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組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-04-14 00:00 215閱讀次數(shù)
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組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
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組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法
- 主要用途組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑是一種旨在通過CpG甲基轉(zhuǎn)移酶、腺苷同型半胱氨酸核苷酶、腺嘌呤脫氨酶和黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)中生成過氧化氫,使用顯色染料和過氧化酶后,產(chǎn)生醌亞胺產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解樣品中S-腺苷甲硫氨酸含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)S-腺苷甲硫氨酸的定量檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosylmethionine;SAM或AdoMet)是參與甲基轉(zhuǎn)移的輔酶和多胺合成的前體(precursor),通過甲硫氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶(methionineadenosyltransferase)催化腺苷三磷酸(adenosinetriphosphate;ATP)和甲硫氨酸(methionine)結(jié)合而成,其分子量399.447,分子式為C15H23N6O5S。作為供體,參與轉(zhuǎn)甲基(transmethylation)、轉(zhuǎn)硫(transsulfuration)和轉(zhuǎn)氨丙基(transaminopropylation)代謝以及多胺合成。大約40多個反應(yīng)轉(zhuǎn)甲基反應(yīng),由S-腺苷甲硫氨酸提供甲基基團(tuán)到核酸、蛋白和脂類分子上。主要反應(yīng)場所在肝臟。S-腺苷甲硫氨酸異常,與腫瘤發(fā)生有關(guān),而S-腺苷甲硫氨酸異常降低,與抑郁癥、癡呆癥(dementia)、空泡性脊髓?。╲acuolarmyelopathy)、維生素B12缺乏癥(vitaminB12deficiency)等發(fā)生有關(guān)。此外,機(jī)體內(nèi)的SAM含量顯著高于SAH。SAM/SAH比例降低,則引起DNA甲基化不足,染色體構(gòu)像改變,YZ細(xì)胞甲基轉(zhuǎn)移酶活力,干擾同型半胱氨酸和腺嘌呤的清除,進(jìn)一步導(dǎo)致基因表達(dá)和信號傳導(dǎo)異常,以及免疫缺陷等?;赟-腺苷甲硫氨酸通過CpG甲基轉(zhuǎn)移酶(M.SssI;42KD)把甲基基團(tuán)轉(zhuǎn)移到人工合成甲基受體底物分子poly[d(I-C)d(I-C)]上,而生成S腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine;AdoHcy),進(jìn)而快速被腺苷同型半胱氨酸核苷酶(AdoHcynucleosidase)分解為S-核糖同型半胱氨酸(S-ribosylhomocysteine)和腺嘌呤(adenine),腺嘌呤由腺嘌呤脫氨酶(Adeninedeaminase)產(chǎn)生次黃嘌呤,通過黃嘌呤氧化酶(xanthineoxidase)催化,生成過氧化氫,然后借助過氧化酶(peroxidase)的作用,與對羥基苯甲酸(p-hydroxybenzoicacid)和氨基安替比林(4-aminoantipyrine)反應(yīng),形成有色醌亞胺(quinoneimine),通過其吸收峰值的變化(510nm波長),來定量分析S-腺苷甲硫氨酸的含量。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
- 組織S-腺苷甲硫氨酸(SAM或AdoMet)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2015-04-14 00:00
期刊論文
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昆蟲S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA試劑盒
- 昆蟲S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-09-14 00:00
實驗操作
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組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物組織,尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞(melanocyte)或色素細(xì)胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織黑色素含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 組織黑色素含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2024-09-11 18:03
課件
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細(xì)胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細(xì)胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物細(xì)胞,尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞(melanocyte)或色素細(xì)胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化?。╫culocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等,本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機(jī),方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標(biāo)準(zhǔn)品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機(jī):用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一:血漿樣品1.準(zhǔn)備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲存管2.抽取2毫升血液,置于儲存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對照,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進(jìn)酶標(biāo)儀,置零8.取出酶標(biāo)板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動酶標(biāo)板10.即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊
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組織硫代酸反應(yīng)物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒
- 組織硫代酸反應(yīng)物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織硫代酸反應(yīng)物(TBARS)比色法定量檢測試劑是一種旨在通過TBARS(硫代酸反應(yīng)物)技術(shù),檢測與之反應(yīng)的丙二醛,其產(chǎn)物丙二醛雙硫代酸加合物,在分光光度儀下,檢測其吸光峰值的變化,即采用比色法測定組織樣品中硫代酸反應(yīng)物含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種動物組織(人體、動物、昆蟲等)中硫代酸反應(yīng)物的含量檢測。廣泛用于組織氧化應(yīng)急研究,特別是脂質(zhì)過氧化的分析。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,重復(fù)性好。技術(shù)背景脂質(zhì)過氧化反應(yīng)(lipidperoxidation;LPO)是動物和植物細(xì)胞損傷的一種機(jī)制,也是評價細(xì)胞和組織氧化應(yīng)急的標(biāo)志。含有兩個或以上雙鍵(doublebond)的多聚不飽和脂肪酸(PolyunsaturatedFattyAcid)對自由基以及其它活性氧化族高度敏感,導(dǎo)致產(chǎn)生脂質(zhì)過氧自由基LOO+(lipidperoxylradical),使脂類氧化(lipidoxidation)。脂質(zhì)過氧化自由基LOO+同時通過攻擊分子內(nèi)雙鍵,經(jīng)環(huán)化、裂解形成環(huán)狀內(nèi)過氧化物(cyclicendoperoxide),例如丙二醛(malondialdehyde;MDA)和4-羥基壬烯酸(4-hydroxynonenal;HNE)等氫過氧化物(hydroperoxide)和醛(aldehyde),為自然產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,屬于硫代酸反應(yīng)物(TBARS)混合物。硫代酸反應(yīng)物含量增加,表明氧化應(yīng)急增強(qiáng)。作為脂質(zhì)過氧化性低分子量終端產(chǎn)物之一的丙二醛,廣泛用于脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的指標(biāo),即硫代酸反應(yīng)物(thiobarbituricacidreactivesubstance;TBARS)表述為丙二醛等類物(MDAequivalentlent),以評價脂質(zhì)氧化或氧化應(yīng)急程度。在丁羥甲苯(ButylatedHydroxytoluene;BHT)和EDTA的參與幫助減少干擾性脂類氧化的情況下,丙二醛與硫代酸(thiobarbituricacid;TBA)進(jìn)行反應(yīng),產(chǎn)生丙二醛雙硫代酸加合物(MDA-TBA2),通過分光光度儀(532nm波長)來定量分析硫代酸反應(yīng)物的含量,其反應(yīng)方式為:[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過比色探針對硝基苯胺標(biāo)記人工合成的乙酰化p53多肽底物,經(jīng)過SIRT1脫乙酰基后,被位點特異性氨基肽酶水解,釋放黃色對硝基苯胺,即采用比色法來測定組織裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動物、人體)、核蛋白樣品、部分或完全純化酶樣品中SIRT1的活性定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景人體組蛋白脫乙?;福╤istonedeacetylase;HDAC)家屬分成三類共20多個蛋白:種類I(classI)與酵母Rpd3蛋白同源,包括HDAC1、2、3、8,存在于細(xì)胞核中;種類II(classII)與酵母Hda1蛋白同源,包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR,存在于細(xì)胞核和細(xì)胞漿里;上述兩大種類的蛋白分子催化結(jié)構(gòu)域含有鋅,且曲古菌素A(trichostatinA;TSA)敏感。種類III(classIII)為NAD+輔助因子必需,又稱為sirtuins,與酵母Sir2(SilentInformationRegulator2)同源,包括SIRT1至7等,為曲古菌素A(trichostatinA;TSA)不敏感型賴氨酸脫乙酰基酶(lysyl-deacetylase)。催化賴氨酸脫乙?;磻?yīng),以及由NAD+和乙酰(acetyl)基團(tuán)轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的煙酰胺(nicotinamide)和O-乙酰ADP核糖(O-acetyl-ADP-ribose)。SIRT1位于細(xì)胞核內(nèi),與酵母Sir2同源性Z高。其功能在于調(diào)節(jié)p53活性和YZ細(xì)胞凋亡?;谌斯ず铣傻囊阴;痯53(379至382氨基酸位點)多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys(Ac)具有抗氨基肽酶切離的功能,首先使用比色染料對硝基苯胺(p-Nitroaniline;p-NA)來標(biāo)記乙?;痯53多肽底物,其次進(jìn)行脫乙?;?,Z后底物進(jìn)一步在氨基肽酶的催化酶解,釋放出具有強(qiáng)烈吸光值的黃色對硝基苯胺(波長405nm),由此來定量測定沉默調(diào)節(jié)蛋白1的活性。用戶自備磷酸鹽緩沖溶液(PBS):用于清洗組織樣品15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器1.5毫升離心管:用于樣品操作和保存的容器(微型)臺式離心機(jī):用于組織細(xì)胞預(yù)處理培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)物孵育96孔板或100微升1厘米光徑比色皿:用于反應(yīng)和比色的容器酶標(biāo)儀或分光光度儀:用于比色分析注意事項1.本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對照2.操作時,須戴手套3.系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次4.樣品須澄清,至關(guān)重要5.樣品處理時,避免使用蛋白酶YZ劑、PMSF、烷基胺(alkylamine)等6.孵育反應(yīng)完成后即刻進(jìn)行比色測定7.濾波器可以使用波長400nm替代405nm8.測定值由低到高變化;酶動法測定可以持續(xù)60分鐘9.測定值吸光讀數(shù)越高,表明酶活性越高10.比色測定后,比色皿須清洗徹底11.待測樣本為核蛋白樣品,其蛋白濃度為50微克/20微升;待測樣本為組織裂解懸液,其蛋白濃度為200微克/20微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)12.如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度13.沉默調(diào)節(jié)蛋白1單位活性定義為:在30℃,pH8.0條件下,每分鐘內(nèi)能夠釋放1微摩爾對硝基苯酚所需的酶量作為一個活性單位14.本公司提供系列組蛋白脫乙酰基酶檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒說明書
- Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等,本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機(jī),方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標(biāo)準(zhǔn)品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機(jī):用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一:血漿樣品1.準(zhǔn)備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲存管2.抽取2毫升血液,置于儲存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進(jìn)4℃微型臺式離心機(jī)離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對照,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進(jìn)酶標(biāo)儀,置零8.取出酶標(biāo)板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動酶標(biāo)板10.即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]
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2024-09-29 11:52
產(chǎn)品樣冊
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組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量
- 主要用途組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測試劑是一種旨在通過先酸性預(yù)處理,有機(jī)溶劑萃取后,在堿性條件下,與萘醌磺酸鈉進(jìn)行反應(yīng)后,由次亞硫酸鈉作用產(chǎn)生的紅色顯色產(chǎn)物,在分光光度儀下,即采用比色法來測定樣品中半胱氨酸含量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良沙利文反應(yīng)(SullivanReaction)、成功實驗證明的。其適用于各種組織(動物、人體等)裂解萃取液樣品中半胱氨酸水平檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景L-半胱氨酸(L-cysteine;Cys;C)學(xué)名為2-氨基-3-巰基丙酸,是一種疏水性非必需α-氨基酸,分子式是HO2CCH(NH2)CH2SH或C3H7NO2S,分子量121.16,編碼為UGU和UGC。其側(cè)鏈?zhǔn)菐€基(thiol),為非極性,作為親核劑(nucleophile),參與酶類反應(yīng)。氧化后,產(chǎn)生二硫化物和衍生物(disulfidederivative)胱氨酸(cystine),二硫化物成為蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)形式。動物通過胱硫醚β合酶(cystathioninebetasynthase)和胱硫醚γ裂合酶(cystathionegammalyase)由絲氨酸(serine)和蛋氨酸(methionine)轉(zhuǎn)化成同源半胱氨酸(homocysteine)、S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine)、胱硫醚(cystathionine),Z后產(chǎn)生半胱氨酸和α-酮基丁酸(α-ketobutyrate)。而植物和細(xì)菌通過絲氨酸乙?;D(zhuǎn)移酶(transacetylase)和O-乙酰絲氨酸巰基裂合酶(O-acetylserine(thio)lyase),由絲氨酸產(chǎn)生半胱氨酸和乙酸。半胱氨酸,是谷胱苷肽的前體,具有抗氧化作用、抗蛋白水解、使蛋白分子之間交聯(lián)、參與硫化物代謝、與各種金屬原子,例如鐵、鋅、銅等結(jié)合、參與蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄后修飾、中和酒精毒性等功能。應(yīng)用于食品調(diào)味和添加、化妝品防護(hù)、生物標(biāo)記、藥物等。血漿半胱氨酸水平用于評估心血管疾病風(fēng)險;半胱氨酸和同源半胱氨酸的比例可以評價靜脈血栓形成、心肌梗死、腎衰的風(fēng)險。在植物中,半胱氨酸參與各種植物生理活動,例如光質(zhì)流動(photoplasmicstreaming)、電子傳導(dǎo)、光合成磷酸化、細(xì)胞分裂、維持抗壞血酸還原狀態(tài)、抗寒性(frosthardiness)、調(diào)節(jié)作物成熟等。半胱氨酸代謝異常將導(dǎo)致胱氨酸?。╟ystinosis)、胱氨醇尿(cystinuria)、肝損傷、生長遲緩、毛發(fā)去色(hairdepigmentation)、水腫(edema)、嗜睡(lethargy)等?;诎腚装彼?,通過酸性預(yù)處理,有機(jī)溶劑萃取,進(jìn)而在堿性條件下,與萘醌磺酸鈉(1,2-naphthoquinone-4-sodiumsulfonate)進(jìn)行反應(yīng),由次亞硫酸鈉(sodiumhyposulfite)作用,產(chǎn)生顯色產(chǎn)物,呈現(xiàn)紅色,通過分光光度儀(505nm波長)來定量分析半胱氨酸的含量。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織氧化應(yīng)激活性氧羥自由基比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 組織氧化應(yīng)激活性氧羥自由基比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書[詳細(xì)]
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2015-09-16 00:00
專利
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組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
期刊論文
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組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
期刊論文
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組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書...
