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逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量試劑盒說明書
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本文由 上海伯易生物科技有限公司 整理匯編
2018-09-04 10:00 2664閱讀次數(shù)
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逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量試劑盒說明書
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逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量試劑盒說明書
- 逆轉(zhuǎn)錄及熒光定量試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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逆轉(zhuǎn)錄PCR
- 逆轉(zhuǎn)錄PCR[詳細(xì)]
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2016-06-02 00:00
其它
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Realtime PCR熒光定量試劑盒(Taqman)說明書
- RealtimePCR熒光定量試劑盒(Taqman)說明書SolarbioBei極ngSolarbioScience&TechnologyCo.,LtdTel:010-56371207Fax:010-56371281/82Http://www.solarbio.cn貨號:SR2110規(guī)格:50T(1.25ml)/200T(5ml)[詳細(xì)]
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2024-09-30 18:58
產(chǎn)品樣冊
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組織鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒 說明書(中文版)
- 組織鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒 說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-29 00:00
報價單
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體液尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒說明書
- 主要用途是一種旨在通過三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶的水解,釋放黃色對硝基苯胺,產(chǎn)生吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細(xì)胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品(動物、人體等)尿激酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景尿激酶(urokinase;UK;EC3.4.21.73),又稱為尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(urokinase-typePlasminogenActivator;uPA),屬于絲氨酸蛋白酶,存在于血液、細(xì)胞外基質(zhì)和尿液中。尿激酶由411氨基酸構(gòu)成,分子量為54KD,有3個結(jié)構(gòu)域:絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域、kringle結(jié)構(gòu)域和生長因子結(jié)構(gòu)域。其主要的生理性底物為纖維蛋白溶酶原(Plasminogen),即纖維蛋白溶酶(plasmin)的酶原形式(zymogen),切離部位為Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切離后激活,纖維蛋白溶酶參與細(xì)胞蛋白水解過程,包括血栓溶解(thrombolysis)和細(xì)胞外基質(zhì)降解等。尿激酶與組織重構(gòu)、修復(fù)、血管形成(angiogenesis)性疾病和腫瘤擴(kuò)散有關(guān)。尿激酶的YZ劑是絲氨酸蛋白酶YZ劑(serpins),即纖維蛋白溶酶原激活劑YZ劑(PlasminogenActivatorInhibitor;PAI)。基于人工合成的三肽化合物底物p-EGR-pNA(pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nithoaniline;焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰對硝基苯胺)受到尿激酶的水解,釋放有色對硝基苯胺,在分光光度儀(405nm波長)下,測定吸光峰值的變化,來定量測定尿激酶的活性。尿激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升陰性液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;底物液(ReagentE)避免光照和反復(fù)凍融;有效保證6月用戶自備15[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞逆轉(zhuǎn)錄酶活性熒光定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-16 01:24
操作手冊
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植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過鈣離子特異性熒光探針Fluo-4,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定植物組織裂解懸液中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解萃取樣品中總鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求。Fluo-4,一種與鈣離子結(jié)合,其熒光強(qiáng)度迅速增強(qiáng)100倍的熒光探針,可以敏感測定微量游離鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長485nm,散發(fā)波長520nm,來定量測定植物組織細(xì)胞的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升反應(yīng)液(ReagentC)6毫升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentC)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2-AM,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2-AM,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,Rhod-2-AM,進(jìn)入細(xì)胞受到酯酶解離,同時其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm,來定量測定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)10毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升裂解液(ReagentF)200微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實驗步驟測定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm測定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測準(zhǔn)備1個黑色96孔板,標(biāo)記為:細(xì)胞樣品孔、空白對照孔(不含細(xì)胞)、Zda對照孔(含細(xì)胞)小心抽去細(xì)胞樣品孔的培養(yǎng)液加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動黑色96孔板,混勻放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照小心抽去細(xì)胞樣品孔里的上清液小心加入100微升清理液(ReagentA)到細(xì)胞樣品孔里重復(fù)實驗步驟9和10一次放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘加入5微升裂解液(ReagentF)到Zda對照孔里放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育15分鐘即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測讀:獲得相對熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對照孔RFU)÷(Zda對照孔RFU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時,須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測敏感度可達(dá)納摩爾級鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測本公司提供系列鈣生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途組織線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光定量檢測試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對熒光峰值的變化,來測定組織線粒體中總鈣離子濃度的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織(動物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,檢測敏感。技術(shù)背景鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calciumfluorophosphateapatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexedcalcium)和離子鈣(ionizedcalcium)。鈣對神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscularexcitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flamephotometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2,羅丹明123(rhodamine123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,同時其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里,由此用于測定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm,來定量測定線粒體的鈣濃度。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)40毫升染色液(ReagentB)30微升介導(dǎo)液(ReagentC)600微升飽和液(ReagentD)2毫升陰性液(ReagentE)2毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存染色液(ReagentB)和介導(dǎo)液(ReagentC)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于工作液配制的容器細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于染色孵育黑色96孔板:用于樣品操作的容器熒光酶標(biāo)儀:用于熒光分析實驗步驟測定準(zhǔn)備設(shè)定好熒光酶標(biāo)儀(22℃):激發(fā)波長550nm,散發(fā)波長590nm準(zhǔn)備好純化的線粒體樣品,置于冰槽里融化測定開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的染色液(ReagentB)室溫下融化,然后分別移出30微升介導(dǎo)液(ReagentC)和1.5微升染色液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管,標(biāo)記為染色工作液,并放在暗室里備用。然后進(jìn)行下列操作。二、熒光酶標(biāo)儀檢測準(zhǔn)備1個黑色96孔板,標(biāo)記為:線粒體樣品孔、空白對照孔(不含線粒體)、Zda對照孔(不含線粒體)移取100微升純化線粒體樣品(100微克)到線粒體樣品孔里加入100微升飽和液(ReagentD)到Zda對照孔里加入100微升陰性液(ReagentE)到空白對照孔里分別加入10微升染色工作液到所有孔里輕輕搖動黑色96孔板,混勻室溫下(22℃),孵育30分鐘,避免光照放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱里孵育30分鐘,避免光照即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀測讀:獲得相對熒光單位(relativefluorescenceunit;RFU)計算樣品線粒體鈣離子濃度【(樣品RFU-空白對照孔RFU)÷(Zda對照孔RFU-樣品RFU)】X570(納摩爾;解離常數(shù))=納摩爾/100微克線粒體注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時,須戴手套避免使用EDTA等處理樣品孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度檢測敏感度可達(dá)納摩爾級鈣濃度范圍可以使用熒光分光光度儀檢測本公司提供系列鈣生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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DRR081A 熒光定量試劑盒|產(chǎn)品簡介|促銷價格
- DRR081A熒光定量試劑盒特價促銷產(chǎn)品簡介DRR081A熒光定量試劑盒特價促銷1500DRR081A熒光定量試劑盒特價促銷產(chǎn)品明細(xì)制品內(nèi)容(50μl反應(yīng)×200次量)SYBRPremixExTaqII(PerfectRealTime)(2×Conc.)*11.0ml×5支ROXReferenceDye(50×Conc.)*2200μl×1支ROXReferenceDyeII(50×Conc.)*2200μl×1支*1內(nèi)含TaKaRaExTaqHS,dNTPMixture,Mg2+,SYBRGreenI等。*2只使用在ABI等公司的RealTimePCR擴(kuò)增儀上,用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。使用ABIPRISM7000/7700/7900HT和7300Real-TimePCRSystem使用ROXReferenceDye,7500Real-TimePCRSystem和7500FastReal-TimePCRSystem使用ROXReferenceDyeII。ThermalCyclerDiceRealTimeSystem、LightCycler等RealTimePCR擴(kuò)增儀時不必使用。LimitedUseLabelLicense:[M57],[L11],[L15],[L46],[P5]■制品說明本制品是采用SYBRGreenI嵌合熒光法進(jìn)行RealTimePCR的專用試劑。