/升4微升微升3號(hào)管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測獲得相對(duì)熒光讀數(shù)8．重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7四次9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）三、樣品測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）5．上下傾倒數(shù)次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測：獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8．（選擇步驟）重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟1至7，測讀新的樣品9．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計(jì)算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷10（分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測定1．在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記：標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品2．分別移取xx微升緩沖液（ReagentA）到相應(yīng)孔中3．分別加入xx微升反應(yīng)液（ReagentB）4．分別加入xx微升底物液（ReagentC）5．分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）6．輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板7．在37℃溫度下孵育10分鐘8．即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測：獲得相對(duì)熒光讀數(shù)9．構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱座標(biāo)（Y軸）為相對(duì)熒光單位；橫座標(biāo)（X軸）為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）10．根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11．活性計(jì)算：[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對(duì)應(yīng)羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx（反應(yīng)時(shí)間；分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘注意事項(xiàng)1．本產(chǎn)品為25次（比色皿）或85次（酶標(biāo)板）操作，包括標(biāo)準(zhǔn)液2．操作時(shí)，須戴手套3．系統(tǒng)操作過程中，標(biāo)準(zhǔn)液測定只需1次4．樣品須澄清，至關(guān)重要（本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1）5．孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定6．如果酶活性過低，可以增加反應(yīng)時(shí)間至30分鐘7．熒光測定后，比色皿須清洗徹底8．建議待測樣本為微粒體，其蛋白濃度為20微克/100微升；待測樣本為細(xì)胞裂解懸液，其蛋白濃度為100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1）9．如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為：200－600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11．細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為：在37℃，pH7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個(gè)活性單位12．本公司提供系列毒理學(xué)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2．本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

  主要用途細(xì)胞色素P450酶系（CYP-ECOD）總活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)中乙氧基香豆素轉(zhuǎn)化為羥基香豆素后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶系活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450酶系的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個(gè)亞酶：CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）。乙氧基香豆素脫乙基酶（7-ethoxycoumarinO-deethylase；ECOD）的活性是細(xì)胞色素P450酶系的診斷標(biāo)記，其基于ECOD廣泛性催化細(xì)胞色素P450亞酶的活性。乙氧基香豆素（7-ethoxycoumarin）在乙氧基香豆素脫乙基酶的催化下，轉(zhuǎn)化為羥基香豆素（7-hydroxycoumarin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長368nm，散發(fā)波長456nm），來定量測定細(xì)胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 體液尿激酶（UROKINASE）活性熒光定量檢測試劑盒說明書

  主要用途是一種旨在通過三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶的水解，釋放黃色對(duì)硝基苯胺，產(chǎn)生吸光峰值的變化，即采用比色法來測定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體等）尿激酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景尿激酶（urokinase；UK；EC3.4.21.73），又稱為尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑（urokinase-typePlasminogenActivator；uPA），屬于絲氨酸蛋白酶，存在于血液、細(xì)胞外基質(zhì)和尿液中。尿激酶由411氨基酸構(gòu)成，分子量為54KD，有3個(gè)結(jié)構(gòu)域：絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域、kringle結(jié)構(gòu)域和生長因子結(jié)構(gòu)域。其主要的生理性底物為纖維蛋白溶酶原（Plasminogen），即纖維蛋白溶酶（plasmin）的酶原形式（zymogen），切離部位為Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切離后激活，纖維蛋白溶酶參與細(xì)胞蛋白水解過程，包括血栓溶解（thrombolysis）和細(xì)胞外基質(zhì)降解等。尿激酶與組織重構(gòu)、修復(fù)、血管形成（angiogenesis）性疾病和腫瘤擴(kuò)散有關(guān)。尿激酶的YZ劑是絲氨酸蛋白酶YZ劑（serpins），即纖維蛋白溶酶原激活劑YZ劑（PlasminogenActivatorInhibitor；PAI）?；谌斯ず铣傻娜幕衔锏孜飌-EGR-pNA（pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nithoaniline；焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰對(duì)硝基苯胺）受到尿激酶的水解，釋放有色對(duì)硝基苯胺，在分光光度儀（405nm波長）下，測定吸光峰值的變化，來定量測定尿激酶的活性。尿激酶反應(yīng)系統(tǒng)為：產(chǎn)品內(nèi)容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升緩沖液（ReagentC）毫升陰性液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在-20℃冰箱里；底物液（ReagentE）避免光照和反復(fù)凍融；有效保證6月用戶自備15[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

