1. 樣品準(zhǔn)備/提取 1、稱取0.2 g蛋樣品，加入20 mL溫水，充分溶解；

2、將樣品溶液超聲提取5 min；

3、超聲后，加入0.5 mL60%HClO4，振蕩2 min；

4、8000rpm，離心5 min，取出10 mL上清液，待凈化。 2. SPE柱凈化——ProElut PLS 150 mg/6 mL（Cat.#68004） (1)活 化：6 mL甲醇，6 mL水活化； (2)上 樣：加入待凈化液，棄去流出液； (3)淋 洗：加入6 mL0.01mol/L HCl溶液，棄去流出液； (4)洗 脫：加入6 mL甲醇，收集流出液，55 ℃減壓蒸干，用0.5%氨水溶液定容至1 mL，供HPLC檢測(cè)。

HPLC分析條件 色譜柱：Diamonsil C18（2） 250×4.6 mm ID，5 μm （Cat.#99603）

流動(dòng)相：A : B=:92:8 A：0.05 mol/LKH2PO4（用KOH調(diào)節(jié)pH6.3） B：甲醇 流 速：1.0 mL/min

檢測(cè)器：UV 280

柱 溫：30 ℃

進(jìn)樣量：20 μL

本方法適用于蛋中葉酸的檢測(cè)。

葉酸