制品中含有RealTimePCR反應(yīng)的Z適濃度SYBRGreenI,是一種2×濃度的PremixType試劑,進(jìn)行實驗時,PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。本制品Buffer經(jīng)過改良,使反應(yīng)特異性比SYBRPremixExTaq(PerfectRealTime)(TaKaRaCode:DRR041)更高。YZ非特異性反應(yīng),能夠在更廣的范圍內(nèi)進(jìn)行準(zhǔn)確定量。本Buffer和改良后的HotStart法用DNA聚合酶TaKaRaExTaqHS組合使用,可以進(jìn)行再現(xiàn)性好、可信度高的RealTimePCR解析。本制品可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測,重復(fù)性好,可信度高?!霰4?℃避光保存,避免-20℃凍結(jié)制品。-20℃反復(fù)凍融制品性能可能下降?!鲈噭┖刑亻L1.適用于RealTimePCR反應(yīng),可以快速正確地對目的基因進(jìn)行檢測、定量。2.在2×濃度的Premix中,預(yù)先混有SYBRGreenI,PCR反應(yīng)液配制時,只需加入模板、引物、滅菌蒸餾水便可進(jìn)行RealTimePCR反應(yīng),操作簡單方便。3.DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRaExTaqHS,可以進(jìn)行HotStart法PCR反應(yīng),再與TaKaRa公司獨自開發(fā)的Buffer系統(tǒng)相結(jié)合,具有高擴(kuò)增效率,高擴(kuò)增靈敏度,高擴(kuò)增特異性之特點。■注意事項1.使用時請上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。如果試劑沒有混勻,其反應(yīng)性能會有所下降。另外,請不要使用振蕩器混勻。2.請于冰上調(diào)制反應(yīng)試劑。3.本制品中含有熒光染料SYBRGreenI,保存制品或配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強(qiáng)光照射。4.反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,盡量避免污染。ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTDDRR081A熒光定量試劑盒特價促銷DRR081A熒光定量試劑盒特價促銷聯(lián)系方式上海索萊寶生物科技有限公司電話:021-6485566518018609966傳真:021-54261506郵編:200233地址:上海市欽江路15號14層郵箱:solarbio@126.com網(wǎng)址:www.shsolarbio.comRecombinantMurineEGF細(xì)胞因子上海索萊寶021-54100800[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-26 00:00
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細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒說明書
- 細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)中甲氧基異酚唑轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450亞酶1A2,簡稱為CYP1A2,是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能氧化酶系統(tǒng)的成員之一,也是芳香族碳?xì)浠衔锛恿u基酶(arylhydrocarbonhydrorylase;AHH)的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15%。與CYP1A1高度同源,特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個多態(tài)性變體,Z常見的是:1A和1F,與kafeiyin代謝和遲發(fā)性皮膚卟啉癥(porphyriacutaneatarda)相關(guān)。CYP1A2的作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation),以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳?xì)浠衔镎T導(dǎo)CYP1A2的表達(dá)。甲氧基異酚唑脫甲基酶(7-methoxyresorufin-O-demethylase;MROD)的活性是細(xì)胞色素P450亞酶1A2的診斷標(biāo)記,其基于MROD選擇性催化細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑(7-methoxyresorufin)在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基異吩唑酮(resorufin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長530nm,散發(fā)波長590nm),來定量測定細(xì)胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升底物液(ReagentC)微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,底物液(ReagentC)和標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于標(biāo)準(zhǔn)樣品操作的容器恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿或酶標(biāo)板:用于反應(yīng)和比色的容器熒光分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于熒光分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好待測樣品(例如細(xì)胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里2.設(shè)定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長530nm,散發(fā)波長590nm,并置零3.準(zhǔn)備好5個1.5毫升離心管,標(biāo)記為1至5號管4.加入xx微升緩沖液(ReagentA)到1號管5.分別加入xx微升緩沖液(ReagentA)到2至5號管6.移取xx微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到1號管,混勻7.小心移取xx微升1號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到2號管,混勻8.小心移取xx微升2號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到3號管,混勻9.小心移取xx微升3號管稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)到4號管,混勻10.將1至5號管放進(jìn)冰槽里備用,避免光照;標(biāo)準(zhǔn)管濃度見下表管號緩沖液(ReagentA)標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentD)標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號管納摩爾/升3微升微升2號管納摩爾/升4微升微升3號管納摩爾/升5微升00二、標(biāo)準(zhǔn)曲線測定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測獲得相對熒光讀數(shù)8.重復(fù)實驗步驟1至7四次9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為相對熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)三、樣品測定1.移取xx微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿2.