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• 細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性熒光定量檢測

  主要用途細(xì)胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過AMMC去甲基化酶反應(yīng)系統(tǒng)中AMMC轉(zhuǎn)化為AMHC后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個(gè)亞酶：CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）。AMMC羥基化酶（AMMC7-hydroxylase）的活性是細(xì)胞色素P450亞酶2D6的診斷標(biāo)記，其基于AMMC羥基化酶選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶2D6的活性。人體細(xì)胞色素P450亞酶2D6（CYP2D6；EC1.14.14.1），主要表達(dá)在肝、腎、胎盤、腦、乳腺、肺、和腸道組織中，是肝組織細(xì)胞色素P450酶總量的4%。CYP2D6是多態(tài)性酶，在80多個(gè)等位基因上，出現(xiàn)變異，具有個(gè)體和種族差異，與肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏癥等疾病發(fā)生，以及藥物代謝敏感性差異存在相關(guān)性。CYP2D6主要代謝三分之一的臨床藥物，尤其含有堿性氮原子（basicnitrogenatom）的藥物，包括異喹胍（debrisoquine）的4-羥基化、鷹爪豆堿（sparteine）的氧化、抗抑郁癥藥物、神經(jīng)松弛藥（neuroleptic），以及內(nèi)源性5-羥色胺（hydroxytryptamine）、神經(jīng)類固醇（neurosteroid）等。同時(shí)會(huì)產(chǎn)生肝毒性的乙酰苯醌亞胺（N-acetyl-p-benzyquinoneimine）?；谶x擇性底物AMMC（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-methoxy-4-methylcoumarin）在CYP2D6的去甲基化（o-demethylation）作用下，轉(zhuǎn)化為AMHC羥基香豆素（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-hydroxy-4-methylcoumarin）后熒光峰值的變化（激發(fā)波長405nm，散發(fā)波長460nm），來定量測定細(xì)胞色素P450酶2D6的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-07 00:00

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• 細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-07 00:00

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• 活化凝血因子5（FACTOR Va）活性熒光定量檢測試劑盒

  用途主要活化凝血因子5（FACTORVa）活性熒光定量檢測試劑是一種旨在活化凝血因子X（FXa）及其輔因子活化凝血因子（FVa），激活凝血酶，進(jìn)而水解多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg-AMC，釋放出熒光產(chǎn)物氨甲基香豆素，產(chǎn)生熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種血漿樣品（動(dòng)物、人體等）活化凝血因子5的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定。技術(shù)背景凝血因子5（FactorV）是維生素K非依賴性的不穩(wěn)定性單鏈糖蛋白，由肝組織、內(nèi)皮組織、巨核細(xì)胞、血小板等合成。血小板中含有20至25%凝血因子5。凝血因子5，作為活化凝血因子10的輔因子，成為凝血酶原復(fù)合物一員，包括活化凝血因子10、鈣離子和磷脂等，其功能在于轉(zhuǎn)化凝血酶原為凝血酶（THROMBIN；EC3.4.21.5），即活化凝血因子II（ActivatedFactorII；FactorIIa），構(gòu)成常見（common）凝血通路或機(jī)制。肝病、彌散性血管內(nèi)凝血（Disseminatedintravascularcoagulation；DIC）、原發(fā)性纖維蛋白溶解癥（primaryfibrinolysis）等引起凝血因子5減少或缺失。凝血因子5缺失將導(dǎo)致凝血酶原時(shí)間（prothrombintime；PT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（activatedpartialthromboplastintime；APTT）延長，而出現(xiàn)出血體質(zhì)。活化凝血因子X（FXa）及其輔因子活化凝血因子（FVa）一起，在鈣離子和磷脂的參與下，使凝血酶原（prothrombin）轉(zhuǎn)化為凝血酶（thrombin）基于由此水解人工合成的多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg--7-amido-4-methylcoumarin（HD-苯丙氨酰-pipecolyl-精氨酰氨甲基香豆素），釋放出熒光7-氨基-4-甲基香豆素（7-amido-4-methylcoumarin；AMC；激發(fā)波長360nm；散發(fā)波長460nm），來定量測定活化凝血因子V的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為：[詳細(xì)]

  2018-11-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 大鼠細(xì)胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）

  大鼠細(xì)胞色素P450亞酶2B2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書（中文版）[詳細(xì)]

  2015-05-07 00:00

  期刊論文

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