- 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過檢測反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用比色法來測定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類NAD(P)依賴性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進(jìn)入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?;趤碜杂谝掖即x產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過測定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長),來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升陰性液(ReagentF)毫升專性液(ReagentG)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存緩沖液(ReagentC)、反應(yīng)液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和專性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保證6月[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織基質(zhì)金屬蛋白酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過含硫多肽底物以及特定YZ劑存在與否的情況下,受到MMP2的水解,釋放出巰基,進(jìn)而使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或完全純化酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,安全可靠。技術(shù)背景基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrixmetalloproteinases;MMPs)是一類結(jié)構(gòu)高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內(nèi)肽酶的總稱,因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。其功能在于分解細(xì)胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現(xiàn)的MMPs至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix)成分,同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissueresorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節(jié)炎、癌細(xì)胞浸入轉(zhuǎn)移等。根據(jù)降解的底物不同可將MMPs分為4大類:(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱明膠酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內(nèi)絕大多數(shù)細(xì)胞并不儲備MMPs,當(dāng)需要MMPs的信號傳遞到細(xì)胞后才臨時合成,合成的MMPs以無活性的酶原(proenzyme)形式分泌到細(xì)胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應(yīng)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2,又稱明膠酶A(gelatinase-A)或IV型膠原酶(typeIVcollagenase),其前體分子量為72kDa,激活后分子量為62和56kDa。它在血清或細(xì)胞上清中濃度通常為10至200納克/毫升。它的作用目標(biāo)是天然和變性膠原蛋白(collagens)、纖維連接蛋白(fibronectin)、彈性纖維蛋白(elastin)、層粘連蛋白-5(laminin-5)、前體腫瘤壞死因子-α(pro-TNF-α)和神經(jīng)(蛋白)聚糖(neurocan)。基質(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移、血管形成、動脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?;诤蚨嚯模╰hiopeptide)底物Ac-PLG(2-mercapto-4-methyl-pentanoyl)-LG-OC2H5,在特異性YZ劑OA-Hy存在與否的條件下,受到MMP2的水解,釋放出巰基(sulfhydrylgroup),進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量測定組織基質(zhì)金屬蛋白酶2的特異活性?;|(zhì)金屬蛋白酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后吸光峰值的,即采用光度法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體、昆蟲等)谷氨酰胺酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶(glutaminase;EC3.5.1.2)是一種氨基酸水解酶(amidohydrolase),將谷氨酰胺脫氨基(deaminating)轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性:其功能在肝細(xì)胞中產(chǎn)生的氨,用于合成尿素;在腎小管上皮細(xì)胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌,調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡;同時在膠質(zhì)細(xì)胞(glialcell)和腸細(xì)胞中也有表達(dá)。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛,例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等。基于底物谷氨酰胺在谷氨酰胺酶酶的作用下,轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣,進(jìn)而在谷氨酸脫氫酶的催化下,伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD+)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm波長),來定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒
- 血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量檢測試劑是一種旨在通過特異反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)還原后峰值的,即采用比色法來測定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種(動物、人體、昆蟲等)血液樣品中包括白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血漿和血清等葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphatedehydrogenase;G6PD)是一種細(xì)胞漿中的酶,參與磷酸戊糖代謝通路,通過維持還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)水平,提供細(xì)胞還原性能量,進(jìn)而保持谷胱甘肽水平,幫助細(xì)胞,例如紅細(xì)胞,防止氧化損傷。同時NADPH的產(chǎn)生,促進(jìn)組織細(xì)胞(例如肝臟、乳腺、脂肪組織、腎上腺等)生物合成脂肪酸、類異戊二烯等。在植物中,存在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的多種異構(gòu)體,位于細(xì)胞漿、質(zhì)體基質(zhì)(plastidicstroma)、和過氧化體。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷將導(dǎo)致急性溶血性貧血,即蠶豆病。基于葡萄糖-6-磷酸(D-glucose-6-phosphate)在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的作用下,轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖酸內(nèi)脂(6-phosphoglucono-δ-lactone)產(chǎn)物后,同時其輔酶因子氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;β-NADP)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;β-NADPH),通過測定吸光值的變化(340nm波長),來定量分析葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的總活性。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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組織硫代酸反應(yīng)物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織硫代酸反應(yīng)物(TBARS)比色法定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-04 00:00
期刊論文
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