加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)3.加入xx微升底物液(ReagentC)4.加入xx微升待測樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)5.上下傾倒數(shù)次,混勻6.在37℃溫度下孵育10分鐘7.即刻放進(jìn)熒光分光光度儀檢測:獲得相關(guān)熒光讀數(shù)8.(選擇步驟)重復(fù)實驗步驟1至7,測讀新的樣品9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度四、計算樣品活性[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷10(分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標(biāo)板測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:標(biāo)準(zhǔn)樣品和待測樣品2.分別移取xx微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.分別加入xx微升反應(yīng)液(ReagentB)4.分別加入xx微升底物液(ReagentC)5.分別加入xx微升上述配制的標(biāo)準(zhǔn)液或待測樣品(20微克微粒體蛋白或100微克細(xì)胞裂解萃取液蛋白)(注意:樣品須清澈)6.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板7.在37℃溫度下孵育10分鐘8.即刻放進(jìn)熒光酶標(biāo)儀檢測:獲得相對熒光讀數(shù)9.構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線:縱座標(biāo)(Y軸)為相對熒光單位;橫座標(biāo)(X軸)為標(biāo)準(zhǔn)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)10.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度11.活性計算:[根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品對應(yīng)羥基異吩唑酮濃度(納摩爾/升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷xx(反應(yīng)時間;分鐘)]=皮摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=皮摩爾/毫克/分鐘注意事項1.本產(chǎn)品為25次(比色皿)或85次(酶標(biāo)板)操作,包括標(biāo)準(zhǔn)液2.操作時,須戴手套3.系統(tǒng)操作過程中,標(biāo)準(zhǔn)液測定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要(本公司提供細(xì)胞可溶性總蛋白質(zhì)制備試劑盒30002.1)5.孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行熒光測定6.如果酶活性過低,可以增加反應(yīng)時間至30分鐘7.熒光測定后,比色皿須清洗徹底8.建議待測樣本為微粒體,其蛋白濃度為20微克/100微升;待測樣本為細(xì)胞裂解懸液,其蛋白濃度為100至200微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)9.如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度10.通常人體細(xì)胞微粒體細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性濃度為:200-600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11.細(xì)胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為:在37℃,pH7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠轉(zhuǎn)化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個活性單位12.本公司提供系列毒理學(xué)檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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2024-09-11 17:46
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2024-09-21 17:30
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細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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2015-05-04 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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細(xì)胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細(xì)胞色素P450酶系(CYP-ECOD)總活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)中乙氧基香豆素轉(zhuǎn)化為羥基香豆素后熒光峰值的變化,即采用熒光法來測定樣品中酶系活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細(xì)胞或組織裂解萃取液樣品(動物、人體)或純化微粒體樣品細(xì)胞色素P450酶系的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景細(xì)胞色素P450酶是肝細(xì)胞微粒體復(fù)合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內(nèi)外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學(xué)污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。乙氧基香豆素脫乙基酶(7-ethoxycoumarinO-deethylase;ECOD)的活性是細(xì)胞色素P450酶系的診斷標(biāo)記,其基于ECOD廣泛性催化細(xì)胞色素P450亞酶的活性。乙氧基香豆素(7-ethoxycoumarin)在乙氧基香豆素脫乙基酶的催化下,轉(zhuǎn)化為羥基香豆素(7-hydroxycoumarin)后熒光峰值的變化(激發(fā)波長368nm,散發(fā)波長456nm),來定量測定細(xì)胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脫乙基酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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熒光定量PCR應(yīng)用領(lǐng)域
- 熒光定量PCR應(yīng)用領(lǐng)域[詳細(xì)]
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2024-09-27 12:33
其它
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細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
課件
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細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
產(chǎn)品樣冊
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